梨黑斑病生防細(xì)菌的篩選、鑒定及其生防活性的初步研究.pdf

1、梨（Pyrus spp.）屬于薔薇科(Rosaceae)梨屬（Pyrus）植物，我國(guó)是梨的重要起源地之一，是世界第一產(chǎn)梨大國(guó)。梨病害的產(chǎn)生及危害是限制我國(guó)梨產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要因子之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)梨黑斑病(Pearblackrot)是由鏈格孢（Alternaria sp.）類真菌引起的一種真菌性病害。梨黑斑病同梨黑星病和輪紋病共稱為我國(guó)梨樹(shù)的三大病害。目前控制梨黑斑病的主要方法仍然以化學(xué)殺菌劑為主。由于化學(xué)殺菌劑存在著抗藥性和農(nóng)藥殘留的問(wèn)題，

2、對(duì)人體和環(huán)境構(gòu)成威脅。因此，篩選出抗菌譜廣，生防活性高和對(duì)環(huán)境安全的新型細(xì)菌，進(jìn)而制備出高效的生防菌劑，可以作為化學(xué)防治梨黑斑病的一種有益補(bǔ)充，減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量，進(jìn)而降低其污染。
　　從山東梨樹(shù)果園采集到25份土壤樣品，分離到514株細(xì)菌，通過(guò)對(duì)梨黑斑病菌的室內(nèi)拮抗實(shí)驗(yàn)，篩選出一株對(duì)梨黑斑病菌具有強(qiáng)拮抗作用的菌株并將其命名為SD2，室內(nèi)測(cè)定其對(duì)梨黑斑病的拮抗圈達(dá)到9.5mm。為了明確其拮抗性能，我們室內(nèi)測(cè)定該菌對(duì)梨輪紋病菌、梨

3、腐爛病菌、梨炭疽病菌和稻瘟病菌等14種重要園藝和糧食作物病原真菌的拮抗效果，結(jié)果顯示SD2對(duì)上述病原菌均具有較好的拮抗作用，拮抗圈的范圍從4mm到17.5mm，拮抗范圍較廣。同時(shí)其對(duì)馬鈴薯軟腐病菌也具有一定的拮抗作用，說(shuō)明該菌對(duì)細(xì)菌也有拮抗活性。通過(guò)對(duì)拮抗菌的形態(tài)特征、生理生化特征及16SrDNA序列進(jìn)行綜合鑒定分析，該菌株鑒定為愛(ài)勝蚓噬幾丁質(zhì)菌（Chitinophaga eiseniae），在已報(bào)道的國(guó)外文獻(xiàn)中，未發(fā)現(xiàn)有報(bào)道該菌對(duì)人體

4、具有致病性，這為后續(xù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究提供了保證。
　　抗菌活性物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果顯示，該菌產(chǎn)生蛋白酶，但不產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶、纖維素酶和β-1，3-葡聚糖酶等胞外水解酶。通過(guò)對(duì)其胞外酶及代謝產(chǎn)物的檢測(cè)顯示，該菌代謝產(chǎn)物抑制梨黑斑病菌黑色素形成、茵絲的正常生長(zhǎng)、分生孢子的萌發(fā)，同時(shí)加熱處理代謝產(chǎn)物也具有相似的作用。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外已報(bào)道酵母菌（Candida sp.）和枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）對(duì)梨黑斑病有一定的抑制，但愛(ài)勝蚓