微衛(wèi)星遺傳標(biāo)記在牙鲆群體遺傳學(xué)和人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育群體遺傳變異分析中的應(yīng)用.pdf

1、本文以微衛(wèi)星遺傳標(biāo)記(microsatelliteDNA)為手段，對(duì)山東近海自然和養(yǎng)殖牙鲆Paralichthysolivaceus(T.&S.)進(jìn)行了群體遺傳學(xué)研究，以此為基礎(chǔ)對(duì)人工誘導(dǎo)的牙鲆異質(zhì)雌核發(fā)育群體的遺傳變異及基因著絲點(diǎn)之間的重組率進(jìn)行了分析。另外，通過(guò)對(duì)人工誘導(dǎo)的雌核發(fā)育異質(zhì)和同質(zhì)群體的研究構(gòu)建了微衛(wèi)星標(biāo)記——著絲點(diǎn)連鎖圖譜，并分析了微衛(wèi)星標(biāo)記之間的連鎖關(guān)系。主要結(jié)果如下：1、首先建立了適于牙鲆微衛(wèi)星分析的方法，研究了山東

2、近海牙鲆自然群體和一個(gè)養(yǎng)殖群體在10個(gè)微衛(wèi)星基因座位上的遺傳多樣性(Po1，Po13，Po33，Po35，Po42，Po48，Po56，Po89，Po91，Po-str1)，10個(gè)座位均為多態(tài)；它們的等位基因平均數(shù)(a)分別是6.7和6.1，每個(gè)基因座位有效等位基因數(shù)(ae)分別為1.8～6.8和2.5～6.7，群體平均雜合度(H)分別為0.8120和0.7310；兩個(gè)群體間的遺傳相似性系數(shù)、遺傳距離和基因分化系數(shù)為0.8558、0.1

3、557和0.0558；自然群體內(nèi)每個(gè)座位上的多態(tài)信息含量(PIC)為0.59～0.84、個(gè)體識(shí)別率(DP)為0.54～0.86、非父排除率(PPE)為0.41～0.72，其累積個(gè)體識(shí)別率和非父排除率均達(dá)到0.9999，表明所選座位屬中高識(shí)別力的遺傳標(biāo)記，可以將它們應(yīng)用于今后牙鲆雌核發(fā)育群體的遺傳變異分析以及進(jìn)一步的遺傳育種的研究中。 2、在人工異質(zhì)雌核發(fā)育群體中，對(duì)經(jīng)篩選所獲得的10個(gè)基因座進(jìn)行分析，Po91可能因?yàn)槌霈F(xiàn)了無(wú)效等

4、位基因而沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物，其余9個(gè)座位全都擴(kuò)增出目的片段，其中2個(gè)座位(Po33和Po48)為單態(tài)，剩下7個(gè)座位表現(xiàn)出多態(tài)性，其多態(tài)座位比例為77.8％、平均雜合度為0.3856，明顯低于自然和養(yǎng)殖群體。在具多態(tài)性的7個(gè)基因座位上均發(fā)生了基因—著絲點(diǎn)之間的重組，重組率在42.6-100％之間。結(jié)果顯示通過(guò)抑制第二極體排出獲得的牙鲆雌核發(fā)育群體在個(gè)體和群體水平尚具有一定的基因雜合。 3、利用20對(duì)微衛(wèi)星引物對(duì)人工誘導(dǎo)的具有同一親本的牙

5、鲆異質(zhì)和同質(zhì)雌核發(fā)育群體進(jìn)行了分析，構(gòu)建了微衛(wèi)星標(biāo)記—著絲點(diǎn)遺傳圖譜，并分析了標(biāo)記之間的連鎖關(guān)系；發(fā)現(xiàn)，在母本具有多態(tài)性的12個(gè)座位中，kop15座位、Po42座位和Po1座位距著絲點(diǎn)的圖距分別為15.8cM、28.9cM和32.4cM，Po13和Po89與著絲點(diǎn)的圖距均為50cM；其余座位上距著絲點(diǎn)的圖距也都接近于50cM。對(duì)同質(zhì)雌核發(fā)育子代的研究結(jié)果顯示，Po13和Po56之間、Po91和kop18之間、kop15和kop21之間的