梨黑斑病菌（Alternaria alternata Japanese pear pathotype）生物學特性及其生物——化學協(xié)同控制技術的研究.pdf

1、梨黑斑病是梨樹主要病害之一，也是廣泛發(fā)生的世界性病害之一。在亞洲國家發(fā)病嚴重，在梨進出口貿(mào)易中已受到進口國的嚴密注視。為有效防治梨黑斑病，解決生產(chǎn)問題，本文研究了梨黑斑病病原茵(Alternaria alternata Japanese pear pathotvpe)的生物學特性及遺傳多樣性、病菌致病力分化，不同梨品種對該病的抗性評價，篩選了離體條件下對病原菌有拮抗作用的生防菌株Bacillus subtilis B-916離子注入突變

2、體E-29和能較好抑制病原菌生長的化學藥劑嘧霉胺，篩選了E-29和嘧霉胺復配的最佳配比，并進一步測定了復配劑對梨黑斑病的田間防治效果。整個研究結論如下： (1)2003年在江蘇省農(nóng)科院園藝所梨園采集梨黑斑病病葉，經(jīng)分離、培養(yǎng)和鑒定，獲得24個梨黑斑病病原菌菌株。 測定了24個梨黑斑病病原菌菌株的生物學特性，結果表明：不同菌株在PSA平板上培養(yǎng)，其生長學特性(平均目生長速率、產(chǎn)孢量、菌落顏色以及菌落厚度)有顯著不同。病原菌

3、生長最適溫度為28℃，孢子萌發(fā)的最適溫度為28℃；病原菌最適生長相對濕度為98～100％，孢子萌發(fā)必須具備相對濕度98％以上的高濕條件，在水滴中萌發(fā)率最高；病原菌菌絲最適生長pH值為7～8，孢子萌發(fā)最適pH值為7～8，病原菌培養(yǎng)一段時間后培養(yǎng)基的pH值會發(fā)生改變。該病原菌對多種單糖、雙糖和多糖等碳源及有機氮、無機氮均可利用，最適碳源為蔗糖，最適氮源為蛋白胨，硫酸胺和氯化胺會抑制病原菌菌絲生長。 在人工培養(yǎng)條件下，隨時間推移，鏈格

4、孢菌的產(chǎn)孢性狀、菌落性狀會發(fā)生變化。用CTAB法提取了24個菌株的DNA，并用特異引物擴增出18個菌株序列，對其中8個菌株的PCR產(chǎn)物進行測序，聚類分析發(fā)現(xiàn)鏈格孢8個菌株間存在遺產(chǎn)變異。 測定了24個梨黑斑病病原菌菌株的致病性，結果表明：在24個菌株中強致病力菌株占20.8％，中等致病力菌株占70.8％，弱致病力菌株占8.3％。比較發(fā)現(xiàn)2005年噴霧法接種和涂抹法接種所測定的菌株致病力相關性較高為69.69％。另外，我們還比較了

5、菌株的致病性與菌絲生長速率、產(chǎn)孢量以及菌落顏色的相關性，發(fā)現(xiàn)菌株的致病性與菌絲生長速率、產(chǎn)孢量相關性不顯著，相關系數(shù)分別為30.05％和7％：但是與菌落顏色存在一定的正相關，顏色越深，致病性越強。 (2)田間自然鑒定和人工接種鑒定了不同梨品種對黑斑病的抗性，結果表明：無論是田間自然鑒定還是田間接種鑒定，華酥、黃花、早酥、豐水抗病性最強，占供試品種的25％；愛宕、金水2號抗病性最弱，占供試品種的12.5％。在田間自然條件下的某些高

6、抗、中抗、感病品種，在人工接種條件下則分別表現(xiàn)為抗性、感病、高感品種。不同品種在接種病菌后對病菌的抗擴展能力不同：華酥、黃花、早酥、豐水抗擴展能力最強；富源黃、愛宕、金水2號、七月酥抗擴展能力最弱。 (3)室內(nèi)離體條件下測定了209株枯草芽孢桿菌離子注入體和28種化學藥劑對梨黑斑病病原菌的抑制作用，篩選出生防菌株E-29和化學藥劑嘧霉胺對梨黑斑病有較好的抑制力，進一步篩選測定，選擇E-29與嘧霉胺復配，得到二者最佳配比為3.33×10<

7、'10>cfu／mlE-29：13.33％嘧霉胺=2：1，按此配比制得復配劑。 (4)田間小區(qū)試驗中復配劑對梨黑斑病的防治效果較好，防治效果為45.9-66.5％，平均防效為54.1％；嘧霉胺對梨黑斑病病害的防治效果為52.9％；生防菌E-29對梨黑斑病病害的防治效果為23.6％。 藥劑處理中3.75g/1、4.5g/1復配劑中嘧霉胺的含量小于或等于單劑嘧霉胺的使用量，但對梨黑斑病的防治效果好于單劑嘧霉胺，單劑E-29防治效果為23