托幼機(jī)構(gòu)消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

1、托幼機(jī)構(gòu)消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) Hygienic standard for disinfection of nursery,江蘇省疾病預(yù)防控制中心 孫俊 徐燕,前 言 本標(biāo)準(zhǔn)4.1.2、4.1.3、4.1.4、4.1.5、4.1.6、4.1.7、4.1.8、4.1.9、4.1.11、4.2為強(qiáng)制性的，其余為推薦性的。 由于我國目前尚未出臺(tái)有關(guān)托幼機(jī)構(gòu)消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，直接影響

2、對托幼機(jī)構(gòu)消毒質(zhì)量的監(jiān)督指導(dǎo)和效果評(píng)價(jià)。為此，我們依據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》和《消毒管理辦法》有關(guān)規(guī)定，針對托幼機(jī)構(gòu)的特殊性和衛(wèi)生要求，結(jié)合我省常年監(jiān)測結(jié)果，特制定本標(biāo)準(zhǔn)。 本標(biāo)準(zhǔn)附錄A為規(guī)范性附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省衛(wèi)生廳提出并歸口。 本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、南通市疾病預(yù)防控制中心、徐州市疾病預(yù)防控制中心。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：孫俊、徐燕、談智、陳越英、

3、吳小成、周品眾、周明浩、章士軍、蔣明倫,1范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了托幼機(jī)構(gòu)室內(nèi)空氣、物體表面、工作人員手、餐（飲）具、游泳嬉水池等消毒衛(wèi)生要求、指標(biāo)和檢驗(yàn)方法等。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類托兒所、幼兒園。,2 規(guī)范性引用文件 下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些

4、文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。,GB14934-1994 食（飲）具消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB15982-1995 醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB9664-1996 文化娛樂場所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB9667-1996 游泳場所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T17220-1998 公共場所衛(wèi)生監(jiān)測技術(shù)規(guī)范GB/T18204.9~10-2000 游泳池水微生物檢驗(yàn)方法2001年

5、 衛(wèi)生部《生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范》2002年 衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》GB15979-2002 一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789-2003 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn),3 術(shù)語和定義 下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn) 3.1消毒 殺滅或清除傳播媒介上病原微生物，使其達(dá)到無害化的處理。 3.2預(yù)防性消毒 對可能受到病原微生物污染的場所和物品進(jìn)行的消毒。,3.3

6、物體表面 玩具、毛巾、桌面、衛(wèi)生潔具、席子、褥具、便器架子等表面。 3.4消毒藥械 用于殺滅傳播媒介上的微生物使其達(dá)到消毒或滅菌要求的制劑或器械。 3.5消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 指不同對象經(jīng)消毒或滅菌處理后，允許殘留微生物的最高數(shù)量。,4 衛(wèi)生要求和指標(biāo) 4.1 衛(wèi)生要求 4.1.1托幼機(jī)構(gòu)內(nèi)環(huán)境整潔，并有綠化防塵措施，有一定面積的綠化場地和室外活動(dòng)場所，應(yīng)

7、做到無積水、無垃圾、無蚊蠅孳生地、無鼠害。 4.1.2活動(dòng)室、教室和寢室應(yīng)有紗窗和紗門，防止蒼蠅、蚊子等有害生物侵入和隱匿。幼兒被褥單獨(dú)疊放，不得混雜堆疊在一起。室內(nèi)經(jīng)常保持空氣流通，定期進(jìn)行消毒，傳染病流行期間，每日消毒一次。,4.1.3幼兒園里應(yīng)設(shè)有保健室及隔離觀察室，應(yīng)配備以下物品：隔離衣、體溫表、壓舌板、手電筒、毛巾、肥皂、便器、清潔用具、消毒藥械等。隔離觀察室應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，做好觀察護(hù)理及消毒工作，記錄完

8、整。同一隔離觀察室內(nèi)不能同時(shí)隔離不同病種的患兒，當(dāng)患兒離室后須進(jìn)行終末消毒。當(dāng)有隔離患兒時(shí)進(jìn)入隔離觀察室的工作人員，必須換上隔離衣，出室后必須脫下隔離衣，并做好手的清潔消毒。隔離觀察室內(nèi)的污物和污水必須經(jīng)嚴(yán)格消毒后方可處理。室內(nèi)必須配有空氣消毒設(shè)備，定期進(jìn)行空氣消毒。,4.1.4托幼機(jī)構(gòu)的食堂（營養(yǎng)室、廚房）必須取得當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門發(fā)放的衛(wèi)生許可證。廚房應(yīng)有紗門、紗窗，配有冷藏設(shè)備以及消毒、盥洗、污水排放、存放垃圾和廢棄物的設(shè)施。備餐間

