Integrin激活c-Src的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究.pdf

1、c-Src基因是發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)原癌基因。c-Src蛋白參與細(xì)胞內(nèi)很多重要的信號(hào)通路,如細(xì)胞增殖,細(xì)胞分化,細(xì)胞凋亡,細(xì)胞粘附和細(xì)胞迀移。c-Src的功能異?；虍惓；罨瘯?huì)導(dǎo)致骨硬化癥、血栓、癌癥。因此,c-Src成為一個(gè)十分重要的藥物靶點(diǎn),很多c-Src的抑制劑已經(jīng)應(yīng)用在前臨床或臨床實(shí)驗(yàn)中。整合素P3亞單位和c-S rc的活化相關(guān)聯(lián)。P3的胞內(nèi)段的末端三個(gè)氨基酸RGT與c-Src的SH3直接結(jié)合,激活c-Src以及下游信號(hào)通路傳導(dǎo)。蛋白結(jié)構(gòu)

2、是蛋白功能的基礎(chǔ)。P3和c-Src之間的相互作用,與它們的結(jié)構(gòu)是分不開(kāi)的。雖然P3、c-S r c的晶體結(jié)構(gòu)已有報(bào)道,然而,由于P3和c-Src之間相互作用的結(jié)構(gòu)信息的缺失,P3如何通過(guò)RGT:SH3之間的相互作用來(lái)激活c-Src的機(jī)制,仍然是需要回答的問(wèn)題。
　　本文從RGT:SH3復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)研究開(kāi)始入手,利用X衍射晶體學(xué)的方法,成功解析了復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)。從晶體結(jié)構(gòu)中,找到了RGT與SH3的結(jié)合方式和結(jié)合位點(diǎn)。RGT與S

3、H3的結(jié)合是以一種非經(jīng)典的多肽和SH3結(jié)合的方式。結(jié)合位點(diǎn)處于SH3的“N”-Src loop上,正好位于SH3、linker、catalytic domain所結(jié)合的“拉鏈”的開(kāi)口處。我們推測(cè),RGT與SH3的結(jié)合打破了原有三者之間作用力的平衡,啟動(dòng)了c-Src活化的第一步。在晶體結(jié)構(gòu)所提供的信息的基礎(chǔ)上,我們?cè)隗w外蛋白相互作用的實(shí)驗(yàn)、酶活性實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)細(xì)胞伸展實(shí)驗(yàn)上進(jìn)行了晶體結(jié)構(gòu)模型的驗(yàn)證。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果與解析的晶體結(jié)構(gòu)所顯示信息一致。