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1、第五章 植物檢疫性病原物及雜草,本章重點(diǎn)重要檢疫性病原物的鑒別特征、自然寄主種類及其引起病害的癥狀特點(diǎn)重要檢疫性病原物的傳播途徑及檢疫檢驗(yàn)技術(shù)檢疫性雜草的識(shí)別及傳播途徑,第一節(jié) 危險(xiǎn)性病原真菌,基本特點(diǎn)所有真菌性病害都可通過(guò)種苗傳播,可經(jīng)由種子傳播的占3.5%;列入各國(guó)檢疫名單的有100多種,我國(guó)現(xiàn)行的名單中,A1類真菌11種,A2類2種,A3類73種,B類5種;,一、小麥矮腥黑穗病菌,學(xué)名 Tilletia contro
2、versa Kühn(TCK)異名 T. brevifaciens Fisch.分類地位 擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina),冬孢菌綱(Teliomycetes),黑粉菌目(Ustilaginales),腥黑粉菌屬英文病名 Dwarf bunt of wheat,(一)發(fā)生簡(jiǎn)史及危害,1874 Kühn在匍匐冰草上發(fā)現(xiàn);1935年從網(wǎng)腥黑粉菌中區(qū)分開(kāi)的一個(gè)“新變種”;是麥類黑粉菌中危害最大、防
3、治極難的病害之一;在美國(guó)北部發(fā)生嚴(yán)重,1972年減產(chǎn)17%,重病田減產(chǎn)90%;為我國(guó)禁止進(jìn)境的A1類檢疫性病害。上海、大連、深圳等檢疫局曾多次從美國(guó)和德國(guó)轉(zhuǎn)口的小麥中截獲TCK孢子。,美洲:美國(guó)、加拿大等;尤其是美國(guó)中西部和東北部;歐洲:俄羅斯、烏克蘭、捷克斯洛伐克、波蘭等;亞洲:土耳其、伊拉克、伊朗、敘利亞、阿富汗、日本等;非洲:阿爾及利亞、利比亞、突尼斯和大洋洲的澳大利亞(為害冬大麥)等。,(二)境外分布,禾本科的 5個(gè)
4、族,18個(gè)屬,65個(gè)種或變種。被侵染的屬有山羊草屬、如冰草屬、剪股穎屬、看麥娘屬、燕麥草屬、雀麥屬、鴨茅屬、野麥屬、羊茅屬、絨毛草屬、大麥屬、黑麥草屬、早熟禾屬、黑麥屬、三毛草屬和小麥屬。在栽培條件下,矮腥黑粉菌主要為害冬小麥,也侵染大麥和黑麥。,(三)寄主范圍,植株矮化:為健株的1/4~2/3分蘗增多:健株2~4個(gè),病株4~10個(gè),病株,,健株,,(四)危害癥狀特點(diǎn),病穗,健穗,小花增多、病穗寬大緊密:健株3~5,病株5~7病
5、粒近球型、有魚(yú)腥味,成熟后成菌癭。,(四)危害癥狀特點(diǎn),病原形態(tài) 冬孢子黃褐色,球形、近球形,直徑19.73~22.2 μm;外壁有多角狀網(wǎng)紋; 網(wǎng)目4.5~6.4個(gè);網(wǎng)脊高0.82~1.77 μm; 膠質(zhì)鞘無(wú)色透明1.2~2.16μm。不孕孢子球形無(wú)色,薄壁,光滑,有的也包被膠鞘。,(五)病原形態(tài)與生物學(xué),小麥矮腥黑穗病菌冬孢子,小麥矮腥黑穗病菌冬孢子,TCK擔(dān)孢子“H”型結(jié)合,,小麥矮腥黑穗病菌與近似種冬孢子形態(tài)比較,小麥網(wǎng)腥黑
6、穗病菌,小麥光腥黑粉病菌,小麥印度腥黑穗病菌,生物學(xué)特性冬孢子萌發(fā)需有長(zhǎng)期低溫與光照。萌發(fā)溫度范圍最低-2℃≤T≤15℃,適溫為3~8℃。在5℃條件下,至少3周才開(kāi)始萌發(fā),6~8周為萌發(fā)高峰。在5℃培養(yǎng)3~4周,再移至-2~0℃,則在較短時(shí)間內(nèi)就可大量萌發(fā)。,(五)病原形態(tài)與生物學(xué),冬孢子萌發(fā)需有弱光照,適宜的照度為400~600lx。對(duì)濕度的要求不甚嚴(yán)格,土壤含水量35%~88%時(shí)均可萌發(fā)。矮腥冬孢子具有自發(fā)熒光;網(wǎng)腥冬孢子(除
7、少數(shù)未成熟者外)無(wú)此種自發(fā)熒光,這一特征可用于種的鑒別。,(五)病原形態(tài)與生物學(xué),三種腥黑粉菌冬孢子有關(guān)特征的比較,土傳疫區(qū)土壤帶菌是主要的侵染菌源。分散的冬孢子在病田土壤中存活l~3年,菌癭中的冬孢子可存活3~10年。冬孢子在水田中只能存活5個(gè)月。冬孢子經(jīng)過(guò)牲畜的消化道后仍可萌發(fā)。種傳 附著在子表面,或混雜在種子間遠(yuǎn)距離傳播。,(六)傳播途徑,運(yùn)載工具 隨著被孢子污染的包裝材料等遠(yuǎn)傳。疫區(qū)的孢子可隨風(fēng)雨、河水和灌溉水傳