9、不得裝有自來水和下水道。 4.1.5餐具、飲具和盛放直接入口食品的容器，使用前必須洗凈、消毒，嚴(yán)格執(zhí)行一洗二清三消毒四保潔制度。托幼兒做到一人一巾一杯一水，一用一消毒。,4.1.6衛(wèi)生間采用水沖式便池，便器每日消毒；臨時(shí)患有腸道疾患者，便器專人專用，及時(shí)消毒。 4.1.7游泳嬉水池在使用期間應(yīng)保持清潔無異味，每日消毒，符合GB9667-1996有關(guān)要求。 4.1.8

10、兒童接觸的用具、玩具應(yīng)定期清洗消毒，傳染病流行期間每日一次。 4.1.9建立嚴(yán)格的衛(wèi)生制度，如晨檢檢查制度和全日觀察制度、兒童健康檢查制度和消毒隔離制度；體溫表、壓舌板等每次用完之后清洗消毒。,4.1.10工作人員應(yīng)身體健康，每年健康體檢一次，取得健康合格證方可上崗。工作人員應(yīng)注重個(gè)人衛(wèi)生。做到勤理發(fā)、勤洗澡、勤剪指甲、勤換洗衣服。工作服要勤洗勤換，定期消毒。保教人員上崗前應(yīng)接受衛(wèi)生防病消毒知識(shí)培訓(xùn)，合格后方可上崗

11、，掌握消毒藥械的使用方法。 4.1.11 使用的消毒藥械必須具有衛(wèi)生許可批件，有專人保管，存放安全，標(biāo)志醒目，并在有效期內(nèi)正確使用。,4.2消毒衛(wèi)生指標(biāo) 消毒衛(wèi)生指標(biāo)應(yīng)符合下表規(guī)定。,表 消毒衛(wèi)生指標(biāo),5 檢驗(yàn)方法 采樣及檢驗(yàn)方法按附錄A執(zhí)行 6 有關(guān)規(guī)定 6.1 各類托兒所、幼兒園必須指定專人負(fù)責(zé)組織實(shí)施。 6.2各級(jí)衛(wèi)生監(jiān)督

12、部門按有關(guān)法律、法規(guī)開展監(jiān)督管理工作；各級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)按本標(biāo)準(zhǔn)開展監(jiān)測工作，每年至少一次 。,附錄A（規(guī)范性附錄）采樣及檢驗(yàn)方法,A1 采樣及檢驗(yàn)原則微生物指標(biāo)的檢驗(yàn)應(yīng)在采樣后6h內(nèi)盡快進(jìn)行。 A2 室內(nèi)空氣微生物采樣及檢驗(yàn)方法,A2.1 樣品采集 采樣時(shí)間分動(dòng)態(tài)或靜態(tài)，靜態(tài)選擇消毒處理后與進(jìn)行保教活動(dòng)之前期間采樣，動(dòng)態(tài)即正常保教活動(dòng)中。室內(nèi)面積不超過30m2，在一條對角線上設(shè)里、中、外3點(diǎn)，里外點(diǎn)位置

13、距墻1m；室內(nèi)面積超過30m2，設(shè)東、西、南、北、中5點(diǎn)，周圍四點(diǎn)距墻1m。平板沉降法采樣：將營養(yǎng)瓊脂平板（直徑為9cm）置于采樣點(diǎn)60cm~100cm高度，打開平板蓋，使平板在空氣中暴露5min，蓋上平板蓋。溶血性鏈球菌監(jiān)測時(shí)采用血平板采樣。,A2.2細(xì)菌培養(yǎng)將采樣平板置于37℃培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，計(jì)算平板上細(xì)菌菌落數(shù)。A2.3 菌落計(jì)算

14、 50000×N空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/m3）= A×T式中：N——平板上平均細(xì)菌菌落數(shù)（cfu/平板）；A——平板面積（cm2）T——暴露時(shí)間(min),,A3物體表面、手表面微生物采樣及檢驗(yàn)方法 A3.1細(xì)菌菌落總數(shù) A3

15、.1.1樣品采集 物體表面：將經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5cm×5cm的無菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用一浸濕有無菌生理鹽水的棉拭子在其內(nèi)涂擦5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣4個(gè)規(guī)格板面積，共采集100cm2，然后剪去手接觸部分，將棉拭子放入20ml生理鹽水采樣管內(nèi)送檢。,手：被檢人在從事幼教工作前，雙手五指并攏，用一浸濕生理鹽水棉拭子在雙手指曲面，從指根到指端來回涂擦2次（一只手涂擦面積約30 cm2），然后剪去手接觸部

