黃酮類活性成分與血清白蛋白相互作用的研究.pdf

1、本論文運(yùn)用熒光猝滅光譜、紫外-吸收可見(jiàn)光譜、紅外光譜等多光譜分析手段,從分子水平上研究了四種結(jié)構(gòu)相近的黃酮類小分子與牛血清白蛋白(BSA)在模擬生理?xiàng)l件下的相互作用.通過(guò)對(duì)結(jié)合作用過(guò)程各結(jié)合參數(shù)的研究討論,對(duì)比了不同黃酮與BSA結(jié)合作用的光譜特征,對(duì)黃酮類活性成分在體內(nèi)運(yùn)輸與代謝、藥物分子設(shè)計(jì)和功能性食品研發(fā)等有重要意義.
　　本論文共分為以下四部分:
　　1.第一章綜述了血清白蛋白的分子結(jié)構(gòu)、植物黃酮的分類和主要生理功能、

2、大分子與小分子結(jié)合的相關(guān)背景知識(shí)和常用研究方法,并介紹了目前該領(lǐng)域的研究進(jìn)展和一些尚待解決的問(wèn)題.
　　2.第二章討論了實(shí)驗(yàn)操作方式對(duì)大分子與小分子結(jié)合熒光猝滅體系的影響,并研究了模擬生理環(huán)境下槲皮素與BSA相互作用的光譜特征.求得了不同溫度下的猝滅常數(shù)和結(jié)合常數(shù),證明在本實(shí)驗(yàn)條件下,槲皮素與BSA的相互作用為單一的靜態(tài)猝滅.求得槲皮素在BSA上結(jié)合位置與212位色氨酸的結(jié)合距離為1.783 nm.由求得的熱力學(xué)參數(shù),證明槲皮素與

3、BSA之間的主導(dǎo)作用力為靜電引力.同步熒光光譜和紅外光譜結(jié)果分別表明槲皮素對(duì)BSA的二級(jí)結(jié)構(gòu)有一定影響.金屬離子實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)于不同結(jié)合參數(shù),不同金屬離子的影響程度是不同的.
　　3.第三章通過(guò)紫外-可見(jiàn)吸收光譜、熒光猝滅法、同步熒光法和紅外光譜法研究了木犀草素、橙皮素和牛血清白蛋白的結(jié)合作用過(guò)程.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,初步判斷木犀草素與牛血清白蛋白的作用屬于動(dòng)態(tài)猝滅和靜態(tài)猝滅并存的混合猝滅,橙皮素與與牛血清白蛋白的作用屬于動(dòng)態(tài)猝滅,且

4、木犀草素對(duì)牛血清白蛋白的內(nèi)源熒光的猝滅程度明顯高于橙皮素.熱力學(xué)參數(shù)計(jì)算結(jié)果表明,橙皮素、木犀草素和BSA之間都存在靜電引力.同步熒光光譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明木犀草素和橙皮素與 BSA結(jié)合的位點(diǎn)可能在色氨酸殘基附近.紫外-可見(jiàn)吸收光譜結(jié)果表明 BSA可以與木犀草素、橙皮素發(fā)生相互作用,且對(duì)BSA結(jié)構(gòu)改變情況不同,紅外光譜結(jié)果進(jìn)一步說(shuō)明木犀草素、橙皮素對(duì)BSA二級(jí)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了不同影響.
　　4.第四章研究了生理濃度下Ca2+,K+,Cu2+,

5、Mg2+,Fe3+這5種金屬離子對(duì)芹菜素-BSA體系Ksv，Ka和n的影響,發(fā)現(xiàn)Mg2+影響最大.選擇pH值、NaCl濃度、Mg2+濃度為單因素,研究了在實(shí)驗(yàn)水平范圍內(nèi)Ksv、Ka和n的值與pH值、NaCl濃度、Mg2+濃度的關(guān)系.通過(guò)響應(yīng)面法實(shí)驗(yàn),得到了Ksv、Ka和n與pH值、NaCl濃度、Mg2+濃度的多元二次回歸方程.在實(shí)驗(yàn)研究的因素水平范圍內(nèi),通過(guò)響應(yīng)面分析得出:對(duì)于Ksv、Ka的值,NaCl濃度的影響最大;對(duì)于n值,pH值的