不同濃度RANKL對(duì)破骨細(xì)胞中NFATcL,c-Src和RANK基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的:體外實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度核因子κB受體活化因子配體(RANKL)對(duì)大鼠破骨細(xì)胞活化T細(xì)胞核因子1(NFATc1)、原癌基因c-Src、核因子κB受體活化因子(RANK)mRNA表達(dá)的影響;研究破骨細(xì)胞中活化T細(xì)胞核因子1、原癌基因c-src和核因子κB受體活化因子在骨質(zhì)疏松中的發(fā)病過(guò)程中基因的表達(dá)是否與核因子κB受體活化因子配體的濃度存在相關(guān)性。
　　方法:實(shí)驗(yàn)采用5周齡SD大鼠獲取骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSC)，加入集落刺激因子(M

2、-CSF)及RANKL體外誘導(dǎo)培養(yǎng)破骨細(xì)胞，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每組分別加入低、中、高(50ng/ml、75ng/ml、100ng/ml)3種濃度的RANKL及均加入M-CSF(25ng/ml)，實(shí)驗(yàn)對(duì)照組加入RANKL(0ng/ml)及M-CSF(25ng/ml);培養(yǎng)7天后，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)NFATc1、c-Src、RANKmRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:NFATc1、c-Src、RANK基因表達(dá)與RANKL的濃度呈依賴性，與

3、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組M-CSF(25ng/ml)+RANKL(0ng/ml)組相比，中、高濃度的RANKL均促進(jìn)了NFATc1及c-SrcmRNA（p＜0.01，p＜0.01）的表達(dá);與M-CSF(25ng/ml)+RANKL(0ng/ml)組相比，低、中、高濃度的RANKL均促進(jìn)了RANKmRNA（p＜0.01，p＜0.01和p＜0.01）的表達(dá);與M-CSF(25ng/ml)+RANKL(50ng/ml)組相比，中、高濃度的RANKL均促進(jìn)了

4、NFATc1mRNA（p=0.013，p＜0.01）的表達(dá);與M-CSF(25ng/ml)+RANKL(50ng/ml)組相比，中、高濃度的RANKL促進(jìn)了c-SrcmRNA（p＜0.01，p＜0.01）的表達(dá);與M-CSF(25ng/ml)+RANKL(75ng/ml)組相比，高濃度的RANKL均促進(jìn)了NFATc1，c-Src和RANK(p＜0.01，p＜0.01和p＜0.01)的基因表達(dá)。
　　結(jié)論:RANKL可通過(guò)促進(jìn)了NF