大白菜種子純度測定技術研究.pdf

1、大白菜作為我國主要的蔬菜作物在農業(yè)生產中占有重要位置。本文對大白菜種子純度檢驗方法，大白菜形態(tài)特征特性數據采集標準、性狀描述標準、形態(tài)數據庫的建立進行了研究；針對大白菜種子特點對Au-PAGE進行改進，建立大白菜種子蛋白質電泳方法；根據電泳純度檢測結果與田間純度試驗結果的相關性，分析該電泳方法檢測純度的可行性。主要研究結果如下： 1．制定了大白菜特征特性數據的采集標準和性狀描述標準對大白菜特征特性相關數據進行了搜集整理，制定了大

2、白菜不同生育期形態(tài)特征特性的數據采集標準和性狀描述標準，將促進品種登記的標準化，利于品種保護和純度檢驗工作的開展。 2．建立了形態(tài)特征特型數據庫和組合表建立了山東省12個主要大白菜品種的形態(tài)特征特性數據庫，為區(qū)分和鑒定品種及品種管理、質量控制工作提供了科學規(guī)范的依據。明確了苗期的子葉形狀、顏色和真葉形狀、顏色、茸毛有無、結球期的葉球的發(fā)育進化程度、球心閉合程度、葉球形狀、葉片抱合方式、球頂形態(tài)、球心顏色類型等性狀具有豐富的多態(tài)性

3、，在品種鑒定和品種保護中具有重要作用。 分別對苗期、成株期、結球期性狀穩(wěn)定性和多態(tài)性進行分析，建立了品種形態(tài)組合表。鑒定依據的主要性狀為：苗期的子葉形狀、顏色，基生葉的形狀、顏色及茸毛的多少；成株期的外葉形狀、顏色、茸毛的多少、葉柄顏色；結球期的葉球發(fā)育進化程度、球心閉露程度、葉球形狀、球內葉片抱合方式及球頂形態(tài)。 3．優(yōu)化了大白菜種子純度電泳技術體系樣品制備：數取種子，單粒砸碎放入離心管，加去離子水40 μ l室溫提取

4、40分鐘，10000轉離心3分鐘后取上清15 μ l與調整液(10％TEMED、30％HAC、15％脲、少量甲基綠)1：1混勻備用。 制膠：裝電泳槽，取15毫升凝膠(10％丙烯酰胺、10％脲、2％HAC、0.4％NaAC、0.25％雙丙烯酰胺、0.02％FeS04)加30 μl催化劑(3％過硫酸銨)封底。取凝膠30毫升加30 μl催化劑灌膠。 電泳：每孔加蛋白質樣品25 μ l，加電極液(2％HAC)，穩(wěn)壓40mA/板進

5、行電泳。指示劑到達膠底停止電泳，染色后觀察記載。 該電泳方法能將87-114、改良青雜3號、晉菜三號、魯白6號、早熟五號6個品種的雜交種與雙親自交粒和雜粒區(qū)分開，表明優(yōu)化后的電泳體系具較強的檢雜能力。 4．建立了電泳與田間純度檢驗結果相關性方程對大白菜9個不同品種的種子樣品電泳純度與田間純度檢驗結果的相關系數為0.826(R<,0.01(7)>=0.798)，達到極顯著水平，證明了該方法可用于純度檢驗。建立了電泳純度檢驗