小麥地方品種耐鹽鑒定及耐鹽相關(guān)基因的分析.pdf

1、土壤鹽漬化是影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境的主要非生物逆境之一。隨著人口的增加和耕地的減少，如何開發(fā)利用鹽漬化土壤己成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和環(huán)境生態(tài)亟待解決的問題。利用生物技術(shù)深入并展種質(zhì)資源的耐鹽性研究，挖掘其中優(yōu)異耐鹽相關(guān)基因，培育耐鹽作物新品種，是改良和利用鹽漬化土地，增加糧食產(chǎn)量和維持農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展最為經(jīng)濟(jì)有效的策略之一。 本實(shí)驗(yàn)以102份小麥地方品種群體為研究材料進(jìn)行耐鹽性鑒定，選出鑒定結(jié)果呈中間型的群體進(jìn)行耐鹽基因構(gòu)成分析；同時(shí)，利用

2、RT-PCR技術(shù)分離和克隆耐鹽相關(guān)基因，通過原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)目的蛋白，旨在為耐鹽小麥種質(zhì)的利用提供理論依據(jù)和應(yīng)用指導(dǎo)。 本研究取得如下研究成果： 1．對(duì)102份小麥地方品種進(jìn)行耐鹽性鑒定，篩選出22份耐鹽性鑒定呈中間型的群體供第四章耐鹽基因構(gòu)成的研究。對(duì)鹽處理小麥進(jìn)行形態(tài)指標(biāo)的分析，得出結(jié)論：芽期時(shí)，相對(duì)芽長與鹽害指數(shù)呈顯著的負(fù)相關(guān)；苗期時(shí)，相對(duì)根長和鹽處理后的根冠比與鹽害指數(shù)里顯著負(fù)相關(guān)；小麥種質(zhì)芽期與苗期的耐鹽性沒有

3、直接關(guān)系。 2．對(duì)小麥地方品種36號(hào)群體進(jìn)行SSR遺傳多樣性分析，共檢測到26個(gè)等位變異，每個(gè)SSR位點(diǎn)的變異范圍為2～3個(gè)，平均每對(duì)引物的等位變異為2.36個(gè)。每對(duì)SSR引物的多態(tài)信息含量的范圍為0.071～0.512，平均為0.26?？梢钥闯觯←湹胤狡贩N群體內(nèi)部單株之間的遺傳變異程度比較小，需要利用一種變異廣泛的標(biāo)記來進(jìn)行耐鹽基因構(gòu)成的分析。 3．利用生物信息學(xué)的方法，找到與耐鹽相關(guān)的基因，設(shè)計(jì)引物，最后篩選到依據(jù)

4、DREB片段設(shè)計(jì)的引物，通過PCR-SSCP技術(shù)對(duì)耐鹽鑒定呈中間型的22個(gè)群體進(jìn)行基因構(gòu)成的分析，結(jié)果得到了18種帶型，共17個(gè)單核苷酸突變位點(diǎn)，其中12個(gè)位點(diǎn)為轉(zhuǎn)換，3個(gè)為顛換，1個(gè)為插入，1個(gè)為缺失。作物的耐鹽性是多基因控制一個(gè)較為復(fù)雜的數(shù)量性狀，單從DREB基因的單核苷酸多態(tài)性情況還不能完全解釋小麥的耐鹽性。 4．以鹽處理的小麥為材料，利用RT-PCR的方法克隆出DREB基因的編碼區(qū)，與發(fā)表的小麥DREB基因有99％的同源