tMfn2基因抗大鼠頸動脈球囊損傷后狹窄研究.pdf

1、目的：觀察tMfn2基因?qū)Υ笫箢i動脈球囊損傷后新生內(nèi)膜形成的影響，探索其可能機(jī)制，為tMfn2基因防治PCI術(shù)后再狹窄提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：建立大鼠頸動脈球囊損傷后狹窄模型,分別用攜帶大鼠全長Mfn2基因的重組腺病毒(Adv-Mfn2)、去除穿膜區(qū)的Mfn2基因(tMfn2)重組腺病毒(Adv-tMfn2)及僅含有半乳糖苷酶基因的對照腺病毒(Adv-LacZ)感染球囊損傷段動脈，以磷酸鹽緩沖液(PBS) 作為未感染對照組，

2、假手術(shù)組作為正常對照組。分別于術(shù)后1，5，7，14，28天取材，采用免疫組織化學(xué)方法檢測外源基因表達(dá)水平；用伊文思藍(lán)染色觀察血管損傷后內(nèi)皮的修復(fù)情況；PCNA染色檢測細(xì)胞增殖；Image-Pro plus圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行血管定量組織形態(tài)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：病毒感染后5天,免疫組織化學(xué)證實(shí)Adv-Mfn2、Adv-tMfn2兩組Mfn2蛋白表達(dá)水平明顯增加,且兩組間蛋白表達(dá)水平無明顯差異；感染后7天，伊文思藍(lán)染色結(jié)果顯示Adv-

3、Mfn2組及Adv-tMfn2組藍(lán)染區(qū)域面積與PBS組相比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明tMfn2抑制內(nèi)膜增生的同時(shí)并未影響血管內(nèi)皮的修復(fù)，tMfn2未延遲內(nèi)皮愈合；感染后14d，PCNA染色表明，感染Adv-Mfn2及Adv-tMfn2組PCNA陽性細(xì)胞指數(shù)較Adv-LacZ、PBS組及假手術(shù)組明顯降低(n=5，P<0.01)，Adv-Mfn2及Adv-tMfn2組對內(nèi)膜及中膜平滑肌細(xì)胞的抑制率分別為(85[％]，68[％])、(90[％]，8

4、0[％])，且Adv-tMfn2組較Adv-Mfn2組PCNA陽性細(xì)胞指數(shù)更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；感染后28d，Adv-Mfn2及Adv-tMfn2組的血管內(nèi)膜面積、中膜面積及內(nèi)膜/中膜面積比明顯低于Adv-LacZ及PBS組(n=5，P<0.01)，與Adv-LacZ組比較，Adv-Mfn2及Adv-tMfn2組降低內(nèi)膜/中膜面積比分別達(dá)84.5[％]、90.2[％]，而管腔面積則顯著增加。
　　 結(jié)論：(1)