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文檔簡介
1、由鐮刀菌(Fusarium)引起的白術(shù)根腐病在貴州各大中藥材基地發(fā)生普遍,是制約生產(chǎn)、造成經(jīng)濟損失的一大病害。目前,白術(shù)根腐病防治主要依靠化學農(nóng)藥,化學防治易導致環(huán)境污染和農(nóng)藥殘留等問題。生物防治以有益微生物抑制病原菌的生長與傳播,從而環(huán)保高效地防治植物病害,是病害防治研究的熱門方向,具有廣闊前景。本文研究白術(shù)根腐病的生物防治,篩選對其致病菌有抑制作用的真菌、細菌和放線菌,研究其抑制效果、生物學特性、產(chǎn)抗生素的液體發(fā)酵條件以及田間試驗研
2、究,為白術(shù)根腐病的生物防治提供一定理論依據(jù)。主要取得以下研究成果:
1、生防菌分離、篩選、鑒定。
采用土壤稀釋法和平板對峙法,從土壤中分離、鑒定真菌7株,細菌12株,放線菌5株。經(jīng)菌株形態(tài)、生理生化及分子鑒定,7株真菌均為木霉屬(Trichoderma spp.)真菌,包括棘孢木霉(T. asperellum)、擬康寧木霉(T. koningiopsis)、長柄木霉(T. longibrachiatum)和綠色木霉(
3、T. viride);12株細菌均屬于芽孢桿菌屬(Bacillus),包括解淀粉芽孢桿菌(B. amyloliquefaciens)、枯草芽孢桿菌(B. subtilis)、甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(B. methylotrophicus);5株放線菌均為鏈霉菌屬( Streptomyces),包括吸水鏈霉菌( S. hygroscopicus)、不吸水鏈霉菌( S. ahygroscopicus)和魯?shù)劓溍咕⊿. rutgersensis
4、)。
2、生防菌生物學特性及培養(yǎng)條件。
7株生防木霉菌株適宜的培養(yǎng)基是PDA和燕麥培養(yǎng)基,pH4~6有利于菌絲生長,培養(yǎng)最佳溫度為27.5~30℃,光照對菌絲生長影響差異不顯著,7個菌株均能很好的利用葡萄糖、乳糖和麥芽糖、蛋白胨和氯化銨。木霉M216-1菌株產(chǎn)抗生素的液體培養(yǎng)基及發(fā)酵條件:乳糖20 g,蛋白胨2g,氯化鈉0.5 g,硫酸亞鐵0.01 g,硫酸鎂0.5 g,碳酸鈣1g,磷酸氫二鉀0.5 g,蒸餾水100
5、0 mL。pH6、裝液量為40mL(250mL三角瓶裝量)、接種量為3%,28℃160rpm發(fā)酵72h。
12株生防芽孢桿菌在30℃~45℃時均能生長良好,不耐酸性,pH在5以下均不能生長,多數(shù)菌株能在含鹽量超過10%的培養(yǎng)基上生長,且均為好氧菌。芽孢桿菌B-7產(chǎn)抗生素液體培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件:蔗糖20 g,酵母膏2g,氯化鈉0.5 g,硫酸亞鐵0.01 g,硫酸鎂0.5 g,碳酸鈣1g,磷酸氫二鉀0.5 g,蒸餾水1000 mL
6、。pH7、裝液量為40mL(250mL三角瓶裝量)、接種量為2%,30℃180rpm發(fā)酵48h。
5株生防鏈霉菌在30℃長勢良好,菌株耐鹽性均不超過15%,可利用多種C源和N源。F-11菌株適合的培養(yǎng)基及發(fā)酵條件為:可溶性淀粉20 g,酵母膏2g,氯化鈉0.5 g,硫酸亞鐵0.01 g,硫酸鎂0.5 g,碳酸鈣1g,磷酸氫二鉀0.5 g,蒸餾水1000 mL。pH為7、裝液量為40mL(250mL三角瓶裝量)、接種量為5%,3
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