大白菜SRAP遺傳圖譜構(gòu)建及抗軟腐菌（Ecc-1-1）的QTL分析.pdf

1、本研究將大白菜高抗軟腐病自交系A(chǔ)32-2和高感軟腐病自交系A(chǔ)19-2進(jìn)行雜交，用獲得的F2代225個(gè)單株作為構(gòu)建遺傳圖譜的作圖群體，通過SRAP分子標(biāo)記方法的遺傳分析，構(gòu)建了大白菜抗軟腐病分子遺傳圖譜；并進(jìn)行了與大白菜抗軟腐病性狀有關(guān)的QTL定位。為建立大白菜軟腐病抗性育種分子標(biāo)記輔助選擇系統(tǒng)奠定基礎(chǔ)。研究結(jié)果表明： 1.本試驗(yàn)采用大白菜軟腐病快速鑒定方法，對(duì)親本A32-2、A19-2、F1及F2代進(jìn)行抗病接種鑒定分析。經(jīng)鑒定表

2、明，兩親本間抗、感差異明顯，母本均表現(xiàn)抗病，父本均表現(xiàn)感?。篎1表現(xiàn)抗病；F2代抗性分離，其中0級(jí)21株，1級(jí)60株，3級(jí)75株，5級(jí)43株，7級(jí)16株，9級(jí)10株，共225株。根據(jù)F2代病情分級(jí)和各病級(jí)的株數(shù)制作了二維分布圖及利用SAS8.2univariate程序進(jìn)行偏度、峰度檢驗(yàn)，偏度參數(shù)為0.8484，峰度參數(shù)為0.1358。說明病情株數(shù)呈正態(tài)分布，符合數(shù)量性狀特點(diǎn)。 2.本試驗(yàn)對(duì)SRAP-PCR反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，建立

3、了一套適合于本試驗(yàn)的反應(yīng)條件，對(duì)Mg2+、dNTP、Taq酶、引物、模板DNA分別做了濃度梯度試驗(yàn)，最后確定總體積25μl的優(yōu)化反應(yīng)體系為：：Mg2+濃度3.0mmol/L、dNTP濃度0.3mmol/L、Taq酶1.5U、引物濃度0.2μmol/L，、模板DNA60ng。 3.通過對(duì)F2群體SRAP分析，得到了139個(gè)SRAP多態(tài)性位點(diǎn)，經(jīng)Mapmaker/EXP3.0軟件處理，構(gòu)建了包含10個(gè)連鎖群，由103個(gè)遺傳標(biāo)記組成的

4、大白菜抗軟腐病分子遺傳圖譜。該圖譜覆蓋長(zhǎng)度為1223.6cM，平均圖距11.9cM。每個(gè)連鎖群上的標(biāo)記數(shù)在4～25之間，標(biāo)記間最大間距為33.1cM，最小間距為2.2cM，連鎖群長(zhǎng)度在40.5～348.0cM之間。 4.進(jìn)行F2代分子標(biāo)記，采用Mapmaker3.0軟件進(jìn)行分析，以最大圖距50cM作為劃分連鎖群和排列markers的基準(zhǔn)距離。并用WINQTLCart2.5進(jìn)行作圖，采用復(fù)合區(qū)間作圖法，共檢測(cè)到4個(gè)大白菜軟腐病抗性

5、基因的QTLs位點(diǎn)。QE1，QE2位于第2連鎖群上，加性效應(yīng)分別為9.17和10.56，可以解釋的表型變異分別為14.23％和22.73％；QE3位于第6連鎖群上，加性效應(yīng)為5.24，可以解釋的表型變異為9.33％;QE4位于第7連鎖群上，加性效應(yīng)為4.35，可以解釋的表型變異為8.52％。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大白菜軟腐病Ecc-1-1抗性為連續(xù)分布且4個(gè)QTLs位點(diǎn)不能解釋Ecc-1-1全部的表型變異，說明大白菜抗.Ecc-1-1