泥鰍(Misgurnus anguillicaudatus)受精生物學研究.pdf

1、泥鰍（Misgurnus anguillicaudatus）隸屬于鯉形目、花鰍科、泥鰍屬，在我國除西部高原地區(qū)外，各河流干、支流以及水庫、湖泊、溝渠、稻田等水體均有分布。其肉質細嫩，味道鮮美，營養(yǎng)豐富，具較好的藥用價值，被譽為“水中人參”。泥鰍已成為我國淡水養(yǎng)殖的重要種類，更是我國外貿出口的優(yōu)質水產品，經濟效益可觀，而有關泥鰍受精生物學研究未見報道。
　　本實驗所用親魚為重慶市墊江水產站收集的成熟雌雄泥鰍群體，選擇發(fā)育良好的雌雄個

2、體人工催產，進行人工干法授精。對人工授精后不同時間段的受精卵進行取材，采用組織學、酶學、掃描電鏡和透射電鏡等技術對泥鰍精巢和成熟卵的結構、精子入卵過程、皮層反應和雌雄原核遷移與結合等進行了詳盡的研究，結果表明：
　　泥鰍精巢無貯精囊、小葉型，精子由頭部、中段和尾部三部分組成。精子頭部多呈圓球形，少數呈梨形，直徑（1.877±0.071）μm，無頂體，細胞核有具核泡和無核泡兩種類型，可能是精子的成熟度有所不同，核后端有一較淺的植入窩

3、，植入窩偏向一側，其凹陷深度約為細胞核長徑的1/4；中片較短，由中心粒和袖套組成，袖套不對稱，中心粒復合體包括近端中心粒和基體，兩者呈“T”字型排列；精子尾部的主要結構為軸絲，屬典型的“9+2”型雙聯(lián)微管結構，無側鰭。
　　成熟卵圓球形，沉性，卵徑約0.90 mm。泥鰍卵膜表面具大小比較均一的小微孔，卵膜與質膜相連，屬初級卵膜，包括放射帶和附屬膜，據電子密度的不同可將放射帶分為三層。卵子動物極具一個漩渦狀的受精孔，呈順時針方向。這

4、有利于精子的云集和卷入精孔管。受精孔為深凹陷、短孔道型，由前庭和精孔管組成，前庭漏斗狀，最大直徑（39.245±3.845）μm，深（15.038±1.347）μm。精孔管呈上粗下細的管狀，長（2.694±0.573）μm，外口徑（3.639±0.587）μm，內口徑（2.286±0.364）μm，與精子頭寬相近。卵子的皮層小泡是卵子在生長發(fā)育過程中所積累的代謝廢物，根據內含物的形態(tài)及性質可將皮層小泡分為三種類型。
　　在20—2

5、1℃水溫條件下，授精0 s，卵子周圍粘附大量精子，部分卵子前庭區(qū)出現球狀的第一極體，有的第一極體表面具小突起。有受精孔附近出現一大一小兩個球體。精孔管打開，部分成熟卵子精孔管側下方凹陷的質膜外側連有第一極體，多數為橢圓形，少數為球形。授精后3 s，精子開始穿過精孔管或已經進入卵子；授精后5—8 s，形成精子星光，皮層反應開始，多數精孔管口被絮狀物堵塞或者精孔管外口縮小。授精后10—20 s，形成卵周隙，出現受精錐。授精后25—30 s，

6、受精錐變大。授精后35—50 s，精子星光擴張，皮層反應明顯，有第一極體排到卵周隙。授精后55—70 s，受精錐向外突出，60 s左右為皮層反應的高潮階段，70 s時卵子的染色體已經準備向兩極移動。授精后80—110 s，受精錐逐漸解體。授精后120 s，只有少量皮層小泡在釋放內含物；少數卵子仍未受精，精孔管口敞開著。授精后150 s，所有卵子精孔管關閉。授精后6—8 min，第二極體形成，等待排出，其中6 min時觀察到還有極少數第一

7、極體未排出卵膜外。授精后20—25 min，雌雄原核融合。授精后25—30 min，受精卵進入第一次有絲分裂中期。授精后40—45 min，第一次有絲分裂結束，二細胞形成。
　　泥鰍單精入卵、單精受精，且主要通過三種方式阻止多精入卵：（1）精孔管的內口徑只允許一個精子進入；（2）當第一個精子進入卵子細胞質后，精孔管立即被絮狀物堵塞或者精孔管外口縮??；（3）皮層反應釋放皮層小泡內含物于卵周隙中使得卵膜外舉硬化形成受精膜，阻止多余精子