細(xì)菌感染檢查防治

1、第8章 細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則,病原菌檢測(cè)：檢測(cè)病原菌及其抗原、代謝產(chǎn)物或核酸,病原菌檢測(cè)：形態(tài)、分離與鑒定 病原菌抗原的檢測(cè) 其他檢測(cè)法：PCR等,第一節(jié) 細(xì)菌感染的診斷,血清學(xué)診斷：檢測(cè)患者血清中特異性抗體,標(biāo)本的采集和送檢原則,無(wú)菌操作,早期采集,,,,,,,,,,,,做好標(biāo)記,盡快送檢,一、病原菌檢測(cè)（一）標(biāo)本的采集與運(yùn)送,適當(dāng)標(biāo)本,（二）細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定1、細(xì)菌培養(yǎng) 接種于適當(dāng)培養(yǎng)基，根據(jù)菌落特

2、征作初步鑒別。2、形態(tài)學(xué)檢查（1）不染色標(biāo)本檢查法 壓滴法、懸滴法，用暗視野顯微鏡或相差顯微鏡檢查（2）染色標(biāo)本檢查法 革蘭染色法、單染色法、抗酸染色法、特殊染色法,3、生化試驗(yàn) 現(xiàn)已有多種微量、快速的生化反應(yīng)試劑盒以及半自動(dòng)或全自動(dòng)檢測(cè)儀器應(yīng)用于臨床。4、血清血鑒定 已知Ab(多價(jià)、單價(jià)診斷血清）查未知Ag,常作玻片凝集試驗(yàn)，確定細(xì)菌的種、型。5、動(dòng)物試驗(yàn) 分離、鑒定致病菌，測(cè)定某些細(xì)菌的毒力；常用小鼠

3、、豚鼠、家兔等。6、藥物敏感試驗(yàn) 對(duì)指導(dǎo)臨床選擇用藥，及時(shí)控制感染具有重要意義。,致病菌的分離和鑒定,藥物敏感試驗(yàn),,標(biāo)本,培養(yǎng)特征,形態(tài)特征,生化試驗(yàn),血清學(xué)鑒定,動(dòng)物試驗(yàn),,,,培養(yǎng)基,優(yōu)點(diǎn)： 不受抗生素使用的限制 敏感性高1、酶免疫技術(shù)（EIA） 酶聯(lián)免疫吸附法、酶標(biāo)免疫組化法2、協(xié)同凝集試驗(yàn) 3、免疫熒光技術(shù)（IF）熒光菌球法4、對(duì)流免疫電泳（CIE）5、免疫印記技術(shù),（三）病原菌抗原的檢測(cè),（四）病原

4、菌核酸的檢測(cè) 不同的細(xì)菌具有不同的基因結(jié)構(gòu)，通過(guò)測(cè)定細(xì)菌的特異性基因序列進(jìn)行比較和鑒定。 1、核酸雜交技術(shù) 2、PCR技術(shù) 3、基因芯片（gene clips）技術(shù),PCR,二、血清學(xué)診斷,原理 用已知Ag檢測(cè)患者血清中未知Ab及其效價(jià)的變化，可作為感染性疾病的輔助診斷。雙份血清 恢復(fù)期或一周后血清抗體效價(jià)比早期升高4倍以上（含4倍），可確診。 種類直接凝集試驗(yàn)（肥達(dá)試驗(yàn)）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)乳膠

5、凝集試驗(yàn)、ELISA,人工免疫,人工主動(dòng)免疫 artificial active immunization疫苗（vaccine）類毒素,人工被動(dòng)免疫 artificial passive immunization抗毒素抗菌血清丙種球蛋白其他免疫制劑,第二節(jié) 細(xì)菌感染的特異性預(yù)防,一、人工主動(dòng)免疫 將疫苗及類毒素（抗原）接種于人體，使機(jī)體主動(dòng)產(chǎn)生獲得性免疫力。主要用于預(yù)防。（一）疫苗第一代疫苗：死疫苗、活疫苗

6、第二代疫苗：亞單位疫苗、基因工程疫苗第三代疫苗：DNA疫苗（核酸疫苗）1、死疫苗：傷寒、霍亂、流腦、鉤體病等死疫苗。2、活疫苗：BCG、鼠疫、炭疽、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹等減毒活疫苗。,兩種疫苗優(yōu)、缺點(diǎn)比較,活疫苗接種次數(shù) 1次接種劑量 小接種反應(yīng) 輕/隱性感染免疫類型 體液、細(xì)胞免疫時(shí)間 持久穩(wěn)定性 差毒力回復(fù) 有可能安全性

7、免疫缺陷者危險(xiǎn),死疫苗 2-3次 大 明顯 體液 短暫 強(qiáng) 無(wú) 好,2、亞單位疫苗(subunit vaccine) 利用微生物的保護(hù)性抗原制成的不含有核酸、能誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的疫苗。如肺炎球菌、腦膜炎球菌莢膜多糖疫苗。3、基因工程疫苗 利用基因工程技術(shù)把編碼病原體保護(hù)性抗原表位的目的基因，導(dǎo)入原核或真核表達(dá)系統(tǒng)后，用表達(dá)的保護(hù)性抗原所制成的疫苗。,4、核酸疫苗（nucleic acid va

8、ccine）也稱DNA疫苗，將編碼保護(hù)性抗原的基因重組到質(zhì)粒真核表達(dá)載體上，然后將重組的質(zhì)粒DNA直接注射到宿主體內(nèi)，外源基因在體內(nèi)表達(dá)的抗原刺激機(jī)體的免疫應(yīng)答。（二）類毒素 是用細(xì)菌的外毒素經(jīng)0.3%～0.4%甲醛處理后，其毒性消失但保留免疫原性。如白喉、破傷風(fēng)類毒素。,二、人工被動(dòng)免疫 輸入含有特異性抗體的免疫血清、純化免疫球蛋白抗體或細(xì)胞因子等免疫制劑，使機(jī)體立即獲得特異性免疫力的過(guò)程。 抗毒素 用細(xì)菌類毒素多次給馬注射

9、，待其產(chǎn)生大量抗體后，放血并分離馬血清經(jīng)提純后制成的制劑。如TAT、TDT等。抗菌血清,丙種球蛋白（1）血清丙種球蛋白 從正常人血中提取的免疫球蛋白（IgG、IgM）。（2）胎盤丙種球蛋白 從胎盤血中提取的免疫球蛋白（IgG）。其他免疫制劑,兩種人工免疫方法的比較,第三節(jié) 細(xì)菌感染的治療,抗菌藥物的種類 抗菌藥物的主要作用機(jī)制 抗菌藥物的存在問(wèn)題,1. 標(biāo)本采集與送檢時(shí)應(yīng)注意什么？2. 試比較人工主動(dòng)免疫