不同來(lái)源黨參成分含量測(cè)定及黨參HPLC特征圖譜研究.pdf

1、目的：
　　黨參（Codonopsis Radix）為中醫(yī)治病常用的補(bǔ)中益氣良藥。2010版《中國(guó)藥典》規(guī)定，黨參來(lái)源于Codonopsis pilosula(Franch.) Nannf.、素花黨參Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nannf.) L.T.Shen.或川黨參Codonopsis tangshen Oliv.[1]，栽培歷史悠久，目前市面上多為栽培品。由于黨參種植范圍廣，產(chǎn)

2、地自然環(huán)境、栽培加工方式等不同，黨參藥材質(zhì)量參差不齊。藥典還對(duì)黨參的性狀鑒別、顯微鑒別、黨參炔苷TLC鑒別和浸出物等檢查項(xiàng)做了規(guī)定。產(chǎn)于山西古潞州（今長(zhǎng)治市、晉城市等地）的黨參統(tǒng)稱為“潞黨參”。潞黨參是著名的山西省道地藥材，質(zhì)量上乘，栽培歷史悠久。有關(guān)黨參的各地方標(biāo)準(zhǔn)及不同基源黨參鑒別的文獻(xiàn)報(bào)道，多性狀鑒別和顯微鑒別項(xiàng)。因此，在現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上，以高效液相色譜指紋圖譜入手，為進(jìn)一步完善潞黨參地方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供方法技術(shù)，為黨參（潞黨參）標(biāo)

3、準(zhǔn)制訂和質(zhì)量控制提供方法，同時(shí)為不同基源黨參鑒別、黨參藥材生產(chǎn)加工等提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　采用反相高效液相色譜法（RP-HPLC色譜法），測(cè)定74批次黨參藥材中主要成分黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯III的含量，并比較差異；通過(guò)RP-HPLC色譜法，研究三種基源的54批次黨參藥材的HPLC特征圖譜，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件（2.0版）進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，比較潞黨參與其他來(lái)源黨參特征圖譜的差異；潞黨參甲醇超聲提取物經(jīng)D10

4、1大孔樹(shù)脂、ODS柱層析等反復(fù)分離純化后，得到8個(gè)化合物，通過(guò)質(zhì)譜、核磁共振氫譜和碳譜等光譜學(xué)方法檢測(cè)及查閱相關(guān)等，確定化合物分子結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果：
　　1、不同來(lái)源黨參成分含量測(cè)定
　　不同來(lái)源黨參樣品含量差異明顯。不同基源黨參，均可檢測(cè)到黨參炔苷，部分可檢測(cè)到蒼術(shù)內(nèi)酯III。潞黨參中黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯III含量分別為0.356mg·g-1和0.035mg·g-1，含量較高，品質(zhì)較好，但噴施壯根靈后，兩種成分均顯著降

5、低。素花黨參中10年生鳳黨含量最高，為2.236 mg·g-1，其次為紋黨（3~4年生），顯著高于其他產(chǎn)地、基源黨參，推測(cè)生長(zhǎng)年限對(duì)黨參炔苷含量影響較大。而蒼術(shù)內(nèi)酯III，在基源為黨參的野生臺(tái)黨中含量最高，為0.174 mg·g-1，潞黨參次之，為0.035 mg·g-1，顯著高于同基源白條黨，川黨參未檢測(cè)到，素花黨參中含量較低或檢測(cè)不到，認(rèn)為基源對(duì)蒼術(shù)內(nèi)酯III含量影響最大，可將蒼術(shù)內(nèi)酯III作為反映潞黨參道地性的特征成分。結(jié)果表明，

6、潞黨參品質(zhì)好，具有道地性。
　　2、不同來(lái)源黨參HPLC特征圖譜研究
　　2.1潞黨參HPLC特征圖譜
　　通過(guò)對(duì)20批次潞黨參的特征圖譜進(jìn)行匹配，建立了潞黨參對(duì)照藥材的 HPLC特征圖譜，將5號(hào)峰（黨參炔苷）作為參照峰，確定7個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間，分別為：0.195（峰1）、0.323（峰2）、0.443（峰3）、0.616（峰4）、1.00（峰5）、1.01（峰6）、1.36（峰7）。
　　將codonop

