草莓耐寒性狀分子標記分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、草莓(Fragaria ananassa Duch.)屬薔薇科草莓屬,是我國普遍栽培的兼具高營養(yǎng)價值和經(jīng)濟價值的水果。在實際栽培中,特別是北方嚴寒季節(jié),設施結(jié)構(gòu)一般相對簡單,低溫是影響草莓產(chǎn)量和品質(zhì)的主要因素之一。本試驗以合肥地區(qū)主栽草莓10個品種的葉片為試材,進行0℃,-2℃,-4℃,-6℃,-8℃,5個溫度梯度的低溫處理,計算出10個草莓材料的半致死溫度(LT50),然后與冷害指數(shù)作相關(guān)分析,確定各個草莓品種耐寒能力的強弱;運用單因

2、素試驗設計方法,對影響草莓SRAP反應體系的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物濃度以及模板DNA濃度和退火溫度等因素進行優(yōu)化,建立適宜草莓SRAP-PCR反應體系;從110對引物中篩選出55對多態(tài)性好、條帶清晰穩(wěn)定的引物對,對其進行統(tǒng)計分析、構(gòu)建聚類樹型圖,對與草莓耐寒相關(guān)的SRAP標記作初步研究,為草莓選育耐寒品種奠定基礎。本試驗獲得的主要結(jié)果如下:
  (1)不同低溫脅迫下,各個草莓品種的電解質(zhì)滲透率均隨著溫度降低

3、而增大,處理溫度與電解質(zhì)滲透率之間呈負相關(guān)。依據(jù)半致死溫度的大小對10個草莓品種的耐寒性進行排序,得出:“豐香”>“紅顏”>“雪妹”>“二碼沃”>“佐賀清香”>“寧豐”>“法蘭地”>“櫪乙女”>“京承香”>“章姬”,且各個品種的半致死溫度依次為:-5.32℃、-4.74℃、-4.24℃、-3.89℃、-3.88℃、-3.09℃、-2.97℃、-2.43℃、-2.19℃、-1.70℃。
  (2)冷害指數(shù)統(tǒng)計得出,10個品種的冷害指

4、數(shù)在50%~90%之間,與半致死溫度作相關(guān)分析,得出相關(guān)系數(shù)為0.735,達顯著水平。
  (3)用改良的CTAB法成功提取了高質(zhì)量的草莓基因組DNA,其OD260/OD280值基本在1.7-2.0之間,瓊脂糖電泳檢測結(jié)果也表明提取的DNA純度較好,無明顯蛋白質(zhì)等污染。
  (4)對草莓SRAP-PCR反應體系進行優(yōu)化,建立了適宜草莓SRAP-PCR反應體系:20μl的反應體系中含10×PCR buffer2μl, Mg2+

5、2.0mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,正反向引物各為0.6μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U,模板DNA為100ng。
  (5)從110對SRAP引物篩選出條帶豐富清晰、多態(tài)性較好的引物對共55對,占總引物對的50%。共擴增出311條多態(tài)性條帶,平均多態(tài)率為73.43%。多態(tài)性信息含量(PIC值)在0.9001~0.2688之間,平均PIC值為0.6993。聚類分析結(jié)果顯示,10個草莓品種可分為3個大類,其中耐

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