熒光納米探針在生命科學(xué)中的應(yīng)用

1、納米熒光探針在生命科學(xué)中的應(yīng)用摘要摘要：納米熒光探針(fluescentprobe)在化學(xué)傳感、光學(xué)材料及生物檢測(cè)和識(shí)別等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，并成為實(shí)現(xiàn)上述功能的一種主要的技術(shù)手段。但以傳統(tǒng)的有機(jī)熒光染料為主的熒光探針在應(yīng)用中也存在一些難以克服的缺陷。最近，無機(jī)發(fā)光量子點(diǎn)、熒光聚合物納米微球、復(fù)合熒光二氧化硅納米粒子等熒光納米探針的相繼出現(xiàn)，在一定程度上克服了傳統(tǒng)有機(jī)熒光試劑的缺陷，為生物分析提供了新的發(fā)展領(lǐng)域，成為了近年來研究的熱點(diǎn)

2、。關(guān)鍵字：納米熒光探針、生物檢測(cè)和識(shí)別、無機(jī)發(fā)光量子點(diǎn)Abstract：Nanofluescenceprobeiswidelyusedinchemicalsensingopticalmaterialsbiologicaldetectionidentificationfieldtorealizetheabovefunctionsasaprimarytechnology.Butinatraditionalfluescentprimarily

3、ganicfluescentprobesintheapplicationofsomearedifficulttoovercomedefects.Recentlyinganiclightquantumdotsfluescencepolymermicrospheresnanocompositefluescencesilicananoparticlesfluescencenanoproberhaveappearedinacertainexte

4、ntgservedthedefectsofconventionalganicfluescencereagentbiologicalanalysistoprovidethenewdevelopmentareabecomethefocusofresearchinrecentyears.Keywds:NanofluescenceprobeBiologicaldetectionrecognitionInganicglowingdots1、Cla

5、ssificationoffluescentnanoprobe熒光納米粒子是指與蛋白質(zhì)或其他大分子結(jié)構(gòu)非共價(jià)相互作用而使一種或幾種熒光性質(zhì)發(fā)生改變的小分子物質(zhì)?？捎糜谘芯看蠓肿游镔|(zhì)的性質(zhì)和行為。可以發(fā)熒光的半導(dǎo)體納米微晶體（量子點(diǎn)）或?qū)晒鈭F(tuán)通過包埋、共價(jià)鍵連接以及超分子組裝等方式引入有機(jī)或無機(jī)納米粒子中，并讓納米粒子承擔(dān)有機(jī)小分子熒光染料的檢測(cè)、標(biāo)記等功能。與傳統(tǒng)的熒光染料相比，熒光納米粒子具有更高的亮度和光穩(wěn)定性，也能更加容易地實(shí)現(xiàn)

6、水分散性和生物相容性。另外，隨著納米制備技術(shù)的進(jìn)一步提高，對(duì)納米粒子的尺度的精確控制及對(duì)粒子功能化手段的日臻完善，這在很大程度上使熒光納米粒子滿足了化學(xué)傳感器、生物探針等領(lǐng)域的要求。目前熒光納米粒子主要有無機(jī)發(fā)光量子點(diǎn)、熒光高分子納米微球、復(fù)合熒光二氧化硅納米粒子三大類。1.1Quantumdots納米熒光探針在生命科學(xué)中的應(yīng)用復(fù)合熒光二氧化硅納米粒子是由功能性的內(nèi)核、可生物修飾的硅殼以及修飾在硅殼表面的生物分子構(gòu)成，具有明顯核殼結(jié)構(gòu)的

7、一類新型的納米顆粒，其內(nèi)核材料可以是有機(jī)熒光染料、稀土發(fā)光材料、量子點(diǎn)等。由于該類型的納米顆粒采用油包水反相微乳液方法成核，通過硅烷化試劑在微乳液中水解形成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的硅殼進(jìn)行包殼，所以采用不同的硅烷化試劑可以制備出表面帶有不同官能團(tuán)的核殼型生物納米顆粒。通過對(duì)納米顆粒的表面進(jìn)行各種生物大分子的修飾，如：肽片斷、抗體、生長(zhǎng)因子等，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)特異性細(xì)胞的識(shí)別、分離和檢測(cè)。于是，復(fù)合熒光二氧化硅納米粒子由于其具有良好的分散性、溫和的合成條

8、件、可重復(fù)合成及細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)已在生物學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。目前，復(fù)合熒光二氧化硅納米粒子在細(xì)胞水平上的研究主要集中在特定細(xì)胞的染色、識(shí)別和分離、細(xì)胞內(nèi)pH的檢測(cè)及基因轉(zhuǎn)染等方面。2Applicationoffluescentnanopartclesinlifescience2.1Fluescentnanoparticlesweredirectlyusedfbiologicaldetection熒光納米粒子作為一種熒光探針已被廣泛應(yīng)

9、用在生物標(biāo)記及醫(yī)療診斷領(lǐng)域。近年來國(guó)外已涌現(xiàn)出多家研制和開發(fā)熒光納米粒子生物熒光標(biāo)記的公司，我國(guó)在這方面的研究正逐步展開，也出現(xiàn)開發(fā)納米熒光探針相關(guān)產(chǎn)品的一些公司，如武漢的珈源公司就提供各種可用于生物的量子點(diǎn)探針?；谀壳皣?guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀，要實(shí)現(xiàn)熒光半導(dǎo)體納米粒子在生物檢測(cè)中的應(yīng)用關(guān)鍵在于對(duì)熒光納米粒子的表面結(jié)構(gòu)和功能的準(zhǔn)確控制，而且納米粒子表面必需具有親水性官能團(tuán)。為了使TOPO法合成的油溶性量子點(diǎn)轉(zhuǎn)移到水相，主要采用表面包覆和表面置

10、換兩種方法。例如，在量子點(diǎn)表面包覆SiO2殼層，Alivisatos等利用巰基硅氧烷(MPS)置換量子點(diǎn)表面的TOPO分子，然后進(jìn)一步將硅氧烷水解縮聚使微粒表面形成一種穩(wěn)定的SiO2殼層。通過水解有機(jī)硅氧烷還可以形成具有胺基、脲丙基和羧基等活性官能團(tuán)的SiO2殼層。自1998年Alivisatos和Nie等提出用半導(dǎo)體納米粒子作生物熒光標(biāo)記的最初構(gòu)想以來，基于熒光量子點(diǎn)的生物偶聯(lián)得到蓬勃發(fā)展。熒光量子點(diǎn)用于生物偶聯(lián)主要依靠納米粒子表面的

11、活性基團(tuán)如羧基、胺基、醇基和巰基等。主要是利用納米粒子表面活性基團(tuán)與生物分子之間形成共價(jià)偶聯(lián)、靜電吸附、疏水作用和硅烷偶聯(lián)等。歸納起來，熒光納米粒子與生物分子偶聯(lián)主要有兩種方法：一種是通過化學(xué)反應(yīng)，即通過表面修飾有羧基或氨基的水溶性納米晶與生物分子中的氨基或羧基形成酰氨鍵實(shí)現(xiàn)偶聯(lián)。該方法通常用于較復(fù)雜的研究體系，如抗源抗體之間的識(shí)別、活體標(biāo)記及特異性標(biāo)記等。另一種是靜電吸附方法，帶電荷的納米粒子可以與帶相反電荷的生物分子通過靜電相互作用