7、yrrolidium B、黨參苷I、黨參炔苷、紫丁香苷和蒼術(shù)內(nèi)酯III通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品加入法，指認(rèn)了HPLC特征圖譜中的5個(gè)特征峰分別為：1號(hào)峰—codonopyrrolidium B、2號(hào)峰—紫丁香苷，4號(hào)峰—黨參苷I，5號(hào)峰—黨參炔苷，7號(hào)峰—蒼術(shù)內(nèi)酯III。
　　2.2不同來(lái)源黨參HPLC特征圖譜相似度比較
　　通過(guò)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件（2.0版）對(duì)54批次不同來(lái)源黨參HPLC特征圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，潞黨

8、參與臺(tái)黨相似度最高在0.8以上，與白條黨相似度為0.4~0.8，不同產(chǎn)地白條黨之間相似度差異明顯；與素花黨參和川黨參的相似度僅為0.1~0.4。表明黨參基源差異大于產(chǎn)地差異，不同來(lái)源黨參質(zhì)量存在明顯差異。
　　2.3潞黨參與其他來(lái)源黨參HPLC特征圖譜比較
　　相同基源黨參比較。潞黨參與白條黨和臺(tái)黨，基源植物相同，均為黨參。白條黨HPLC特征圖譜中7個(gè)峰面積均值顯著低于潞黨參，尤其是1號(hào)（codonopyrrolidium

9、B）、4號(hào)（黨參苷I）、6號(hào)和7號(hào)峰（蒼術(shù)內(nèi)酯III），而且相對(duì)峰面積顯著區(qū)別于潞黨參；與臺(tái)黨差異主要為野生黨參未檢測(cè)到6號(hào)峰，1號(hào)（codonopyrrolidium B）、3號(hào)、7號(hào)（蒼術(shù)內(nèi)酯III）峰面積均值顯著高于潞黨參。
　　不同基源黨參比較，川黨參HPLC特征圖譜中，未檢測(cè)到6號(hào)和7號(hào)峰（蒼術(shù)內(nèi)酯III），1號(hào)（codonopyrrolidium B）、3號(hào)和4號(hào)（黨參苷I）峰的峰面積均值顯著低于潞黨參，相對(duì)峰面積差異

10、顯著。素花黨參HPLC特征圖譜均未檢測(cè)到6號(hào)峰，1號(hào)（codonopyrrolidium B）、4號(hào)（黨參苷I）和7號(hào)（蒼術(shù)內(nèi)酯III）峰面積均值顯著低于潞黨參，相對(duì)峰面積差異顯著，但2號(hào)（紫丁香苷）和5號(hào)（黨參炔苷）峰的峰面積均值高于潞黨參。
　　2.4不同栽培與加工處理方式黨參比較
　　噴施壯根靈后，黨參HPLC特征圖譜發(fā)生顯著變化，相似度降低；不同采收年限黨參HPLC特征圖譜比較，4號(hào)（黨參苷I）、6號(hào)和7號(hào)（蒼術(shù)內(nèi)酯

11、III）峰差異明顯；生長(zhǎng)年限較長(zhǎng)的黨參中未檢測(cè)到6號(hào)峰。熏硫后黨參與白條黨相似度僅為0.4～0.5，特征圖譜中，僅主要檢測(cè)到2號(hào)（紫丁香苷）、4號(hào)（黨參苷I）和5號(hào)（黨參炔苷）峰，峰面積顯著低于潞黨參。
　　3、黨參特征性成分的分離鑒定
　　潞黨參中分離確定3個(gè)化合物結(jié)構(gòu)分別為codonopyrrolidium B、黨參苷I、黨參炔苷，和5個(gè)疑似成分為三個(gè)寡糖和β-槐糖正己醇苷、9,10,13-三羥基-反-11-十八烯酸。c

12、odonopyrrolidium B在潞黨參中首次分離到。
　　結(jié)論：
　　潞黨參中黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯III含量較高，質(zhì)量好，具有道地性。黨參因基源、產(chǎn)地和栽培、加工處理方式的不同，特征圖譜有明顯差異；不同基源、產(chǎn)地黨參HPLC特征圖譜差異明顯，潞黨參比川黨參多檢測(cè)到6號(hào)和7號(hào)（蒼術(shù)內(nèi)酯III）峰，比素花黨參多未檢測(cè)到6號(hào)峰，比白條黨峰面積高；而且，潞黨參中4號(hào)峰（黨參苷I）峰面積最高，均可檢測(cè)到6號(hào)和7號(hào)峰（蒼術(shù)內(nèi)酯III