寶鋼廢氣生物處理塔中微生物群落的分子生態(tài)學(xué)研究.pdf

1、隨著環(huán)境科學(xué)的發(fā)展,對環(huán)境微生物群落的分析越來越重要.由于傳統(tǒng)的基于培養(yǎng)的微生物分析方法存在缺陷,不能滿足環(huán)境分析的要求;近年來發(fā)展起來的分子生態(tài)技術(shù)可以較好的解決傳統(tǒng)方法的缺陷.該研究利用分子生態(tài)學(xué)技術(shù)分析了寶鋼廢氣生物處理塔中微生物群落的生物多樣性和部分微生物的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系.通過實(shí)驗(yàn)得到的主要研究結(jié)論如下:1.通過三種總DNA提取方法的對比,確定了一種操作簡便、不需要購置專用設(shè)備的總DNA提取的化學(xué)方法;并用此方法提取了苯塔、酚塔和

2、吡啶塔樣品的總DNA,所得總DNA可以滿足環(huán)境微生物群落分析的要求.2.根據(jù)PCR原理和樣品的特點(diǎn),探討得出了合適的PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)程序;運(yùn)用此條件對寶鋼廢氣生物處理塔中的樣品進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,所有樣品都得到了250bp左右的特定DNA片段,此結(jié)果的片段大小和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果相吻合;此條件PCR擴(kuò)增的產(chǎn)量能夠滿足DGGE分析的要求;實(shí)驗(yàn)中還解決了PCR擴(kuò)增污染的問題.3.利用DGGE分離技術(shù),對PCR擴(kuò)增得到的各樣品的特定DNA片段進(jìn)行

3、了分離,在各個(gè)樣品中都可以分離出三十條以上的單一條帶,初步得出了生物塔中的微生物群落的生物多樣性和微生物的大致數(shù)量比例關(guān)系;通過同一生物塔中不同位置和不同時(shí)間的微生物群落的變化情況初步分析了外界條件對微生物群落結(jié)構(gòu)的影響.4.對DGGE分離的部分單一DNA條帶進(jìn)行了測序,利用Blast軟件對測序結(jié)果在GenBank數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行了同源性對比,所得結(jié)果大部分為不可培養(yǎng)微生物,這是傳統(tǒng)方法分離不到的微生物;利用BioEdit軟件對各生物塔測序