痰檢實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程

1、痰檢實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程痰檢實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程一、檢查程序一、檢查程序（一）痰標(biāo)本收集：在三個(gè)痰標(biāo)本盒上注明病人的姓名、編號(hào)、檢查日期和容器序號(hào)。病人首次留痰前應(yīng)指導(dǎo)病人，留取“即時(shí)痰”、“夜間痰”、“晨痰”合格的痰標(biāo)本，對(duì)所送不合格痰標(biāo)本除常規(guī)檢查外，應(yīng)要求患者重新送檢，合格的痰標(biāo)本包括干酪痰、血痰、粘液痰。唾液或口水用于病人確診時(shí)為不合格痰標(biāo)本，標(biāo)本量一般在3～5ml。（二）痰涂片制作：1、檢查前對(duì)新的玻片用95%的乙醇擦拭脫脂，經(jīng)干燥、清潔

2、、檢查無(wú)油污、無(wú)劃痕后作為合格的玻片備用。在已經(jīng)準(zhǔn)備的痰玻片背面左端的13處注明編號(hào)，挑取痰標(biāo)本中可疑部分約0.05～0.1ml，于玻片正面右側(cè)23處，均勻涂抹成1020mm的卵圓形痰膜。2、痰膜朝上靜置自然干燥后(一般約需要30分鐘)進(jìn)行染色鏡檢。當(dāng)氣溫低，痰膜不易干燥時(shí)，嚴(yán)禁將玻片直接在火焰上烘拷，以防產(chǎn)生氣溶膠或痰膜脫落。一張載玻片上只能涂抹一份痰標(biāo)本，一張載玻片只能使用一次，不得清洗后再次用于痰涂片染色檢查。3、涂抹完畢后的痰標(biāo)

3、本，在檢查結(jié)果報(bào)告前，應(yīng)暫時(shí)保留。以備涂片、染色不合格影響鏡檢結(jié)果時(shí)，重新涂片和染色之用。4、萋－尼氏染色油鏡檢查.（三）實(shí)驗(yàn)室登記：按照年度病人序號(hào)和痰標(biāo)本序號(hào)在實(shí)驗(yàn)室登記本上進(jìn)行登記，并以同樣的號(hào)碼在痰涂片檢查單上進(jìn)行標(biāo)記。檢驗(yàn)單的病人姓名應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室登記本一致。（四）痰涂片檢查結(jié)果登記與報(bào)告：及時(shí)在登記本上登記痰涂片檢查結(jié)果。當(dāng)病人的三次痰涂片檢查完成后，發(fā)現(xiàn)有陽(yáng)性痰涂片，應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)報(bào)醫(yī)院防保科，縣級(jí)結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)再對(duì)痰涂片進(jìn)行

4、確認(rèn)。（六）痰涂片的保存：每個(gè)查痰點(diǎn)鏡檢后的全部痰涂片應(yīng)按實(shí)驗(yàn)室登記本序號(hào)連續(xù)排列，分別存放在各點(diǎn)固定的玻片盒中，供上級(jí)實(shí)驗(yàn)室復(fù)核確認(rèn)。（七）痰檢質(zhì)量控制：每個(gè)痰涂片檢查點(diǎn)均按照中國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃《痰涂片鏡檢質(zhì)量保證手冊(cè)》的要求，作為一個(gè)獨(dú)立的被質(zhì)控單位接受室間質(zhì)量評(píng)估和檢查工作。二、二、萋－尼氏染色萋－尼氏染色1、涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片間距保持在10mm以上的距離；火焰固定(在5秒鐘內(nèi)將玻片置于火焰上來(lái)回烘烤4次)。2、

5、滴加石碳酸復(fù)紅染液，蓋滿痰膜，火焰加熱至出現(xiàn)蒸汽后，脫離火焰，保持染色5分鐘。染色期間應(yīng)始終保持痰膜被染色液覆蓋，必要時(shí)可續(xù)加染色液。加溫時(shí)勿使染色液沸騰。3、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去染色液，瀝去標(biāo)本上剩余的水。4、自痰膜上端外緣滴加脫色劑布滿痰膜，脫色1分鐘；如有必要，需流水洗去脫色液后，再次脫色至痰膜無(wú)可視紅色為止。5、流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去脫色液，瀝去玻片上剩余的水。6、滴加亞甲藍(lán)復(fù)染液，染色30秒鐘。7、流水自玻片一端

6、輕緩沖洗，沖去復(fù)染液，瀝去標(biāo)本上剩余的水。待玻片干燥后鏡檢。一張染色合格的痰玻片，由于被亞甲藍(lán)染色而呈亮藍(lán)色。將染色后的玻片放置在報(bào)紙上，如果報(bào)紙上的文字透過(guò)痰膜不能被看清，表明該玻片涂抹過(guò)厚。三、顯微鏡檢查三、顯微鏡檢查1、使用10倍目鏡雙目顯微鏡讀片。2、取染色完畢且已干燥的玻片，痰膜向上放置在玻片臺(tái)上并以卡尺固定。首先使用40倍物鏡，轉(zhuǎn)動(dòng)卡尺移動(dòng)玻片至痰膜左端，將光線調(diào)節(jié)至適當(dāng)亮度，調(diào)節(jié)焦距至可見(jiàn)細(xì)胞形態(tài)；移5、使用高質(zhì)量染料、嚴(yán)

