大白菜軟腐病頡頏細(xì)菌的分離、篩選及鑒定.pdf

1、軟腐病屬于細(xì)菌性病害，因其危害性被稱為大白菜三大病害之一，由軟腐歐文氏菌(Erwinia.carotovora)引起。該病害在前期干旱、后期多雨或灌溉不當(dāng)情況下，很容易在生產(chǎn)中大面積流行，造成嚴(yán)重減產(chǎn)，是影響大白菜優(yōu)質(zhì)、穩(wěn)產(chǎn)的重要因素。目前，對(duì)該病的防治主要采用選育抗病品種和藥劑防治相結(jié)合的方法，但效果并不十分理想。 本試驗(yàn)旨在從白菜根際土壤中分離、篩選出對(duì)大白菜軟腐病菌有較好頡頏作用的頡頏細(xì)菌；對(duì)頡頏效果較好的生防菌株進(jìn)行發(fā)酵

2、優(yōu)化和鑒定，以期為白菜軟腐病的防治提供新的解決方案。 (1)本試驗(yàn)首次從采自陜西楊凌、周至和西藏拉薩、林芝地區(qū)白菜根際的7個(gè)土樣中分離得到了254株細(xì)菌，通過瓊脂平板和液體發(fā)酵平板初篩試驗(yàn)、盆栽復(fù)篩試驗(yàn)得到了一株對(duì)白菜軟腐病菌具有強(qiáng)烈頡頏作用的新菌株L227-3。 (2)菌株L227-3的抑菌譜測(cè)定結(jié)果表明：該菌株抑菌譜較廣，其發(fā)酵液對(duì)多種病原菌有很高的頡頏活性；室內(nèi)檢測(cè)對(duì)供試的病原真菌和細(xì)菌都有較好的抑制效果，其中對(duì)大

3、白菜軟腐病菌和小麥全蝕病菌的抑制能力最強(qiáng)。 (3)將頡頏菌株L227-3接種于白菜傷口處，觀察頡頏菌對(duì)白菜的影響，結(jié)果表明，L227-3菌株為無毒菌株，對(duì)白菜無不良影響。 (4)利用玻皿培養(yǎng)法測(cè)定了頡頏菌L227-3對(duì)白菜種子萌發(fā)及胚根生長(zhǎng)的影響，發(fā)現(xiàn)頡頏菌對(duì)白菜種子萌發(fā)無不良影響。且經(jīng)頡頏細(xì)菌處理后的胚根長(zhǎng)度明顯大于單用清水處理的胚根長(zhǎng)度，胚根生長(zhǎng)勢(shì)也相對(duì)旺盛。 (5)對(duì)L227-3菌株發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，確定

4、該菌株的最佳培養(yǎng)時(shí)間是30h，最適生長(zhǎng)溫度31℃，且培養(yǎng)基初始pH為7.0，裝液量50mL，搖瓶轉(zhuǎn)速為150r/min時(shí)，L227-3菌株發(fā)酵液的抑菌效果最佳。添加PA能促進(jìn)L227-3菌株細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖，提高菌株的發(fā)酵性能，緩和pH的變化對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響，增強(qiáng)L227-3菌株的抑菌能力。 (6)按照傳統(tǒng)鑒定方法，根據(jù)菌株L227-3的培養(yǎng)性狀、形態(tài)特征、染色反應(yīng)及一些生理生化反應(yīng)的試驗(yàn)結(jié)果，并參照相關(guān)文獻(xiàn)，初步判定為多粘芽孢桿