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文檔簡介
1、目的:采用免疫組化法測定兔KOA關節(jié)軟骨細胞中MMP-1、TIMP-1表達的影響,探討自擬新方康健關節(jié)葆對關節(jié)軟骨修復和保護的可能機制,并闡明該藥在改善關節(jié)功能和保護關節(jié)軟骨等方面的作用,為臨床治療KOA提供實驗及其理論依據。
方法:1.分組、造模:成年健康新西蘭大白兔50只,雌、雄各半,按體重從輕到重進行編號,并隨機分成5組。A:空白組,B:模型組,C:氨基葡萄糖組(西藥對照組), D:壯骨關節(jié)丸組(中藥對照組)、 E:康健
2、關節(jié)葆組(實驗組),每組10只。所有實驗的新西蘭大白兔在同等條件下飼養(yǎng)一周,無其它不適后,進行造模,除空白組外,余組用4%木瓜蛋白酶0.1ml右膝關節(jié)腔內注射,4周后建立兔右膝骨關節(jié)炎模型,是目前常用的造模方式。
2.給藥方法:在常規(guī)喂養(yǎng)一周后,開始造模、給藥,A組(空白組):不造模,生理鹽水20ml,二次/日,10ml/次,灌服。B組(模型組):只造模,生理鹽水20ml,二次/日,10ml/次,灌服。C組(氨基葡萄糖組):氨
3、基葡萄糖液20ml(0.06g/ml)/日,二次/日,10ml/次,灌服。D組(壯骨關節(jié)丸組):壯骨關節(jié)丸水溶液20ml(0.07g/ml)/日,二次/日,10ml/次,灌服。E組(康健關節(jié)葆組):康健關節(jié)葆水溶液20ml(0.07g/ml)/日,二次/日,10ml/次,灌服。
3.取材及檢測:在實驗動物造模4周結束后,分別取各組兔膝關節(jié)軟骨,行大體肉眼觀察、HE染色觀察及免疫組化法測定MMP-1、TIMP-1的含量變化,行統
4、計學分析。
結果:1.從實驗動物的解剖后,肉眼大體觀察顯示,模型組兔膝關節(jié)軟骨具有明顯的退行性改變,符合造模的要求,康健關節(jié)葆能很好的緩解關節(jié)軟骨破壞,且比其它對照組效果顯著。2.HE染色后光學顯微鏡觀察及兔關節(jié)軟骨細胞 MMP-1、TIMP-1免疫組化顯示:康健關節(jié)葆組的 MMP-1表達較模型組明顯降低,P<0.01有顯著性差異??到£P節(jié)葆組的 TIMP-1表達較模型組升高,P<0.05有統計學意義。由此可以說明康健關節(jié)葆能
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