8、播到較遠(yuǎn)的無(wú)病區(qū)。病麥加工后的下腳料、洗麥水等 若不慎隨糞肥施入田間或流入田間都可污染土壤。,(六)傳播途徑,發(fā)病規(guī)律,發(fā)病關(guān)鍵因素:冬孢子萌發(fā)溫度0~5 ℃ ,40d;寄主組織幼嫩。,,過(guò)篩檢驗(yàn) 在各艙各層次按棋盤式隨機(jī)選點(diǎn)20~30個(gè),每點(diǎn)至少取1kg樣品,用1.7mm ×20mm長(zhǎng)孔篩或2.5mm圓孔篩進(jìn)行篩檢,仔細(xì)檢查篩下物中有無(wú)菌癭及其碎塊,并同時(shí)檢查篩上物。癥狀檢查 將樣品倒入滅菌白瓷盤內(nèi),仔細(xì)檢查有無(wú)菌
9、癭或碎塊,挑取可疑組織在顯微鏡下檢查鑒定。同時(shí)對(duì)現(xiàn)場(chǎng)檢查時(shí)攜回室內(nèi)的篩上挑出物和篩下物進(jìn)行檢查,將發(fā)現(xiàn)的可疑病組織及其他可疑的感染黑穗病的禾本科作物及雜草種子進(jìn)行鏡檢鑒定。,(七)檢驗(yàn)方法,洗滌檢驗(yàn) 檢查附著于種子表面的病菌冬孢子。在顯微鏡下觀察,與其它病原菌相區(qū)分。孢子萌發(fā)檢驗(yàn) 3%瓊脂培養(yǎng)基。設(shè)5 ℃和17 ℃/無(wú)光照,(七)檢驗(yàn)方法,冬孢子自發(fā)熒光顯微檢驗(yàn) 從菌癭上刮取冬孢子于載玻片上,然后加一滴無(wú)熒光載浮劑,封片后置于
10、激發(fā)波長(zhǎng)為485nm,屏障濾片波長(zhǎng)為520nm的落射熒光顯微鏡下,檢查視野中呈熒光正負(fù)反應(yīng)的冬孢子數(shù),統(tǒng)計(jì)冬孢子自發(fā)熒光率,全過(guò)程不得超過(guò)3 min。冬孢子自發(fā)熒光率大于或等于80%,為TCK。PCR技術(shù),(七)檢驗(yàn)方法,二、馬鈴薯癌腫病菌,學(xué)名 Synchytrium endobioticum(Schilb.) Percival異名 Chrysophlyctis endobiotica (Schil.)
11、 Synchytrium solanl Massee 英文病名 Potato wart disease, Black wart of potato, Black scab of potato分類地位 鞭毛菌亞門(Mastigomycotina)壺菌綱(Chytridiomycetes)壺菌目(Chytridiales)集壺菌屬( Synchytrium)危險(xiǎn)性分析 我國(guó)列為A1類檢疫性真菌,亞洲的日本、印度、巴基斯坦、
12、緬甸、巴勒斯坦、黎巴嫩、以色列、尼泊爾;非洲的突尼斯、阿爾及利亞、津巴布韋、南非、肯尼亞、坦桑尼亞;美洲的加拿大、美國(guó)、巴西、秘魯、阿根廷、智利、哥斯達(dá)黎加、烏拉圭、厄瓜多爾、玻利維亞、墨西哥、??颂m群島;歐洲的英國(guó)、德國(guó)、奧地利、比利時(shí)、匈牙利、荷蘭、丹麥、波蘭、盧森堡挪威、葡萄牙、羅馬尼亞、前蘇聯(lián)、芬蘭、法國(guó)、捷克、斯洛伐克、瑞士、瑞典、意大利、前南斯拉夫、希臘、保加利亞、西班牙、冰島、愛(ài)爾蘭、法羅群島;大洋洲的新西蘭、澳大利亞。
13、我國(guó)四川、云南部分地區(qū);,(一)境外分布,馬鈴薯癌腫病在全球的分布,寄主范圍 自然條件下主要侵染馬鈴薯。也有資料記載可侵染番茄、甘苦茄、龍葵、京豆屬和假酸漿屬。 危害情況 危害馬鈴薯薯塊,導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)。常發(fā)生區(qū)內(nèi)一般減產(chǎn)50%,重者絕收,且品質(zhì)變劣,重病薯塊不堪食用,輕病薯塊也煮不爛。此病在冬季儲(chǔ)藏期間也引起腐爛。 前蘇聯(lián) 感病品種損失80%;中國(guó) 四川重病田病株率100%。,(二)寄主范圍及危害,高感品種可在腋芽和莖間
14、形成小癌瘤。莖、花梗、花萼、葉背可長(zhǎng)出無(wú)柄、有主脈無(wú)分脈的叢生小葉。,(三)典型癥狀,馬鈴薯莖基部被害狀,莖基部、匍匐莖:形成較大的甚至包圍整個(gè)莖基部的畸形、粗糙、疏松的腫瘤,酷似花椰菜。,馬鈴薯薯塊被害狀幼薯整個(gè)變成畸形。較大薯塊在芽眼處形成畸形的癌瘤。,有的品種根系也可發(fā)病產(chǎn)生癌腫瘤。癌瘤的數(shù)目、大小,因品種的感染性、感病的遲早、侵染點(diǎn)的多少和發(fā)病程度而異。癌腫初為白色,見(jiàn)光后漸為綠色,最后變褐至黑色,腐爛。,(三)典型癥狀,
