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1、本研究采用454高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)比分析了環(huán)渤海灣蘋果產(chǎn)區(qū)八個(gè)地區(qū)再植與非再植蘋果園土壤中的細(xì)菌多樣性及群落結(jié)構(gòu),結(jié)合Mann-Whitney test、RDA等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法評(píng)價(jià)了兩類土壤樣品中細(xì)菌群落差異及與環(huán)境因子的相關(guān)性;采用DGGE技術(shù)分析了黃土高原產(chǎn)區(qū)不同生長(zhǎng)年限蘋果根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)差異,同時(shí)通過(guò)富集法從根際土壤中篩選根皮苷降解菌株。此外,以平邑甜茶幼苗為試材,研究了拮抗菌對(duì)再植條件下平邑甜茶幼苗生物量、根系等指標(biāo)的影響。主
2、要結(jié)果如下:
⑴454高通量測(cè)序結(jié)果表明,渤海灣蘋果產(chǎn)區(qū)再植和非再植蘋果園土壤中細(xì)菌群落在門分類水平上主要由變形桿菌門(Proteobacteria),放線菌門(Actinobacteria),酸桿菌門(Acidobacteria),擬桿菌門(Bacteroidetes),厚壁菌門(Firmicutes),疣微菌門(Verrucomicrobia),芽單胞菌門(Gemmatimonadetes),硝化螺旋菌門(Nitrospi
3、rae)和衣原體門(Chlamydiae)等構(gòu)成;在屬分類水平主要由芽單胞菌屬(Gemmatimonas),假單胞菌屬(Pseudomonas),硝化螺旋菌屬(Nitrospira),芽孢桿菌屬(Bacillus),鞘脂單胞菌屬(Sphingomonas),Rhodanobacter,Turicibacter,Tumebacillus,節(jié)桿菌屬(Arthrobacter),Steroidobacter,Bradyrhizobium等構(gòu)成
4、。通過(guò)Mann-Whitney test分析發(fā)現(xiàn),與非再植蘋果園土壤相比,再植蘋果園土壤中OP10門的相對(duì)豐度顯著高于非再植蘋果園土壤樣品(P<0.05),Humicoccus,Janibacter,Nakamurella,Verrucomicrobium四個(gè)屬的相對(duì)豐度下降,Bdellovibrio,Massilia,Nonomuraea三個(gè)屬的相對(duì)豐度升高(P<0.05)。差異屬與環(huán)境因子的RDA分析結(jié)果表明Nakamurella沿
5、著有機(jī)碳、全氮增加和pH降低的方向增加,Massilia沿有機(jī)碳、全氮減少和pH升高的方向增加。
?、仆ㄟ^(guò)對(duì)細(xì)菌和真菌DGGE圖譜結(jié)果聚類分析,不同年限蘋果園根際土壤樣品中微生物群落結(jié)構(gòu)存在明顯差異。3年、8年和15年樣品微生物群落結(jié)構(gòu)相似性較高,其中細(xì)菌多樣性明顯高于20年和25年樣品,25年生蘋果樹(shù)根際土壤樣品真菌群落較其它年限豐富,說(shuō)明隨著種植年限的延長(zhǎng),蘋果樹(shù)根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)變得簡(jiǎn)單而真菌豐度呈上升趨勢(shì)。
6、⑶通過(guò)富集篩選,共獲得103株根皮苷降解細(xì)菌,采用ARDRA和16S rRNA基因序列分析,在65%相似性水平上聚為18個(gè)群,分布于12個(gè)細(xì)菌屬,主要是芽孢桿菌屬(Bacillus),假單胞菌屬(Pseudomonas)和新鞘脂菌屬(Novosphingobium)。
?、葌?cè)孢短芽孢桿菌對(duì)蘋果土傳病原菌立枯絲核菌、串珠鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、腐皮鐮刀菌和層出鐮刀菌具有較好的拮抗效果。盆栽試驗(yàn)結(jié)果也表明,側(cè)孢短芽孢桿菌處理可以明顯促進(jìn)
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