大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷術(shù)后核轉(zhuǎn)錄因子-κB變化與再狹窄機(jī)制的研究.pdf

1、目的:
　　(1)建立大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜損傷模型,并用不同劑量二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)進(jìn)行干預(yù),觀察對(duì)頸動(dòng)脈術(shù)后再狹窄的影響。
　　(2)研究大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷后局部核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)及其抑制因子-κB(I-κB)的表達(dá)變化、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)的表達(dá)對(duì)球囊損傷后血管再狹窄進(jìn)程中的作用,以及PDTC干預(yù)后,在其中所起的作用。
　　方法:
　　(1)將大鼠兩側(cè)頸動(dòng)脈分別作為一側(cè)研究組

2、(球囊損傷)和對(duì)側(cè)為對(duì)照組(假手術(shù)),并以不同劑量PDTC進(jìn)行干預(yù),分別在頸總動(dòng)脈球囊損傷后不同時(shí)間段(6h,1d,3d,7d,14d,28d)處死大鼠,留取兩側(cè)頸總動(dòng)脈標(biāo)本,應(yīng)用組織形態(tài)學(xué)方法檢測(cè)內(nèi)膜增生并進(jìn)行圖像分析;免疫組化分析增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)在血管壁中的表達(dá)。
　　(2)應(yīng)用凝膠電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)和蛋白印跡雜交法檢測(cè)不同組別NF-κB的活性和 I-κBα的蛋白表達(dá),RT-PCR檢測(cè) iNOS mRNA表達(dá)

3、,通過對(duì)不同組別間NF-κB、I-κBα及iNOSmRNA的對(duì)比觀察,了解NF-κB/I-κBα及NF-κB/iNOSmRNA的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　(1)球囊損傷后,內(nèi)膜面積在3d開始增生,7、14、28天明顯增厚,與未損傷側(cè)血管相比有顯著性差異(P<0.05)。免疫組化分析發(fā)現(xiàn)PDTC干預(yù)組PCNA及VSMC的表達(dá)顯著低于單純球囊損傷組(P<0.05),隨著劑量的增大而減少。形態(tài)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)PDTC干預(yù)對(duì)球囊損傷后內(nèi)膜面

4、積(Intima Area)、增生程度(IA/MA)有顯著的抑制作用(P<0.05),也隨劑量的增大而增強(qiáng);PDTC對(duì)血管的擴(kuò)張性重塑沒有影響,但對(duì)于收縮性重塑有一定的抑制作用(P<0.05)。
　　(2)球囊損傷后NF-κB活性和iNOS mRNA表達(dá)增強(qiáng),I-κBα的蛋白表達(dá)減弱;PDTC可以減少I-κBα降解,對(duì)內(nèi)膜剝脫后NF-κB活性和iNOS mRNA表達(dá)有抑制作用。
　　結(jié)論:
　　(1)球囊損傷后損傷血管

5、彈性回縮、新生內(nèi)膜形成及負(fù)性重塑(慢性縮窄)是再狹窄發(fā)生的主要機(jī)制。而平滑肌細(xì)胞遷移、增殖是新生內(nèi)膜形成的關(guān)鍵因素。PDTC可以有效抑制平滑肌細(xì)胞的增殖和收縮性重塑,對(duì)再狹窄產(chǎn)生有益治療作用。并具有劑量依賴性。
　　(2)NF-κB和iNOS在球囊損傷后對(duì)血管平滑肌的增殖和遷移及再狹窄起著推動(dòng)作用,而I-κBα在此過程中起著保護(hù)作用。PDTC可以通過減少I-κBα降解,從而抑制NF-κB活性和iNOS mRNA表達(dá),防治再狹窄的進(jìn)