15、休眠孢子囊 銹褐色,近球形,壁厚,分為三層,大小為50~82× 38~69µm,孢子壁厚4.l~10.5 µm ,外壁厚呈褐色內(nèi)壁薄而無(wú)色。休眠孢子萌發(fā)分裂產(chǎn)生無(wú)數(shù)的單鞭毛游動(dòng)孢子,呈球形或洋梨形,侵入寄主表皮細(xì)胞后引起瘤狀突起,很快進(jìn)入繁殖階段產(chǎn)生夏孢子囊。夏孢子囊成熟釋放游動(dòng)孢子再侵染。條件不適宜時(shí),產(chǎn)生配子→結(jié)合成雙鞭毛的合子→侵入寄主細(xì)胞→休眠孢子囊,(四)病原形態(tài)及生物學(xué),病原物形態(tài)特征,休眠
16、孢子囊,夏孢子囊,病害循環(huán)特點(diǎn),土壤溫度、濕度和pH值是影響該病發(fā)生的關(guān)鍵因子。休眠孢子囊、夏孢子囊萌發(fā)釋放游動(dòng)孢子要求近飽和的濕度。發(fā)病的適宜溫度12~24℃、pH4.5~7。多發(fā)生于海拔較高的山區(qū);炎熱干旱的平原極少發(fā)病。,(五)發(fā)病規(guī)律,氣候與發(fā)病的關(guān)系:溫濕度、降雨、日照是影響病害發(fā)生的主要因素。關(guān)鍵性因素是馬鈴薯生長(zhǎng)季節(jié)的雨日與雨量。,(五)發(fā)病規(guī)律,海拔高度與發(fā)病的關(guān)系 :在馬鈴薯種植上下限范圍內(nèi),海拔較高的地塊發(fā)病重。
17、坡向與發(fā)病的關(guān)系:在同一海拔高度內(nèi),陰坡比陽(yáng)坡發(fā)病重。品種與發(fā)病的關(guān)系:不同品種的抗性有一定的差異。耕作制度和栽培措施與發(fā)病的關(guān)系:病地連作發(fā)病重,輪作可減輕發(fā)病。土壤酸堿度與發(fā)病的關(guān)系:是中性至微酸最適發(fā)病。,(五)發(fā)病規(guī)律,癥狀檢驗(yàn) 檢查塊莖及根等的芽周圍有無(wú)癌腫組織。顯微鏡檢查 將芽及其周圍的塊莖組織帶表皮作斷面切片,顯微檢查有無(wú)夏孢子堆或休眠孢子囊存在。夏孢子堆黃褐色、壁厚,有的具不規(guī)則脊突。土壤檢查 對(duì)來(lái)自病區(qū)的馬
18、鈴薯塊莖及其他植物的塊根、塊莖、機(jī)器上所附帶的少量土壤,要檢查是否帶有馬鈴薯癌腫病的休眠孢子。常用的檢查方法有氯仿漂浮法、二澳乙烷漂浮法、油漂浮法和氫氟酸瘁取法。,(六)檢驗(yàn)方法,第二節(jié) 危險(xiǎn)性病原細(xì)菌,細(xì)菌的基本特點(diǎn)細(xì)菌病害包括有薄壁菌門、厚壁菌軟門和軟壁菌門引起的病害,有300多種;所有細(xì)菌性病害都可通過(guò)種苗傳播,經(jīng)由種子傳播的占40%;主要是革蘭氏陰性的假單胞菌、黃單胞菌和革蘭氏陽(yáng)性的棒形桿菌。列入我國(guó)檢疫名單的有57種,其
19、中A類52種,B類5種。,一、柑橘潰瘍病菌,學(xué)名 Xanthomonas axonopodis pv. citri Vauterin et al 1995英文病名 Citrus canker; Bacterial canker of citrus 分類地位 薄壁細(xì)菌門(Gracilicutes)假單胞菌科(Pseudomonaceae)黃單胞菌屬(Xanthomonas)危險(xiǎn)性分析 B類檢疫性細(xì)菌,亞洲的阿富汗、孟加拉、印度、巴
20、基斯坦、斯里蘭卡、印度尼西亞、馬來(lái)西亞、菲律賓、越南、緬甸、尼泊爾、老撾、柬埔寨、泰國(guó)、日本、韓國(guó)、朝鮮、馬爾代夫、阿拉伯聯(lián)合酋長(zhǎng)國(guó)、也門;美洲的阿根廷、巴西、巴拉圭、烏拉圭、美國(guó)、墨西哥、伯利茲、多米尼加、海地、馬提尼克、瓜德羅普;非洲的加蓬、馬達(dá)加斯加、科摩羅、科特迪瓦、毛里求斯、莫桑比克、留尼汪;大洋洲的巴布亞新幾內(nèi)亞、斐濟(jì)、關(guān)島、馬里亞納群島、密克羅尼西亞群島等國(guó)家均有分布。尤以亞洲國(guó)家發(fā)病最為普遍。 中國(guó) 廣東、廣西、福建等
21、柑橘產(chǎn)地。,(一)境外分布,主要侵染蕓香科野生和栽培的植物。在經(jīng)濟(jì)上造成損失最大的是柑橘,主要以甜橙、臍橙、酸橙、紅江橙、來(lái)檬和官溪蜜柚、通賢柚等最為感病。自然侵染主要發(fā)生在柑橘屬植物上,也發(fā)生在枸橘、金橘、菲律賓木橘上。,(二)寄主范圍,可為害葉片、枝梢和果實(shí)。苗圃發(fā)病,苗木生長(zhǎng)不良,出圃延遲;成年結(jié)果樹(shù)發(fā)病,常引起大量落葉、落果,甚至枯梢,降低樹(shù)勢(shì);未脫落的輕病果形成木栓化開(kāi)裂的病斑,嚴(yán)重影響果品的外觀和品質(zhì),降低了商品價(jià)值。
