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文檔簡介
1、2011現(xiàn)代生物技術(shù)期末試卷現(xiàn)代生物技術(shù)期末試卷一填空題填空題1在基因工程實踐中,常用的載體有(質(zhì)粒),(噬菌體)和(腺病毒載體)質(zhì)粒質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外能夠自主復(fù)制的環(huán)形雙鏈的DNA分子。質(zhì)粒DNA不僅能在細(xì)菌中復(fù)制,并且在添加真核復(fù)制信號和啟動子后,可以構(gòu)建出能在原核和真核細(xì)胞中均可復(fù)制的穿梭質(zhì)粒,并在真核細(xì)胞中表達(dá),載體的特點:載體的特點:1、至少有一個復(fù)制起點,因而至少可在一種生物體中自主復(fù)制。2、至少應(yīng)有一個克隆位點,以供外源D
2、NA插入。3、至少應(yīng)有一個遺傳標(biāo)記基因,以指示載體或重組DNA分子是否進(jìn)入宿主細(xì)胞。4、具有較小的分子量和較高的拷貝數(shù)。2(限制性內(nèi)切酶)酶和(DNA連接酶)酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用,才真正使DNA分子的體外切割與連接成為可能。3根據(jù)質(zhì)粒復(fù)制控制類型,可將質(zhì)粒分為(嚴(yán)緊型質(zhì)粒)和(松弛型)質(zhì)粒。根據(jù)載體功能劃分:根據(jù)載體功能劃分:1).普通型載體,普通型載體,2)、表達(dá)型載體、表達(dá)型載體.表達(dá)外源基因以產(chǎn)生大量外源基因產(chǎn)物表達(dá)外源基因以產(chǎn)生大量外
3、源基因產(chǎn)物用于構(gòu)建用于構(gòu)建cDNA文庫文庫41993年美國科學(xué)家(KaryMullis)因發(fā)明PCR技術(shù)而獲得諾貝爾獎。5一切生物生命活動的結(jié)構(gòu)和功能單位是(細(xì)胞),其可分為()和()兩大類細(xì)胞分裂的方式:無絲:最簡單的細(xì)胞分裂方式只出現(xiàn)在低等生物或動植物的器官和組織內(nèi)有絲:是細(xì)胞分裂的主要形式其實質(zhì)是染色體經(jīng)過復(fù)制變成雙份再平均分配到兩個子細(xì)胞中從而保持遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定傳遞.有絲分裂過程包括間期前期中期后期和末期.細(xì)胞的分裂是通過細(xì)胞周
4、期來實現(xiàn)的。S期,DNA合成的時期.從S期到有絲分裂期(M期)為G2期從M期結(jié)束到S期開始之前稱為G1期.6人工種子由(種皮)、(胚乳)和(胚)三部分構(gòu)成。7動物細(xì)胞常用的培養(yǎng)方法有(貼壁培養(yǎng))、(懸浮培養(yǎng))和(固定化培養(yǎng))三種。8酶的命名方法有(系統(tǒng)命名)和(習(xí)慣命名)兩種。酶是生物體活細(xì)胞產(chǎn)生的、具有催化反應(yīng)功能的蛋白質(zhì)酶是生物體活細(xì)胞產(chǎn)生的、具有催化反應(yīng)功能的蛋白質(zhì)生物體內(nèi)的各種物質(zhì)代謝、能量傳遞、信息轉(zhuǎn)錄、生物體內(nèi)的各種物質(zhì)代謝
5、、能量傳遞、信息轉(zhuǎn)錄、神經(jīng)傳導(dǎo)、免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞衰老及生長發(fā)育等等,都離不開酶的參與。神經(jīng)傳導(dǎo)、免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞衰老及生長發(fā)育等等,都離不開酶的參與。作用:作用:1、執(zhí)行某種具體的生理功能;、執(zhí)行某種具體的生理功能;2、擔(dān)負(fù)保衛(wèi)清除功能;、擔(dān)負(fù)保衛(wèi)清除功能;3、協(xié)同激素起生物信號放大作用;、協(xié)同激素起生物信號放大作用;4、催化和調(diào)、催化和調(diào)控代謝反應(yīng)控代謝反應(yīng)所有的酶都由生物體合成,幾乎所有生物都能合成產(chǎn)生酶,酶在生物體內(nèi)的合成總是受其相應(yīng)