16、分，將棉拭子放入含20ml無菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。,A3.1.2檢驗(yàn)方法 將每支采樣管振打80次，取1ml樣液接種無菌平皿內(nèi)，如污染嚴(yán)重，可做適當(dāng)稀釋后接種，每個(gè)樣本平行接種兩個(gè)平皿，傾注營養(yǎng)瓊脂，搖勻并冷卻后置37℃培養(yǎng)48h，計(jì)算平板上細(xì)菌菌落總數(shù)。,A3.1.3菌落總數(shù)計(jì)數(shù)手表面： 平板上平均細(xì)菌菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)每只手表面細(xì)菌菌落總數(shù)(

17、cfu/ cm2)= 2×30物體表面： 平板上平均細(xì)菌菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/cm2）=

18、 采樣面積（cm2）,,,A3.2大腸菌群 A3.2.1樣品采集 使用測定細(xì)菌總數(shù)時(shí)采集的樣品無需重采。 A3.2.2檢驗(yàn)方法 取樣液5ml接種到50ml乳糖膽鹽發(fā)酵管，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為大腸菌群陰性；如有產(chǎn)酸、產(chǎn)氣則劃線接種伊紅美藍(lán)瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18h~24h

19、，觀察平板上菌落形態(tài)，挑取可疑大腸菌落1個(gè)~2個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管于35℃±2℃培養(yǎng)24h，觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管最終產(chǎn)酸產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陽性 。,A3.3致病菌 A3.3.1樣品采集 使用測定細(xì)菌總數(shù)時(shí)采集的樣品無需重采。 A3.3.2檢驗(yàn)方法 A3.3.2.1綠膿桿菌 取樣液5ml，加入到50mlSCD

20、LP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃±2℃培養(yǎng)18h~24h。如有綠膿桿菌生長，培養(yǎng)液表面呈現(xiàn)一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18h~24h，觀察菌落特征。綠膿桿菌在此培養(yǎng)基上生長良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不長。,取可疑菌落涂片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：氧化酶試驗(yàn)：取一小塊潔凈

21、的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無菌玻棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對苯二胺試液，30s內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗(yàn)陽性，不變色者為陰性。 綠膿菌素試驗(yàn)：取2~3個(gè)可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測定用培養(yǎng)基斜面，35℃±2℃培養(yǎng)24h，加入三氯甲烷3ml~5ml，充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲烷呈藍(lán)色時(shí)，用吸管移到另一試管中并加入1mol/L的鹽酸1ml，

22、振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿菌素存在。,硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)：挑取被檢菌落純培養(yǎng)物接種在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基中，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，培養(yǎng)基小倒管中有氣者即為陽性。 明膠液化試驗(yàn)：取可疑菌落純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，取出放于4℃~10℃，如仍呈液態(tài)為陽性，凝固者為陰性。 42℃生長試驗(yàn)：取可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培

23、養(yǎng)基上，置42℃培養(yǎng)24h~48h，有綠膿桿菌生長為陽性。,結(jié)果報(bào)告：被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實(shí)為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素試驗(yàn)均為陽性者，即可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42℃生長試驗(yàn)三者皆為陽性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。,A3.3.2.2金黃色葡萄球菌 取樣液5ml，加入到50mlSCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃±2℃培養(yǎng)24h。自上

24、述增菌液中取1~2接種環(huán)，劃線接種在血瓊脂培養(yǎng)基上，置35℃±2℃培養(yǎng)24h~48h。在血瓊脂平板上該菌菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。,挑取典型菌落，涂片作革蘭氏染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，排列成葡萄狀，無芽胞與莢膜。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)： 甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述菌落接種甘露醇 培養(yǎng)液，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，發(fā)酵甘露產(chǎn)酸者為陽性。,

25、血漿凝固酶試驗(yàn)：玻片法：取清潔干燥載玻片，一端滴加一滴生理鹽水，另一端滴加一滴兔血漿，挑取菌落分別與生理鹽水和血漿混合，5min如血漿內(nèi)出現(xiàn)團(tuán)塊或顆粒狀凝塊，而鹽水滴仍呈均勻混濁無凝固則為陽性，如兩者均無凝固則為陰性。凡鹽水滴與血漿滴均有凝固現(xiàn)象，再進(jìn)行試管凝固酶試驗(yàn)；試管法：吸取1:4新鮮血漿0.5ml，放滅菌小試管中，加入等量待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5ml?；靹?，放35℃±2℃溫箱或水浴中，每半小時(shí)觀察一次，24h之內(nèi)呈

