基于微電極陣列的異源細胞電融合和融合信號發(fā)生器的初步研究.pdf

1、細胞電融合是指在離體環(huán)境下，通過電刺激作用促使兩個或多個細胞或原生質(zhì)體相互接觸進而發(fā)生融合，形成單核或多核的雜核細胞的過程。融合后細胞同時具有兩個或多個親本細胞的遺傳特性，可以培養(yǎng)出新的細胞工程產(chǎn)品，特別是在單克隆抗體和抗腫瘤疫苗制備，動植物遠緣雜交育種等方面具有十分重要的意義。細胞電融合技術具有操作精確可控、融合效率高、細胞需求量低等優(yōu)勢。但是傳統(tǒng)的電融合方法采用平板電極，電極間距寬，融合信號電壓高，信號發(fā)生裝置要求能產(chǎn)生高壓電信號，

2、制作困難、成本高。基于微電極陣列的微流控細胞電融合芯片可大大降低驅(qū)動電壓和電信號發(fā)生器的制作難度，同時能實現(xiàn)高通量的細胞電融合，提高融合效率。
　　課題組前期主要針對芯片的設計、制作和同源細胞的融合開展了大量研究。為了擴大實用性，我們在異源細胞的電融合實驗方面開展了探索性研究，摸索合適的融合參數(shù)。實驗中，研究分析異源動物細胞的排隊和融合，并通過熒光標記的方法使融合效果的觀察更加清晰可靠。在此基礎上，計算出異源細胞的排隊率和融合率，

3、同時，對融合后細胞進行染色體組型鑒定和篩選。實驗結(jié)果表明，低電壓驅(qū)動下異源細胞的電融合是可實現(xiàn)的，融合后的細胞可以繼續(xù)培養(yǎng)和生長，融合效率大大高于傳統(tǒng)方法。該研究的參數(shù)可作為低壓的電融合控制信號發(fā)生器的重要參考，將電融合信號電壓從傳統(tǒng)的幾百伏降至幾十伏。前期研究工作表明，在芯片上的電融合過程中，細胞受介電電泳力的作用在芯片上排隊；然后在單極性窄脈沖作用下，細胞產(chǎn)生可逆的電穿孔；最后在介電電泳力的作用下，穿孔細胞進一步實現(xiàn)物質(zhì)交換，完成電