半夏軟腐病根際拮抗細菌的篩選及其鑒定.pdf

1、半夏是我國中藥寶庫中的大宗藥材,為解決供需矛盾和保護野生資源,我國從20世紀70年代開始半夏野生變家種及其栽培技術(shù)研究。半夏軟腐病是由胡蘿卜果膠桿菌(Pectobacterium carotovora)引起的病害,該病發(fā)生普遍,嚴重威脅著半夏的規(guī)?；G色生產(chǎn)。本論文針對半夏生產(chǎn)中的主要病害--軟腐病,從生物防治途徑出發(fā),進行了半夏軟腐病根際拮抗菌的分離、篩選及鑒定,以期為半夏的生物防治技術(shù)開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　 2006年6～10

2、月從浙江和山東兩省的半夏種植地采集根際土壤樣品,從這些樣品中分別分離細菌,獲得細菌分離物317個。對這些細菌分離物在培養(yǎng)平板上進行拮抗篩選,得到拮抗菌10株。以半夏球莖及其切片為材料,對10株拮抗菌進行了拮抗活性篩選,結(jié)果4個菌株顯著減輕半夏切片和球莖的軟腐病癥狀。選擇在球莖上具有較好生防效果(60％以上)的拮抗菌繼續(xù)在半夏組培苗上進行復篩。結(jié)果,2個拮抗菌P-Y2-2和GJ1-8顯著抑制組培苗的軟腐病菌發(fā)生,防治效果分別為100.00

3、％和93.34％,但拮抗菌L1-5對組培苗沒有抑制作用。進一步驗證拮抗菌P-Y2-2和GJ1-8對半夏植株的生防效果,結(jié)果它們對半夏植株軟腐病的生防效果分別為66.67％和50.00％。
　　 拮抗譜研究表明,3個拮抗菌對23個細菌和真菌病原菌具有不同的拮抗效果,其中拮抗菌P-Y2-2和L1-5分別可抑制其中8個和9個病原菌的生長,拮抗菌GJ1-8僅能抑制4個病原菌的生長;對于7個非致病菌的拮抗作用表明,3個拮抗菌僅能抑制其中2

4、個非致病菌的生長?？梢?個拮抗菌的拮抗譜均較窄,尤其是對細菌的拮抗譜較窄,表現(xiàn)對半夏軟腐病原菌具有一定的專性抑制作用。從微生物生態(tài)學的角度而言,一定的專性抑制作用不會對植株原有的微生物生態(tài)產(chǎn)生較大影響,這對于生防菌在生物防治中的實際應用具有重要意義。
　　 應用傳統(tǒng)方法和分子生物學方法對生防效果顯著的3個拮抗菌進行了初步鑒定。形態(tài)學、生理生化及16Sr RNA和gyrB基因序列分析表明:拮抗菌P-Y2-2為泛菌屬菠蘿泛菌Pant