26、現(xiàn)凝塊即為陽性。同時(shí)以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)各0.5ml作為陽性與陰性對照。,結(jié)果報(bào)告：凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長，鏡檢為革蘭氏陽性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗(yàn)陽性者，可報(bào)告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。 A3.3.2.3溶血性鏈球菌 取樣液5ml，加入到50ml葡萄糖肉湯，35℃±2℃培養(yǎng)24h。 將培養(yǎng)物劃線接種血瓊脂平板，35℃±2℃培養(yǎng)24

27、h觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突起，表面光滑，邊緣整齊，周圍有無色透明溶血圈。,挑取典型菌落作涂片革蘭氏染色鏡檢，應(yīng)為革蘭氏陽性，呈鏈狀排列的球菌。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)： 鏈激酶試驗(yàn)：吸取草酸鉀血漿0.2ml（0.01g草酸鉀加5ml兔血漿混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清液），加入0.8ml滅菌生理鹽水，混勻后再加入待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5ml和0.25%氯化鈣0.25ml，混勻，放35

28、℃±2℃水浴中，2min觀察一次（一般10min內(nèi)可凝固），待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄溶化時(shí)間。如2h內(nèi)不溶化，繼續(xù)放置24h觀察，如凝塊全部溶化為陽性，24h仍不溶化為陰性。,桿菌肽敏感試驗(yàn)：將被檢菌菌液涂于血平板上，用滅菌鑷子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平板表面上，同時(shí)以已知陽性菌株作對照，在35℃±2℃下放置18h~24h，有抑菌帶者為陽性。 結(jié)果報(bào)告：鏡檢革蘭氏陽性鏈狀排列球菌，血平板上呈

29、現(xiàn)溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗(yàn)陽性，可報(bào)告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。,A3.3.2.4沙門氏菌 按GB/T4789.4-2003。A4餐（飲）具采樣與檢驗(yàn)方法A4.1發(fā)酵法采樣與檢驗(yàn),A4.1.1采樣方法 餐（飲）具抽檢碗、盤、口杯，將2.0cm×2.5cm(5cm2)滅菌濾紙片緊貼內(nèi)面各10張（總面積50cm2）、碟、匙、酒杯等小件物品以每5件為1份，每件內(nèi)面緊貼滅菌濾紙片各2張（總面積50

30、cm2/份），如餐（飲）具較干燥可將濾紙片用無菌生理鹽水濕潤后再采樣，經(jīng)1min，按序取下置入50ml滅菌生理鹽水試管中，充分振蕩后，制成原液。 筷：取每雙的下段12cm處約50cm2（12cm×2cm×2cm），置入50ml滅菌生理鹽水試管中，充分振蕩20次，制成原液。,A4.1.2檢驗(yàn)方法 A4.1.2.1大腸菌群 按GB/T4789.3執(zhí)行。（按本標(biāo)準(zhǔn)A3.2.2執(zhí)行

31、） A4.1.2.2金黃色葡萄球菌 按GB/T4789.10執(zhí)行。（按本標(biāo)準(zhǔn)A3.3.2.2執(zhí)行） A4.1.2.3沙門氏菌 按GB/T4789.4執(zhí)行。,A4.1.2.4志賀氏菌 按GB/T4789.5執(zhí)行。 A4.2紙片法采樣與檢驗(yàn) 餐（飲）具消毒采用專用的大腸菌群快速檢驗(yàn)紙片。 A4.2.1采樣方法 隨機(jī)抽取消毒

32、后準(zhǔn)備使用的各類餐具（碗、盤、杯等），每次采樣6~10件，每件貼紙片兩張，每張紙片面積25cm2（5cm×5cm）用無菌生理鹽水濕潤大腸菌群檢驗(yàn)用紙片后，立即貼于食具內(nèi)側(cè)表面，30s后取下，置于無菌塑料袋內(nèi)。,筷子以5只為一件樣品，用毛細(xì)吸管吸取無菌生理鹽水濕潤紙片后，立即將筷子進(jìn)口端（約5cm）抹拭紙片，每件樣品抹拭兩張，放入無菌塑料袋內(nèi)。 A4.2.2檢驗(yàn)方法 將已采樣的紙片置37℃培養(yǎng)16h~1

33、8h，若紙片保持紫藍(lán)色不變?yōu)榇竽c菌群陰性，紙片變黃并在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)或片狀紅暈為陽性。,A5 嬉水池、游泳池水質(zhì)檢驗(yàn) A5.1游離性余氯 按2001年衛(wèi)生部《生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范》執(zhí)行。 A5.2細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群 按《公共場所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)監(jiān)測檢驗(yàn)方法》執(zhí)行。 A6結(jié)果判定 檢查結(jié)果符合相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)值者，判定為該項(xiàng)檢驗(yàn)合格；反之，不符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)值者，則判定為檢驗(yàn)不合格。,