22、20世紀(jì)初 美國(guó)燒毀柑橘樹(shù)25萬(wàn)多株、苗木27萬(wàn)株,損失600萬(wàn)美元。我國(guó)貴州20世紀(jì)80年代,銷毀病株300萬(wàn)株。,(三)危害情況,葉片 背面產(chǎn)生圓形、針頭大小微突起的油浸狀半透明斑點(diǎn),通常為深綠色,病斑周圍組織褪色呈現(xiàn)黃色暈環(huán)。后斑點(diǎn)逐漸隆起,病部表面出現(xiàn)開(kāi)裂,呈海綿狀,并開(kāi)始木栓化,形成表面粗糙、灰白色或灰褐色、中心凹陷的病斑。后期病斑似“火山口”狀開(kāi)裂。病斑大小依品種而異,一般直徑在3~4mm,有時(shí)幾個(gè)病斑連合,形成不規(guī)則的
23、大病斑,嚴(yán)重時(shí)引起葉片早期脫落。,(四)癥狀特點(diǎn),柑桔潰瘍病,枝梢癥狀 夏秋梢受害嚴(yán)重,春梢受害較輕。病斑特征與葉片類似,但病斑木栓化和隆起以及病斑中部開(kāi)裂或下陷程度比葉片更明顯,枝捎上的病斑周圍無(wú)黃色暈環(huán)。幼苗及嫩梢被害后,導(dǎo)致葉片脫落,嚴(yán)重時(shí)甚至枯死。,(四)癥狀特點(diǎn),柑桔潰瘍病在枝干上的癥狀,果實(shí)癥狀 果實(shí)被害的癥狀與葉片上相似,病斑通常較葉上的大,一般直徑為4~5mm,最大的可達(dá) 12mm。病斑木栓化程度及病斑后期中部開(kāi)裂
24、或下陷狀況都比葉片顯著。病斑僅侵害果皮,很少深入到果肉部分。發(fā)生嚴(yán)重時(shí)常引起早期落果。,(四)癥狀特點(diǎn),柑桔潰瘍病在果實(shí)上的癥狀表現(xiàn),上:自右至左為發(fā)病初、中及后期癥狀。下:潛葉蠅危害造成傷口及傳播病菌加重危害,不同感病柑橘種類果實(shí)及植株癥狀,形態(tài) 短桿狀,兩端鈍圓。大小為1.5~2.0µm×0.5~0.7µm,極生單鞭毛,革蘭氏染色陰性 。培養(yǎng)性狀 在馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基上,菌落初呈鮮黃色,后轉(zhuǎn)蠟黃色
25、,圓形,表面光滑。在牛肉汁蛋白胨培養(yǎng)基上,菌落圓形,蠟黃色,表面稍隆起,粘稠狀。生長(zhǎng)條件 適溫為20~30℃,致死溫度為 55~60 ℃ 10min。在相對(duì)濕度較低的土壤表面,病菌能在落葉中存活90~100天。在潮濕的沙中則只能存活24天。病菌生長(zhǎng)發(fā)育適合pH為6.l~8.8,最適pH為6.6。,(五)病原形態(tài)與生物學(xué),遠(yuǎn)距離傳播 人為的引種,商品的流通。帶病種子、苗木、繁殖材料和果實(shí)是該病傳播的載體。田間傳播 通過(guò)風(fēng)雨、昆
26、蟲(chóng)和農(nóng)事操作等。高溫、多雨有利發(fā)病;,(六)傳播途徑,癥狀觀察 病斑周圍組織褪色呈現(xiàn)黃色暈環(huán)。病斑隆起,病部表面出現(xiàn)開(kāi)裂,呈海綿狀、木栓化,表面粗糙、灰白色或灰褐色、中心凹陷。后期病斑似“火山口”狀開(kāi)裂。細(xì)菌溢檢查在低倍鏡下觀察,病菌自植物組織逸出。,(七)檢驗(yàn)方法,分離培養(yǎng) 在缺乏典型癥狀的惰況下,可取一定數(shù)量的葉片、果實(shí)或枝梢,用蛋白胨磷酸緩沖液沖洗,洗液在室溫下孵育3h,然后用細(xì)菌過(guò)濾器濃縮,以濃縮液在人工培養(yǎng)基上劃線
27、分離,再經(jīng)酶聯(lián)或免疫熒光檢驗(yàn)。對(duì)無(wú)法確定的病斑,可取小塊病組織于0.5~2ml蒸餾水中,室溫孵育15~20min,提取液在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上劃線分離培養(yǎng),根據(jù)潰瘍病菌的菌落形態(tài)特征選取菌落。,(七)檢驗(yàn)方法,生物學(xué)檢驗(yàn),分離獲得病菌通過(guò)接種鑒定。方法為柑橘完全展開(kāi)的新葉片,用無(wú)菌水沖洗干凈后用滅菌的3號(hào)昆蟲(chóng)針在葉片背面上穿刺出小孔。滅菌濾紙片在培養(yǎng)48 h的柑橘潰瘍病菌液浸濕,敷于葉片有小孔部位,置于墊有保濕濾紙的滅菌平皿內(nèi)26℃培養(yǎng)。
