小麥全蝕病生防細(xì)菌的篩選鑒定及其在小麥根際定殖的研究.pdf

1、小麥全蝕病是由禾頂囊殼小麥變種（Gaeumannomyces graminis var.tritici）引起的真菌病害，在世界上許多小麥產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生，為典型的小麥根部病害。小麥全蝕病首先在中國浙江省發(fā)現(xiàn)，隨后在我國多個(gè)小麥產(chǎn)區(qū)發(fā)生，目前病害發(fā)生仍呈加重趨勢。
　　為篩選對(duì)小麥全蝕病有控制作用的生防菌，本研究從河南商丘全蝕病發(fā)生田塊的小麥根際土，利用稀釋分離法共獲得648株細(xì)菌，通過平板生防測定初篩出對(duì)小麥全蝕病菌具有生防作用的細(xì)菌

2、41株，再從中篩選出抑菌帶大于0.3 cm或雖然抑菌帶小于0.3 cm但長勢強(qiáng)的細(xì)菌20株。根據(jù)20株細(xì)菌的16S rDNA和rpoB基因的序列對(duì)這些菌株進(jìn)行了分子鑒定，并對(duì)這些菌株在溫室盆缽試驗(yàn)中的防效進(jìn)行了測定。進(jìn)一步挑選出9株代表性細(xì)菌菌株(GP4，GP9，GP16，GP46，GP51，GP52，GP54，GP56,GP59)進(jìn)行下一步研究。
　　根據(jù)16S rDNA和rpoB的BLAST結(jié)果以及生理生化分析的結(jié)果表明這9株

3、細(xì)菌均為假單胞菌。其中GP4，GP9，GP16，GP46，GP59為Pseudomonas poae，GP51和GP52為Pseudomonas chlororaphis，GP54和GP56為Pseudomonas putida。生理生化試驗(yàn)結(jié)果表明:9個(gè)菌株都產(chǎn)生蛋白酶;GP51、GP52、GP54和GP56可以產(chǎn)生嗜鐵素;所有菌株均不產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶。對(duì)9株細(xì)菌進(jìn)行了生防物質(zhì)產(chǎn)生相關(guān)基因的檢測，這些菌株基因組中都不舍2，4-二乙?；g苯

4、三酚和藤黃綠膿菌素產(chǎn)生相關(guān)基因;只有GP51，GP52含有吩嗪-1-羧酸和硝吡咯菌素產(chǎn)生相關(guān)基因。溫室防效試驗(yàn)結(jié)果表明9株生防細(xì)菌對(duì)全蝕病都有一定的生防效果，其中GP51，GP52的效果最好，防效分別達(dá)到30.5％和33.3％。
　　在明確9株生防菌對(duì)小麥全蝕病具有較好防治效果的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步用平板生防試驗(yàn)測定了它們對(duì)其他一些小麥根部病害病原菌的抑制作用。結(jié)果表明9株細(xì)菌對(duì)小麥根腐病菌的抑制效果普遍較好，抑菌帶寬度均在3.5 mm

5、以上，只有GP51、GP52菌株對(duì)禾谷絲核菌有一定的抑制效果，對(duì)小麥赤霉病菌有抑制作用的菌株有GP9、GP16、GP46、GP51和GP59，但抑菌效果較差，這些生防菌對(duì)小麥莖基腐病菌不同化學(xué)型菌株的抑制效果存在差異。
　　為了解9個(gè)生防菌在小麥根部的定殖情況，通過馴化篩選獲得9株生防菌的利福平抗性菌株，用含菌玉米砂接種的方法分別測定了原始菌株與馴化菌株對(duì)小麥全蝕病的防效。這一步測定了6株細(xì)菌（2株P(guān)seudomonas poae

6、 GP9和GP59，2株P(guān)seudomonas putida GP54和GP56以及2株P(guān)seudomonas chlororaphis GP51和GP52）在小麥根部定殖情況，結(jié)果表明這些菌在滅菌的土壤中的定殖量高于自然土的定殖量。其中GP51和GP52在4個(gè)處理中的定殖效果均較好，在一定程度上可解釋GP51和GP52的具有較好生防效果的原因。
　　本研究為小麥全蝕病的生物防治提供了重要的菌株材料，為后續(xù)高效生防菌的篩選、田間應(yīng)