大白菜黃萎病病原菌鑒定及病株快速檢測(cè)技術(shù)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、大白菜[Brassica rapaL.ssp.pekinensis(Lour.) Olsson]是我國(guó)栽培面積最大的蔬菜作物之一,并逐漸成為世界性蔬菜作物。目前對(duì)大白菜病害的研究多集中在病毒病、軟腐病、霜霉病三大病害上,而近年來(lái)在北京市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中心大白菜育種基地及云南省通海等大白菜規(guī)?;N植基地發(fā)生了十分嚴(yán)重的土傳維管束病害,并呈逐年上升趨勢(shì)。該病多在包心初期開始顯癥,其癥狀表現(xiàn)為葉片枯黃、植株矮化、維管束變褐變黑,被稱為“黃

2、萎病”。
   本研究以北京地區(qū)大白菜黃萎病植株為材料,進(jìn)行黃萎病致病病原菌的分離、純化、保存,對(duì)病原菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定、致病力分析及分子鑒定研究,建立大白菜苗期抗黃萎病鑒定技術(shù),并結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行病原菌的快速檢測(cè)。主要研究結(jié)果如下:
   1.以大白菜黃萎病株3-85、10-2、J-15、和3-108為材料,分離純化得到的4個(gè)真菌分離物,分別命名為BCHW3-85、BCHW10-2、BCHW J-15和BC

3、HW3-108,通過(guò)形態(tài)學(xué)鑒定、苗期接種鑒定及分子鑒定,確定了大白菜黃萎病的病原菌為大麗輪枝菌(V.dahliae),最適生長(zhǎng)溫度為22℃。
   2.采用兩因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法對(duì)大白菜黃萎病苗期抗性鑒定方法進(jìn)行研究。分別采用浸根法(5 min、10 min、15 min)、灌根法、茵液催芽的接種方法,接種濃度設(shè)1×106、1×107、1×108三個(gè)梯度,接種后30d進(jìn)行病情調(diào)查,結(jié)果表明:在大白菜三葉一心期使用孢子懸浮液(濃度1×

4、107或1×108 spores·mL-1),浸根10 min接種效果最佳。
   3.使用致病力較強(qiáng)的大白菜黃萎病病原茵B(yǎng)CHW10-2對(duì)大白菜、小白菜、蕪菁、蘿卜、芥藍(lán)、辣椒、青花菜、花椰菜、烏塌菜、甘藍(lán)、番茄、茄子等作物進(jìn)行寄主范圍鑒定,結(jié)果表明大白菜黃萎病病原菌對(duì)以上作物均有致病性,且致病力強(qiáng)弱不同。
   4.大白菜黃萎病菌實(shí)時(shí)熒光PCR快速檢測(cè)方法研究:根據(jù)大麗輪枝菌ITS區(qū)序列JN564038與大白菜ITS

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