28、24 h后除去濾紙片,2 d后開(kāi)始觀察葉片發(fā)病情況。,血清學(xué)檢測(cè) 制備代表性菌株的抗血清,常用檢測(cè)方法間接ELISA;斑點(diǎn)免疫(DIA-ELISA);免疫熒光試驗(yàn)(IF)。血清學(xué)檢測(cè)具有迅速準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。其它 噬菌體檢驗(yàn)、PCR等,(七)檢驗(yàn)方法,二、梨火疫病菌,學(xué)名 Erwinia amylovora(Burrill 1882) 英文病名 Fire blight分類地位 薄壁菌門(Gracilicutes)腸桿菌科(E
29、nterobacteriaceae)歐文氏菌屬(Erwinia),(一)發(fā)生簡(jiǎn)史及危險(xiǎn)性分析,發(fā)生簡(jiǎn)史1878年,Burrill 描述,以后由Erwin F. Smith命名,梨火疫病是第一個(gè)被確認(rèn)的植物細(xì)菌性病害。危險(xiǎn)性分析 是一種毀滅性細(xì)菌病害,我國(guó)列為A1類檢疫性有害生物。,最早發(fā)生于美國(guó)東北部。目前已分布在世界40多個(gè)國(guó)家。美洲的美國(guó)、加拿大、哥倫比亞、墨西哥、百慕大、危地馬拉;歐洲的阿爾巴尼亞、愛(ài)爾蘭、奧地利、比利時(shí)、保
30、加利亞、丹麥、德國(guó)、法國(guó)、荷蘭、瑞典、烏克蘭、西班牙、希臘、匈牙利、意大利、馬其頓、挪威、波蘭、捷克、羅馬尼亞、瑞士、英國(guó)、摩爾達(dá)維亞、波斯尼亞、克羅地亞、盧森堡、斯洛伐克和前南斯拉夫;大洋洲的澳大利亞和新西蘭;非洲的埃及;亞洲的亞美尼亞、伊朗、以色列、約旦、黎巴嫩、土耳其、印度、日本和塞浦路斯。,(二)境外分布,梨火疫病菌寄主范圍很廣,大部分是薔薇科仁果類植物,主要有梨、蘋果、山楂、李、草莓、枇杷、腺肋花、木瓜、火棘、薔蔽、石斑木、懸
31、鉤子、花楸、繡線菊等4O多個(gè)屬220多種植物。,(三)寄主范圍,花、果實(shí)和葉片受侵害后,很快變黑褐色枯萎,但不落葉,猶如火燒一般,故此得名。根據(jù)病害發(fā)生的部位,可分為花腐、枝枯、潰瘍及果腐等。 花腐 一般發(fā)生于早春,病菌直接從花器侵人,初為水漬狀斑,不久萎蔫。在溫暖潮濕條件下,花梗上有菌膿滲出。 潰瘍 最初是在樹(shù)皮組織上出現(xiàn)窄的水漬狀區(qū),幾天后,樹(shù)皮內(nèi)部組織出現(xiàn)褐色條斑,隨后病菌侵入附近的枝條內(nèi)部并引起萎蔫死亡。,(四)癥狀特點(diǎn)
32、,枝枯 嫩枝是除花外最感病的部位。最初癥狀是枝尖萎蔫,但不褪色,呈“牧羊鞭”狀。條件適宜時(shí),幾天內(nèi)可移動(dòng)15~30cm以上,造成整枝死亡。病枝、枝皮、葉片通常變黑色。潮濕時(shí),枝條上出現(xiàn)菌膿。果腐 引起幼果和成熟果實(shí)的腐爛,果實(shí)表面通常有菌膿或菌束。在儲(chǔ)藏期可以引起爛果。,(四)癥狀特點(diǎn),,花部被害狀,梨 火 疫 病,蘋果樹(shù)干被害狀 梨樹(shù)干細(xì)菌分泌物,枝條被害狀
33、 蘋果枝條被害早期癥狀,,側(cè)枝基部形成潰瘍斑,,蘋果幼果被害狀,Devastation by fire blight (Erwinia amylovora) of a 2-year-old high-density pear,越冬場(chǎng)所 病菌在潰瘍邊緣組織處越冬,掛在樹(shù)上的病果也是越冬場(chǎng)所。如冬季溫暖,病菌還能在病株樹(shù)皮上越冬。來(lái)年早春病菌在上年的潰瘍處迅速繁殖,遇到潮濕、溫暖的天氣,從病部滲出大量乳白色粘稠狀的細(xì)菌分泌物
34、,即為當(dāng)年的初侵染源。,(五)傳播途徑,雨水是果園短距離傳播的主要媒介,風(fēng)在中短距離傳播中亦起重要作用。病害往往沿著順風(fēng)的方向傳播。病菌亦通過(guò)傷口、自然孔口(氣孔、蜜腺、水孔)、花侵入寄主組織,有一定損傷的花、葉、幼果和茂盛的嫩枝最易感病。,(五)傳播途徑,昆蟲(chóng)和鳥(niǎo)類 對(duì)梨火疫病的傳播擴(kuò)散起一定的作用。據(jù)記載,傳病昆蟲(chóng)包括蜜蜂在內(nèi)有77個(gè)屬的100多種昆蟲(chóng),其中蜜蜂的傳病距離為 200~ 400m。梨火疫病的自然傳播距離每年約為6km
