如何選配最適用的葉綠素?zé)晒獬上駜x器

1、如何選配最適用的葉綠素?zé)晒獬上駜x器,李川易科泰生態(tài)技術(shù)公司EcoLab生態(tài)實(shí)驗(yàn)室,葉綠素?zé)晒鈨x發(fā)展現(xiàn)狀,連續(xù)激發(fā)式熒光儀 Direct Fluorometer，PEA脈沖調(diào)制式熒光儀 Pulse Amplitude Modulated Fluorometer，PAM雙調(diào)制式熒光儀 Double-Modulation Fluorometer，F(xiàn)L3500,,,葉綠素?zé)晒鈨x的局限性,僅能通過光纖測(cè)量一個(gè)點(diǎn)的

2、總值,只能獲得數(shù)據(jù)和動(dòng)力學(xué)曲線圖,一般只能測(cè)量葉片,在進(jìn)行光合相關(guān)突變體篩選時(shí)工作量極大,葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)的發(fā)展,,Ladislav Nedbal（2000）等于上世紀(jì)90年代末期發(fā)明了與PAM技術(shù)相結(jié)合的葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)，研制成功了第一臺(tái)FluorCam調(diào)制式熒光成像儀。從此正式開啟了葉綠素?zé)晒庋芯康亩S時(shí)代。,Baker，2008，引用次數(shù)1200,,如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇合適的葉綠素?zé)晒獬上駜x器型號(hào)和配置？如何分辨葉綠素?zé)晒?/p>

3、成像儀器的優(yōu)劣？,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中需要明確的問題,測(cè)量什么樣品室內(nèi)實(shí)驗(yàn)還是野外實(shí)驗(yàn)測(cè)量哪些參數(shù)軟件分析功能經(jīng)費(fèi),測(cè)量什么樣品,成像面積,光源板面積為了進(jìn)行可靠的葉綠素?zé)晒獬上駵y(cè)量，關(guān)鍵在于整個(gè)成像區(qū)域中保證均勻同質(zhì)的光照。（Kalaji，2014）,儀器的成像面積是怎么確定的？,CCD傳感器與鏡頭分辨率對(duì)焦,分辨率與靈敏度的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,分辨率越高越好嗎,,,Fan，2015,Mao，2015,光源的選擇,光質(zhì)：一般為紅光、藍(lán)光或白

4、光，特殊情況下可能需要綠光、青光、棕色光等光源光強(qiáng)：2000 μmol?m–2?s–1的飽和脈沖可能足夠進(jìn)行Fm的測(cè)量，但是對(duì)于在較高的光照下測(cè)量Fm’則可能太低了（Murchie，2013）。Earl 和Ennahli（2004）在研究玉米時(shí)甚至發(fā)現(xiàn) 7500 μmol?m–2?s–1以上的飽和脈沖才能測(cè)得最大的Fm’。,,室內(nèi)實(shí)驗(yàn)還是野外實(shí)驗(yàn),,,測(cè)量哪些參數(shù),葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv/Fm：測(cè)量參數(shù)包括F0，F(xiàn)m，F(xiàn)v，F(xiàn)v/ Fm

5、等Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)：F0，F(xiàn)p，F(xiàn)v，F(xiàn)t_Lss，QY，Rfd等熒光參數(shù)熒光淬滅分析：F0，F(xiàn)m，F(xiàn)p，F(xiàn)s，F(xiàn)v，F(xiàn)v/ Fm，QY，ΦII，NPQ，qP，Rfd，qN，qL等光響應(yīng)曲線：F0，F(xiàn)m，F(xiàn)v/ Fm，QY_Ln，ETR等熒光參數(shù),熒光成像可以測(cè)量OJIP嗎,OJIP測(cè)量對(duì)檢測(cè)器的要求：100 000次/秒目前商用儀器中僅有兩種可以進(jìn)行OJIP熒光成像,Jedmowski，2015,熒光成像如何測(cè)量F0’,

6、使用公式計(jì)算 Oxborough and Baker，1997使用遠(yuǎn)紅光源板直接測(cè)量,其他成像功能,PAR吸收率成像GFP、YFP等熒光蛋白成像MCF多光譜熒光成像顯微多光譜成像與光譜分析,PAR吸收率成像植物光合有效輻射吸收率（PAR absorptivity）：通過紅色光源與紅外光源照射植物樣品，測(cè)量植物樣品對(duì)每種光源的反射率，根據(jù)公式計(jì)算得出

7、光合有效輻射吸收率。其計(jì)算公式為：,Ulstrup，2007,GFP、YFP等熒光蛋白成像,MCF多光譜熒光成像,Chaerle，2006,作物病害早期無(wú)損檢測(cè)與葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)結(jié)合共同研究,Pérez-Bueno，2015,FKM多光譜熒光動(dòng)態(tài)顯微成像技術(shù),FluorCam熒光成像技術(shù)生物熒光顯微成像技術(shù)多光譜熒光測(cè)量技術(shù)光譜分析技術(shù),,,Berman-Frank，2001,Ferimazova ，2013,,鎘

8、、銅、鋅、鉻等重金屬脅迫可以嚴(yán)重影響植物的光合能力，F(xiàn)luorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)能夠研究重金屬對(duì)植物葉片或其他器官宏觀上的傷害，而FKM技術(shù)可以直觀地研究單個(gè)植物細(xì)胞里重金屬積累對(duì)葉綠體的影響及不同細(xì)胞之間的差異。（Küpper，2007）,忍冬葉片橫切——柵欄組織和海綿組織,,擬南芥表面成像——細(xì)胞內(nèi)的葉綠體分布,,表皮細(xì)胞成像——?dú)饪着c葉綠體,,玉米表皮細(xì)胞熒光成像,,葉綠素?zé)晒獾墓庾V分析,,軟件基礎(chǔ)功能,光源