不同來源黨參成分含量測定及黨參HPLC特征圖譜研究.pdf

1、目的：
　　黨參（Codonopsis Radix）為中醫(yī)治病常用的補中益氣良藥。2010版《中國藥典》規(guī)定，黨參來源于Codonopsis pilosula(Franch.) Nannf.、素花黨參Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nannf.) L.T.Shen.或川黨參Codonopsis tangshen Oliv.[1]，栽培歷史悠久，目前市面上多為栽培品。由于黨參種植范圍廣，產

2、地自然環(huán)境、栽培加工方式等不同，黨參藥材質量參差不齊。藥典還對黨參的性狀鑒別、顯微鑒別、黨參炔苷TLC鑒別和浸出物等檢查項做了規(guī)定。產于山西古潞州（今長治市、晉城市等地）的黨參統(tǒng)稱為“潞黨參”。潞黨參是著名的山西省道地藥材，質量上乘，栽培歷史悠久。有關黨參的各地方標準及不同基源黨參鑒別的文獻報道，多性狀鑒別和顯微鑒別項。因此，在現(xiàn)有質量標準基礎上，以高效液相色譜指紋圖譜入手，為進一步完善潞黨參地方質量標準提供方法技術，為黨參（潞黨參）標

3、準制訂和質量控制提供方法，同時為不同基源黨參鑒別、黨參藥材生產加工等提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　采用反相高效液相色譜法（RP-HPLC色譜法），測定74批次黨參藥材中主要成分黨參炔苷和蒼術內酯III的含量，并比較差異；通過RP-HPLC色譜法，研究三種基源的54批次黨參藥材的HPLC特征圖譜，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件（2.0版）進行相似度評價，比較潞黨參與其他來源黨參特征圖譜的差異；潞黨參甲醇超聲提取物經D10

4、1大孔樹脂、ODS柱層析等反復分離純化后，得到8個化合物，通過質譜、核磁共振氫譜和碳譜等光譜學方法檢測及查閱相關等，確定化合物分子結構。
　　結果：
　　1、不同來源黨參成分含量測定
　　不同來源黨參樣品含量差異明顯。不同基源黨參，均可檢測到黨參炔苷，部分可檢測到蒼術內酯III。潞黨參中黨參炔苷和蒼術內酯III含量分別為0.356mg·g-1和0.035mg·g-1，含量較高，品質較好，但噴施壯根靈后，兩種成分均顯著降

5、低。素花黨參中10年生鳳黨含量最高，為2.236 mg·g-1，其次為紋黨（3~4年生），顯著高于其他產地、基源黨參，推測生長年限對黨參炔苷含量影響較大。而蒼術內酯III，在基源為黨參的野生臺黨中含量最高，為0.174 mg·g-1，潞黨參次之，為0.035 mg·g-1，顯著高于同基源白條黨，川黨參未檢測到，素花黨參中含量較低或檢測不到，認為基源對蒼術內酯III含量影響最大，可將蒼術內酯III作為反映潞黨參道地性的特征成分。結果表明，

6、潞黨參品質好，具有道地性。
　　2、不同來源黨參HPLC特征圖譜研究
　　2.1潞黨參HPLC特征圖譜
　　通過對20批次潞黨參的特征圖譜進行匹配，建立了潞黨參對照藥材的 HPLC特征圖譜，將5號峰（黨參炔苷）作為參照峰，確定7個特征峰的相對保留時間，分別為：0.195（峰1）、0.323（峰2）、0.443（峰3）、0.616（峰4）、1.00（峰5）、1.01（峰6）、1.36（峰7）。
　　將codonop

7、yrrolidium B、黨參苷I、黨參炔苷、紫丁香苷和蒼術內酯III通過標準品加入法，指認了HPLC特征圖譜中的5個特征峰分別為：1號峰—codonopyrrolidium B、2號峰—紫丁香苷，4號峰—黨參苷I，5號峰—黨參炔苷，7號峰—蒼術內酯III。
　　2.2不同來源黨參HPLC特征圖譜相似度比較
　　通過中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件（2.0版）對54批次不同來源黨參HPLC特征圖譜進行相似度評價，結果顯示，潞黨

8、參與臺黨相似度最高在0.8以上，與白條黨相似度為0.4~0.8，不同產地白條黨之間相似度差異明顯；與素花黨參和川黨參的相似度僅為0.1~0.4。表明黨參基源差異大于產地差異，不同來源黨參質量存在明顯差異。
　　2.3潞黨參與其他來源黨參HPLC特征圖譜比較
　　相同基源黨參比較。潞黨參與白條黨和臺黨，基源植物相同，均為黨參。白條黨HPLC特征圖譜中7個峰面積均值顯著低于潞黨參，尤其是1號（codonopyrrolidium

9、B）、4號（黨參苷I）、6號和7號峰（蒼術內酯III），而且相對峰面積顯著區(qū)別于潞黨參；與臺黨差異主要為野生黨參未檢測到6號峰，1號（codonopyrrolidium B）、3號、7號（蒼術內酯III）峰面積均值顯著高于潞黨參。
　　不同基源黨參比較，川黨參HPLC特征圖譜中，未檢測到6號和7號峰（蒼術內酯III），1號（codonopyrrolidium B）、3號和4號（黨參苷I）峰的峰面積均值顯著低于潞黨參，相對峰面積差異

10、顯著。素花黨參HPLC特征圖譜均未檢測到6號峰，1號（codonopyrrolidium B）、4號（黨參苷I）和7號（蒼術內酯III）峰面積均值顯著低于潞黨參，相對峰面積差異顯著，但2號（紫丁香苷）和5號（黨參炔苷）峰的峰面積均值高于潞黨參。
　　2.4不同栽培與加工處理方式黨參比較
　　噴施壯根靈后，黨參HPLC特征圖譜發(fā)生顯著變化，相似度降低；不同采收年限黨參HPLC特征圖譜比較，4號（黨參苷I）、6號和7號（蒼術內酯

11、III）峰差異明顯；生長年限較長的黨參中未檢測到6號峰。熏硫后黨參與白條黨相似度僅為0.4～0.5，特征圖譜中，僅主要檢測到2號（紫丁香苷）、4號（黨參苷I）和5號（黨參炔苷）峰，峰面積顯著低于潞黨參。
　　3、黨參特征性成分的分離鑒定
　　潞黨參中分離確定3個化合物結構分別為codonopyrrolidium B、黨參苷I、黨參炔苷，和5個疑似成分為三個寡糖和β-槐糖正己醇苷、9,10,13-三羥基-反-11-十八烯酸。c

12、odonopyrrolidium B在潞黨參中首次分離到。
　　結論：
　　潞黨參中黨參炔苷和蒼術內酯III含量較高，質量好，具有道地性。黨參因基源、產地和栽培、加工處理方式的不同，特征圖譜有明顯差異；不同基源、產地黨參HPLC特征圖譜差異明顯，潞黨參比川黨參多檢測到6號和7號（蒼術內酯III）峰，比素花黨參多未檢測到6號峰，比白條黨峰面積高；而且，潞黨參中4號峰（黨參苷I）峰面積最高，均可檢測到6號和7號峰（蒼術內酯III