35、,但鳥(niǎo)類的傳播距離可以很遠(yuǎn),尤其是候鳥(niǎo),它們?cè)谶h(yuǎn)距離擴(kuò)散中起重要作用。遠(yuǎn)距離傳播 主要是感病寄主材料的調(diào)運(yùn),包括種苗、接穗、砧木、水果、被污染的運(yùn)輸工具等。,(五)傳播途徑,可采用多種檢驗(yàn)方法。從經(jīng)典的分離培養(yǎng)、致病性測(cè)定、癥狀觀察等到先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù),包括DNA探針、PCR技術(shù)的應(yīng)用及脂肪酸分析、單克隆抗體的應(yīng)用等。但在目前檢疫方法上仍采用血清學(xué)技術(shù)結(jié)合分離培養(yǎng)及致病性測(cè)定來(lái)確診。,(六)檢驗(yàn)方法,產(chǎn)地檢驗(yàn) 是一項(xiàng)最基本的檢驗(yàn)方
36、法,在應(yīng)檢病害的發(fā)生盛期到田間檢查與觀察,必要時(shí)須采集可疑標(biāo)本在室內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。分離培養(yǎng)對(duì)于癥狀明顯的材料可直接分離病原;分離可采用選擇性培養(yǎng)基和鑒別性培養(yǎng)基進(jìn)行。,(六)檢驗(yàn)方法,血清學(xué)檢測(cè) 間接免疫熒光抗體染色 、 ELISA法 致病性檢驗(yàn)與過(guò)敏反應(yīng)檢驗(yàn) 用梨葉片或梨嫩枝測(cè)定 核酸探針與PCR檢測(cè)技術(shù),(六)檢驗(yàn)方法,全國(guó)農(nóng)業(yè)植物檢疫性有害生物名單中的病毒種類:36 李屬壞死環(huán)斑病毒 Prunus n
37、ecrotic ringspot ilarvirus37 煙草環(huán)斑病毒 Tobacco ringspot nepovirus38 番茄斑萎病毒 Tomato spotted wilt tospovirus,第三節(jié) 植物檢疫性病毒,進(jìn)境植物檢疫一、二類危險(xiǎn)性病、蟲(chóng)和雜草名錄,一、番茄環(huán)斑病毒,學(xué)名 Tomato ring spot virus(ToRSV)異名煙草環(huán)斑病毒 2號(hào)( Toba
38、cco ring spot virus No.2)煙草病毒 13(Nicotiana virus 13) 桃黃芽花葉病毒( Peach yellow bud mosaic virus)葡萄脈黃病毒( Grape yellow vein virus)分類地位 豇豆花葉病毒科(Comoviridae),線蟲(chóng)傳多面體病毒屬(Nepovirus),主要在北美,即美國(guó)、加拿大等。此外,大洋洲的新西蘭、澳大利亞;歐洲的大部分
39、國(guó)家及亞洲的日本、土耳其等也有分布。在核果類及仁果類果樹(shù)上引起嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,是我國(guó)禁止進(jìn)境的一類檢疫性病害。,(一)境外分布及危險(xiǎn)性分析,寄主范圍很廣,包括105個(gè)屬157種以上單、雙子葉植物。自然感染的寄主有桃、杏、李、櫻桃、番茄、葡萄、草莓、大豆、煙草、胡蘿卜等果樹(shù)、經(jīng)濟(jì)作物和觀賞植物等。ToRSV是北美最嚴(yán)重的植物病毒之一。葡萄受侵染后節(jié)間縮短,莖尖叢生,葉脈黃化,坐果率低,單果變小,產(chǎn)量損失76%,嚴(yán)重感染時(shí)減產(chǎn)達(dá)95%,
40、甚至絕產(chǎn) 。,(二)寄主范圍及危害情況,葡萄以黃脈為主,葉片黃化、斑駁、褪綠環(huán)斑和卷葉,葉變小;節(jié)間縮短,頂端叢生,植株嚴(yán)重矮化;坐果率降低,果變小。,(三)癥狀特點(diǎn),ToRSV在指示植物上產(chǎn)生的急性反應(yīng):褪綠斑塊,ToRSV加利福尼亞株系誘導(dǎo)產(chǎn)生典型的脈黃癥狀,,Mottling(left) and Ringlike lesion(right) on leaf.,Stunted shoots (left) and infecte
41、d vine clusters (right) on vine.,Apple Union Necrosis and Decline,蘋果 ToRSV能夠引起蘋果接合部壞死和退化病。,Tomato Ringspot Virus引起蘋果砧/穗 接合部產(chǎn)生褐色壞死紋( Iain MacSwann, 1977),,,(三)癥狀特點(diǎn),桃樹(shù)和李屬其他樹(shù)種 桃樹(shù)最典型癥狀是莖溝。桃黃芽花葉?。捍杭拘鲁鋈~芽淡黃色,后死亡。不同種李屬植物癥狀有差異
