大白菜褐腐病病原菌鑒定及快速鑒定方法研究.pdf

1、大白菜褐腐病主要危害成株大白菜的葉柄，導(dǎo)致大白菜葉柄腐爛，從而影響大白菜的質(zhì)量及產(chǎn)量。該病是最近幾年發(fā)展起來(lái)的病害，所以一直未引起專家和學(xué)者的注意。國(guó)內(nèi)外也僅有少數(shù)的報(bào)道。
　　 本文研究通過(guò)常規(guī)鑒定、分子鑒定、融合群鑒定確定引起天津、哈爾濱兩地的大白菜褐腐病病原菌，并進(jìn)行生物學(xué)特性分析、抗性鑒定方法研究。其研究結(jié)果如下：
　　 1.通過(guò)對(duì)天津、哈爾濱兩地大白菜褐腐病病株上分離的天津菌株(TJ)、哈爾濱菌株(DB)的菌絲

2、形態(tài)、菌落形態(tài)、菌核形態(tài)進(jìn)行常規(guī)鑒定，確定大白菜褐腐病病原菌為立枯絲核菌Rhizoctonia solani。
　　 2.通過(guò)對(duì)兩菌株進(jìn)行分子鑒定結(jié)果表明：TJ、DB兩菌株的5.8S rDNA-ITS序列分別與GeneBank數(shù)據(jù)庫(kù)中的Rhizoctonia solani isolatITS序列相似性分別為100％、99%。進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析結(jié)果表明：TJ和DB兩菌株與其它立枯絲核菌聚為一類，并且DB菌株為一株新的立枯絲核菌菌株

3、，GenBank登錄JN412624。
　　 3.融合群鑒定表明，TJ菌株屬于AG-2融合群，DB菌株屬于AG1融合群。
　　 4.TJ、DB兩菌株生物學(xué)特性比較
　　 (1)天津(TJ)、哈爾濱(DB)兩株大白菜褐腐病病原菌生物學(xué)特性相同點(diǎn)是：①在碳源利用方面，兩菌株均是在以淀粉為碳源的查氏培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最快，在果糖上生長(zhǎng)最慢。在氮源利用方面，兩菌株均是在以蛋白胨為氮源時(shí)生長(zhǎng)最快，在以甘氨酸為氮源時(shí)生長(zhǎng)最慢。兩菌

4、株菌絲生長(zhǎng)最適溫度均為25℃，最適pH值為7，最適光照為12h。②兩菌株菌核形成方面，在以可溶性淀粉為碳源生長(zhǎng)時(shí)最先形成氣生菌核，且兩菌株在以蔗糖為碳源時(shí)形成的氣生菌核量均是最多。③在以硫酸銨為氮源時(shí)最先形成氣生菌核，氣生菌核量均是硫酸銨最多。④兩菌株半埋式菌核形成量均是蔗糖最多，葡萄糖和可溶性淀粉次之。兩菌株均在25℃時(shí)氣生菌核和半埋式菌核量最多。⑤兩菌株均在pH7時(shí)氣生菌核和半埋式菌核量最多，pH5時(shí)氣生菌核量均是最少。⑥兩菌株均是

5、在12h光照時(shí)氣生菌核和半埋式菌核量最多，24h光照時(shí)氣生菌核和半埋式菌核量最少。菌絲致死溫度均是42℃。
　　 (2)天津(TJ)、哈爾濱(DB)兩株大白菜褐腐病病原菌生物學(xué)特性不同點(diǎn)是：①在以可溶性淀粉、葡萄糖為碳源時(shí)，DB菌株生長(zhǎng)速率較快，以果糖為碳源時(shí)，TJ菌株生長(zhǎng)速率較快。②TJ菌株在以硝酸鉀為氮源時(shí)最先形成半埋式菌核，且形成半埋式菌核量硝酸鉀最多；DB菌株在以硝酸銨為氮源時(shí)最先形成半埋式菌核，且以硝酸銨為氮源時(shí)半埋式

6、菌核最多。③TJ菌株半埋式菌核量及氣生菌核量在29℃時(shí)均是最少，而DB菌株則是在21℃時(shí)半埋式菌核量最少，氣生菌核量則是29℃時(shí)最少。④在同一條件下生長(zhǎng)時(shí)DB菌絲生長(zhǎng)速率快于TJ菌株。⑤在相同條件下生長(zhǎng)時(shí)菌核形成速度及形成量均是TJ菌株快于并且大于DB菌株。⑥TJ菌株菌核46℃致死，而DB菌株菌核則是48℃致死。
　　 5.創(chuàng)建了一套大白菜對(duì)褐腐病抗性的快速鑒定方法。通過(guò)對(duì)不同品種的致病規(guī)律的研究，表明以菌餅為接種物其致病速率快