異黃酮類抗氧劑與DNA相互作用的光譜與電化學研究.pdf

1、DNA（脫氧核糖核酸）是生物體內(nèi)生命信息傳遞的物質基礎，是生物遺傳信息的攜帶者，對物種的生存以及生態(tài)環(huán)境的安全有著極其重要的意義。小分子與DNA的作用，會影響DNA的結構以及生理功能，甚至改變DNA的復制和轉錄，因此，關于小分子與DNA的作用方式和作用機理的研究，在探索藥物的藥代動力學特征、開發(fā)新的核酸探針方面具有重要的意義，同時也為設計以DNA為作用靶標的藥物分子、藥物篩選提供理論指導。本文主要以毛蕊異黃酮（CYS）和刺芒柄花素（FN

2、）為研究對象，初步探討了兩種異黃酮類抗氧劑與DNA的相互作用。本論文的主要內(nèi)容包括：
　　1.采用光譜法和電化學方法研究了毛蕊異黃酮與DNA的作用。CYS與DNA作用后的紫外-可見吸收光譜，表現(xiàn)出一定的減色效應，其熒光光譜則表現(xiàn)出增色效應，表明兩者能夠發(fā)生相互作用。電化學研究表明在pH4.4的HAc-NaAc緩沖溶液中，CYS在金電極上有一對氧化還原峰，CYS的氧化峰電流與其濃度在0.35~7.04μmol/L和7.04~70.3

3、6μmol/L的濃度范圍內(nèi)，呈良好的線性關系。線性方程分別為：CYS與DNA作用后，CYS的氧化峰電流顯著減小，峰電位發(fā)生正移。根據(jù)DNA加入前后，峰電流及峰電位的變化，計算了CYS與DNA相互作用前后的動力學參數(shù)，如電子轉移數(shù)（n）、電子轉移系數(shù)（α）、電極反應標準速率常數(shù)(ks)以及兩者相互作用的結合比（m）和結合常數(shù)（β）。
　　2.首次研究了刺芒柄花素（ FN）在聚 L-半胱氨酸修飾的玻碳電極（PLC/GCE）上的電化學行

4、為，發(fā)現(xiàn)FN在裸玻碳電極（GCE）上不能產(chǎn)生明顯的氧化還原信號，但在PLC/GCE上有一對準可逆氧化還原峰，說明該修飾電極對刺芒柄花素有良好的催化效果。實驗探討了聚合電位、聚合掃描圈數(shù)、支持電解質種類及酸度、掃描速度等對刺芒柄花素電化學信號的影響；利用差分脈沖伏安法（DPV）測定了FN的線性范圍。結果表明，ipa與CFN在0.75~60μmol/L的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關系，其線性回歸方程為：ipa(μA)=0.1118+0.0039

5、 CFN(μmol/L)，r=0.999。在最佳實驗條件下，采用光譜法和電化學方法研究了刺芒柄花素與DNA的相互作用。發(fā)現(xiàn)FN與DNA作用后的紫外-可見吸收光譜，表現(xiàn)出一定的減色效應，而其熒光光譜則表現(xiàn)出增色效應，表明兩者能夠發(fā)生相互作用；電化學結果顯示，F(xiàn)N與DNA作用后，F(xiàn)N的氧化峰電流明顯減小，且峰電位發(fā)生正移；可知刺芒柄花素通過嵌插作用與DNA結合，根據(jù)DNA加入前后，刺芒柄花素氧化峰電流和峰電位的變化，計算出FN與DNA相互作