42、,葉片表現(xiàn)不同程度的褪綠或褪色,莖出現(xiàn)凹陷和溝槽。,(三)癥狀特點(diǎn),ToRSV 在桃樹(shù)上引起的莖痘癥狀Stem pitting in peach caused by tomato ringspot virus.,復(fù)盆子 ToRSV是北美復(fù)盆子上最危險(xiǎn)的病毒。受侵染當(dāng)季不表現(xiàn)癥狀,第二年春天葉片表現(xiàn)黃色環(huán)斑、條紋或葉脈褪綠,與正常植株比較,很大比例的病株表現(xiàn)不結(jié)果或形成易碎果。,(三)癥狀特點(diǎn),Tomato ringspot virus
43、 symptoms on plants and leaves of red currants in Corvallis, Oregon,,病毒粒子為等軸對(duì)稱多面體,直徑約25 nm?;蚪M為+ssRNA, 全基因組大小為15.8 kb,其中RNA1和RNA2分別為8.5 kb和7.3 kb,外殼蛋白分子量為5.8kDa,(四)病毒特性,病毒粒子為等軸對(duì)稱多面體,直徑約25 nm。,該病毒可分為不同株系:煙草株系(tobacco st
44、rain) 自然條件下發(fā)生在煙草上;葡萄黃脈株系(grape yellow vein strain) 在自然條件下發(fā)生在葡萄上;蘋果結(jié)合部壞死株系(apple union necrosis strain) 自然條件下發(fā)生在蘋果上,引起蘋果樹(shù)結(jié)合部壞死和衰退;桃黃芽株系(peach yellow bud strain) 在自然條件下發(fā)生在扁桃、桃和杏上。,(四)病毒特性,汁液磨擦——草本寄主。嫁接——木本植物。種子和苗木調(diào)運(yùn)——
45、遠(yuǎn)距離擴(kuò)散。種傳率大豆 76%,千日紅 76%,接骨木 11%,蒲公英 24%,紅三葉草 3%~ 7%,番茄 3%。此外,番茄的花粉也能傳播 ToRSV,傳毒率為 11%。,(五)傳播途徑,介體線蟲(chóng)——木本植物。劍線蟲(chóng)屬線蟲(chóng)(Xiphinema americanum, X. rivesi和X. californicum)是ToRSV田間流行的重要介體。成蟲(chóng)和3齡幼蟲(chóng)均可傳毒;其飼毒期和傳毒期均在l h以內(nèi),線蟲(chóng)傳毒能力可保持幾周或幾
46、個(gè)月,但蛻皮后喪失傳病力。,(五)傳播途徑,生物學(xué)檢測(cè) 汁液摩擦接種草本指示植物,可表現(xiàn)不同癥狀。 昆諾藜或莧色藜上表現(xiàn)為小的局部褪綠斑和壞死斑,系統(tǒng)的頂端壞死。黃瓜(Cucumis sativas)接種葉表現(xiàn)為局部褪綠斑,后系統(tǒng)褪綠和斑駁。煙草(Nicotiana tabacum)接種葉表現(xiàn)為局部的壞死斑和壞死環(huán)斑 。,(六)檢驗(yàn)方法,(六)檢驗(yàn)方法,電鏡觀察 電鏡觀察病毒粒體形態(tài),測(cè)量粒體大小。血清學(xué)檢測(cè) ELISA和免疫電
47、鏡法。注意株系特異性!分子生物學(xué) PCR、核酸雜交 。,基本特點(diǎn)植物寄生線蟲(chóng)有207屬4832種。分類鑒定依據(jù):雌蟲(chóng)的外部形態(tài)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征,特別是消化道和生殖系統(tǒng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。傳播途徑都可以通過(guò)種苗或種薯等無(wú)性繁殖材料傳播;部分通過(guò)種子傳染,例如水稻干尖線蟲(chóng),小麥粒癭線蟲(chóng)等;松萎蔫線蟲(chóng)可通過(guò)介體昆蟲(chóng)(松褐天牛)傳播;土壤中的許多線蟲(chóng)可隨土壤傳播。,第四節(jié) 植物檢疫性線蟲(chóng),一、松材線蟲(chóng),英文名:Pine wilt dis
48、ease學(xué) 名:Bursaphelenchus xylophilus(Steiner &Buhrer,1934)Nickle,1970 ,嗜木質(zhì)傘滑刃線蟲(chóng),屬墊刃目滑刃線蟲(chóng)科。危險(xiǎn)性分析:松材線蟲(chóng)萎蔫病是一種由褐天牛傳播的森林毀滅性病害。由于它能引起植株迅速死亡,導(dǎo)致大片松林荒蕪,國(guó)內(nèi)外對(duì)它皆十分重視,是我國(guó)禁止進(jìn)境的檢疫性線蟲(chóng)。,松材線蟲(chóng)病最早于1905年在日本九州、長(zhǎng)崎及其周圍發(fā)生。目前在日本、美國(guó)、加拿大、墨西哥、韓