6、合成調(diào)節(jié)機制控制,以保證機體最有效、經(jīng)濟地將體內(nèi)合成原料與能量用于自身生命最需要的酶等物質(zhì)分布:它們或定位于某亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)上處于它們或定位于某亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)上處于“溶解溶解”狀態(tài);狀態(tài);不同生物體細(xì)胞內(nèi)酶的數(shù)量和種類不同;同一生物體內(nèi)的不同生物體細(xì)胞內(nèi)酶的數(shù)量和種類不同;同一生物體內(nèi)的不同部位或不同生長發(fā)育階段的細(xì)胞內(nèi)酶的數(shù)量、種類不同;不同部位或不同生長發(fā)育階段的細(xì)胞內(nèi)酶的數(shù)量、種類不同;微生物酶來說,合成后分泌有兩種情況:胞外酶(分泌型酶
7、)是指可以穿過質(zhì)膜的任何酶,大多數(shù)是水解酶,大微生物酶來說,合成后分泌有兩種情況:胞外酶(分泌型酶)是指可以穿過質(zhì)膜的任何酶,大多數(shù)是水解酶,大多數(shù)工業(yè)用酶是胞外酶。胞內(nèi)酶多數(shù)工業(yè)用酶是胞外酶。胞內(nèi)酶是指合成后仍然在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用的酶。是指合成后仍然在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用的酶。酶系統(tǒng)分類命名的基礎(chǔ)是酶的專一性:酶系統(tǒng)分類命名的基礎(chǔ)是酶的專一性:31基因工程基因工程利用DNA體外重組或PCR擴增技術(shù)從某種生物基因組中分離感興趣的基因,或是用人工
8、合成的方法獲取基因,然后經(jīng)過一系列切割,加工修飾,連接反應(yīng)形成重組DNA分子,再將其轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞,以期獲得基因表達(dá)的過程.目的是按人類的意愿生產(chǎn)生物產(chǎn)品或改變物種的性狀來為人類的可持續(xù)生存和發(fā)展服務(wù)。補基因基因是攜帶遺傳信息的線性DNA分子,其核苷酸序列就包含一定的遺傳信息,這也是生物信息學(xué)的基礎(chǔ)。基因的特點是:基因自體復(fù)制,基因決定形狀,基因可以突變(這是生物進(jìn)化的基礎(chǔ))基因的起始密碼子是AUG,終止密碼子是UAA,UAG,UG
9、A。分離目的基因切割目的基因和載體接(連目的基因和載體)轉(zhuǎn)(化宿主細(xì)胞)轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞—表達(dá)目的基因目的基因的獲得手段目的基因的獲得手段化學(xué)合成目的基因從基因組文庫中提取目的基因(DNA探針:核酸雜交)利用PCR擴增目的基因目的基因與載體DNA連接的方式平端連接:難度大,需酶量多黏端連接:容易一些,常用。大腸桿菌DNA連接酶(能連接平末端連接效率低)受體細(xì)胞的類型微生物:大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母和霉菌等植物細(xì)胞動物細(xì)胞:昆蟲細(xì)胞、L細(xì)
10、胞、HeLa細(xì)胞導(dǎo)入方法:高壓電穿孔法粒子轟擊法顯微注射法重組體篩選的方法重組體篩選的方法大體可分為兩種:核酸水平和蛋白質(zhì)水平(利用抗生素抗性篩選、插入失活法、電泳檢測法菌落雜交篩選法、免疫化學(xué)檢測法、DNA序列檢測)核酸水平上主要是通過核酸雜交。蛋白質(zhì)水平上主要是檢測抗生素抗性、營養(yǎng)缺陷型、觀察噬菌斑的形成、檢測目標(biāo)酶活性、目標(biāo)蛋白的免疫特性和生物活性。目的基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測蛋白質(zhì)的PAGE表達(dá)蛋白生物學(xué)功能檢測2重組體重組體不同來源
11、的DNA組合成的分子3細(xì)胞融合細(xì)胞融合用自然或人工的方法使兩個或幾個不同細(xì)胞融合為一個細(xì)胞的過程用自然或人工的方法使兩個或幾個不同細(xì)胞融合為一個細(xì)胞的過程。細(xì)胞與組織培養(yǎng)可分為三個層次:細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和器官培養(yǎng)。全能細(xì)胞能夠表達(dá)生物體基因組的任何一種基因,并能夠分化出該生物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞,進(jìn)而發(fā)育為一個完全相同的生物體。愈傷組織細(xì)胞是分化的,但還沒有形成組織上的結(jié)構(gòu)植物組織培養(yǎng)的基本步驟培養(yǎng)材料的采集(全能性)培養(yǎng)材料的消毒
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