7、格按照配方配制染液。6、嚴(yán)格按照操作程序完成染色過(guò)程。7、判斷結(jié)果為“陰性”前，必須閱讀規(guī)定要求的視野數(shù)。8、作為對(duì)照，可采用已知結(jié)果為陽(yáng)性的玻片，完成染色鏡檢過(guò)程。9、完整、準(zhǔn)確地標(biāo)注痰盒、玻片和實(shí)驗(yàn)室登記本。10、登記前對(duì)檢驗(yàn)單和標(biāo)本盒上的標(biāo)注進(jìn)行仔細(xì)核對(duì)。11、準(zhǔn)確記錄和報(bào)告結(jié)果。七、痰玻片的保存七、痰玻片的保存（一）鏡檢后的涂片應(yīng)及時(shí)用浸滿二甲苯的擦鏡紙徹底去除涂片上的鏡油。（二）再次核對(duì)實(shí)驗(yàn)室登記本與每張涂片實(shí)驗(yàn)序號(hào)。（三）嚴(yán)

8、禁在涂片上標(biāo)記鏡檢的陰、陽(yáng)性結(jié)果。（四）按實(shí)驗(yàn)室登記本序號(hào)連續(xù)排列全部涂片，存放于玻片盒內(nèi)。（五）涂片保存與實(shí)驗(yàn)室登記本記錄應(yīng)保持一致。初診病人第一張涂片存入涂片盒后需預(yù)留出兩個(gè)空位置，以備第二張、第三張涂片檢查后放入。（六）保存近期3個(gè)月的全部痰涂片待各級(jí)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制抽檢，如果年涂片量不足500張，必須全部保存。（七）裝滿涂片的玻片盒，需用標(biāo)簽注明涂片實(shí)驗(yàn)序號(hào)區(qū)間和日期區(qū)間，以便日后盲法復(fù)檢或現(xiàn)場(chǎng)評(píng)價(jià)時(shí)抽樣。八、實(shí)驗(yàn)室管理八、實(shí)驗(yàn)室

9、管理（一）顯微鏡日常維護(hù)顯微鏡作為發(fā)現(xiàn)涂片陽(yáng)性病人的重要設(shè)備，實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)正確使用并給予正確維護(hù)，以保證其正常工作和延長(zhǎng)使用壽命。在使用和維護(hù)顯微鏡時(shí)應(yīng)特別遵守下列要點(diǎn)：1、顯微鏡應(yīng)放置在干燥、無(wú)塵和通風(fēng)的環(huán)境中。如果顯微鏡一段時(shí)期內(nèi)停止使用，應(yīng)拆開并放置在原包裝盒內(nèi)，并放置有效的干燥劑。2、使用前和使用后必須使用擦鏡紙徹底清潔物鏡。3、嚴(yán)禁物鏡鏡頭直接接觸玻片上痰膜。4、使用油鏡時(shí)，只能使用細(xì)螺旋調(diào)節(jié)焦距。5、使用電光源顯微鏡時(shí)，

10、注意電壓和電流是否與儀器要求相匹配。（二）耗材供應(yīng)與管理為保障痰涂片檢查工作能夠連續(xù)不斷開展，應(yīng)儲(chǔ)存一定數(shù)量的實(shí)驗(yàn)耗材和相應(yīng)試劑，儲(chǔ)備量可根據(jù)工作量來(lái)進(jìn)行計(jì)算，一般應(yīng)準(zhǔn)備比平均工作量高20％的相應(yīng)耗材和試劑。染色試劑應(yīng)由省結(jié)核病參比實(shí)驗(yàn)室或經(jīng)省級(jí)結(jié)核病參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了質(zhì)量控制的地（市）級(jí)結(jié)核病參比實(shí)驗(yàn)室組織統(tǒng)一配制和供應(yīng)，其它耗材可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r由省、地或縣統(tǒng)一供應(yīng)。各項(xiàng)物資、耗材按照需要供應(yīng)，并保證達(dá)到質(zhì)量要求。（三）實(shí)驗(yàn)室人員安全防護(hù)

11、1、嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程，實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)后方可上崗。2、嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程，警惕分枝桿菌氣溶膠的產(chǎn)生。3、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格限制非實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入，減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外交叉生物污染。完成實(shí)驗(yàn)工作離開實(shí)驗(yàn)室，要關(guān)好門窗。4、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，盡量避免攜帶非必需物品。實(shí)驗(yàn)臺(tái)上不放任何與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物件或私人用品。5、工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)穿工作服并注意著裝整齊，操作時(shí)應(yīng)戴口罩、帽子和手套，長(zhǎng)發(fā)者須將頭發(fā)裝束在帽子內(nèi)。6、實(shí)驗(yàn)室