49、國(guó)、朝鮮、葡萄牙和我國(guó)臺(tái)灣、香港、澳門、江蘇、浙江、安徽、廣東等省發(fā)生。,(一)發(fā)生簡(jiǎn)史與分布,約1mm??卺樇?xì)長(zhǎng),14~16um,基部球明顯。中食道球卵園形、神經(jīng)環(huán)位于中食道球后;單卵巢,卵母細(xì)胞單行排列。尾圓錐形,末端寬圓,無(wú)或有小的尾尖突。,,雌蟲(chóng),(二)病原形態(tài),雄蟲(chóng)體形類似雌蟲(chóng);交合刺大,弓狀,成對(duì),尾似鳥(niǎo)爪狀,腹向彎曲,尾端有一小的端生交合傘。,(二)病原形態(tài),目前已知可危害樹(shù)種達(dá)43種,主要為松屬植物。此外,
50、還有云杉屬、冷杉屬、落葉松屬和雪松屬的一些樹(shù)木。最感病的是日本赤松、日本黑松、硫球松、歐洲赤松和歐洲黑松等。我國(guó)已知的自然高感樹(shù)種是日本黑松,也有一定數(shù)量的馬尾松(P.massoniana)自然發(fā)病。,(三)寄主范圍,幼齡樹(shù)、數(shù)十年的大樹(shù)都能發(fā)病,病情嚴(yán)重,可導(dǎo)致全林毀滅。自1982年傳入我國(guó)以來(lái),至1999年,病死木總量達(dá)1600余萬(wàn)株。給林業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)巨大損失,而且還給自然景觀及生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重破壞。,(四)危害,病株針葉變?yōu)榧t
51、褐色,而后全株迅速枯萎死亡。針葉的變色過(guò)程是由綠色經(jīng)灰、黃綠色至淡紅褐色,由局部發(fā)展至全部針葉。在適宜發(fā)病的夏季,大多數(shù)病樹(shù)從針葉開(kāi)始變色至整株死亡約30天左右。在表現(xiàn)外部癥狀以前,受侵病株的樹(shù)脂迅速減少和停止,屬相當(dāng)特異的內(nèi)部生理病變。,(五)病害癥狀特點(diǎn),松材線蟲(chóng)-Close-up of pine wilt; 1 year after death of tree,自然條件下,松墨天牛是松材線蟲(chóng)的傳播媒介。已發(fā)現(xiàn)有6種天牛能傳播松材
52、線蟲(chóng):松墨天牛、云杉墨天牛、卡羅來(lái)納墨天牛、白點(diǎn)墨天牛、南美墨天牛。其中,松墨天牛(Monochamus alternatus)是最主要的傳播媒介,它主要分布于日本、中國(guó)吉林及南朝鮮等地。墨天牛傳播松材線蟲(chóng)主要有兩種方式:一種為補(bǔ)充取食期傳播;另一種為產(chǎn)卵期傳播。前者為主要的傳播方式。人為調(diào)運(yùn)病木及其加工品,是松材線蟲(chóng)遠(yuǎn)距離傳播的唯一途徑。,(六)傳播方式,松材線蟲(chóng)介體,The nematode is vectored by spe
53、cies of Monochamus (a.k.a. sawyers or longhorned beetles).,移居性內(nèi)寄生線蟲(chóng);溫度和土壤中水分的含量與發(fā)病率有密切關(guān)系。高溫和干旱有利于該病的發(fā)生。最適溫度為20—30℃。北方和高山地區(qū)的病樹(shù)病情發(fā)展緩慢,為害不明顯。缺水加速松材線蟲(chóng)萎蔫病的病程、病樹(shù)的死亡率也提高。,(七)發(fā)生條件及發(fā)生范圍,產(chǎn)地檢疫 根據(jù)為害狀。無(wú)典型癥狀的地區(qū),查找有天牛為害的蟲(chóng)孔、碎木屑等
54、痕跡的植株,在樹(shù)干任何部位作一傷口,幾天后觀察,如傷口充滿大量的樹(shù)脂為健樹(shù),否則為可疑病樹(shù)。,(八)病原線蟲(chóng)的檢驗(yàn),在樹(shù)干、樹(shù)皮及根部取樣切成碎條,或用麻花鉆從天牛蛀孔邊上鉆取木屑,用貝爾曼法或淺盤法分離線蟲(chóng)。發(fā)現(xiàn)線蟲(chóng)則制成臨時(shí)玻片,在顯微鏡下進(jìn)一步鑒定。如發(fā)現(xiàn)幼蟲(chóng),可用灰葡萄孢霉Botrytis cinerea等真菌飼喂,待獲得成蟲(chóng)后再作鑒定。,(八)病原線蟲(chóng)的檢驗(yàn),檢測(cè)時(shí),要注意和一個(gè)近似種擬松材線蟲(chóng)(B.mucronotus)的
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