燈盞花素注射劑對大鼠腦缺血再灌注損傷的影響及microRNA和CYP介導(dǎo)的機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究燈盞花素注射劑對大鼠腦缺血再灌注損傷的影響，通過氧化應(yīng)激、microRNA、CYP介導(dǎo)的途徑研究其作用機(jī)制。
　　方法：
　?。?）燈盞花素注射劑對大鼠腦缺血再灌注損傷microRNA的影響：取SPF級雄性SD大鼠47只，體重240～300g，隨機(jī)分為5組，假手術(shù)組（shame）7只，模型組（model）10只、高劑量組（Bre12mg·kg-1）10只、中劑量組（Bre6mg·kg-1）10只和低劑量組（Bre3

2、mg·kg-1）10只，采用MCAO法建立模型，在腦缺血2h，再灌注術(shù)后立即給藥，每天1次尾靜脈給予高、中、低劑量的燈盞花素注射劑，假手術(shù)組給予等體積的生理鹽水，連續(xù)給藥7d，觀察藥物對于大鼠行為學(xué)評分、死亡率、大鼠血清microRNA-27a-3p、-9-5p、-153-5p、B淋巴細(xì)胞瘤2（Bcl-2）的表達(dá)和大鼠白介素10（IL-10）的含量、大鼠腦組織microRNA-27a-3p、-9-5p、-153-5p、-181a-5p、

3、-93-5p、-335、-20a-5p、-290以及相關(guān)靶點(diǎn)缺氧誘導(dǎo)因子1α（Hif-1α）、Bcl-2的表達(dá)、IL-10、大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）的含量。
　　（2）燈盞花素注射劑對大鼠腦缺血再灌注損傷CYP的影響：動物數(shù)量、分組、造模方法、給藥劑量與給藥時(shí)間窗均與（1）相同，觀察大鼠腦組織CYP4A1、4A3、4A8、4F4的mRNA表達(dá)和大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）的含量。
　　（3）燈盞花素注射劑對大鼠

4、腦缺血再灌注損傷抗氧化應(yīng)激的影響：取SPF級雄性SD大鼠146只，體重240～300g，隨機(jī)分為5組，假手術(shù)組（shame）20只、模型組（model）40只、高劑量組（Bre12mg·kg-1）26只、中劑量組（Bre6mg·kg-1）30只和低劑量組（Bre3mg·kg-1）30只。造模方法、給藥劑量與給藥時(shí)間窗均與（1）相同，觀察3種劑量的同種藥物對于大鼠行為學(xué)評分、腦梗死體積、死亡率、血清及右腦腦組織超氧化物歧化酶（SOD）、黃

5、嘌呤氧化酶（XOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）、原生型一氧化氮合酶（TNOS）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、谷胱甘肽還原酶（GR）的測定。
　　結(jié)果：
　　（1）高劑量組和中劑量組可降低大鼠24h（P<0.01）（P<0.05）、48h（P<0.01）、72h（P<0.01）、96h（P<0.01）、120h（P<0.01）、1

6、44h（P<0.01）（P<0.05）、168h（P<0.01）行為學(xué)評分以及168h死亡率。高劑量組可明顯上調(diào)大鼠腦組織rno-miR-290（P<0.05）、-335（P<0.05）的表達(dá)及血清和腦組織中IL-10（P<0.01）的含量，并顯著減少TNF-α（P<0.01）的含量；中劑量組對大鼠腦組織microRNA的表達(dá)均無明顯影響，但增加血清IL-10（P<0.01）的含量和Bcl-2（P<0.01）的表達(dá)，并明顯減少TNF-α

7、（P<0.01）的含量；低劑量組可顯著下調(diào)大鼠腦組織rno-miR-153-5p（P<0.05）的表達(dá)以及減少TNF-α（P<0.05）的含量、上調(diào)血清Bcl-2（P<0.01）的表達(dá)，但對大鼠腦組織rno-miR-9-5p、-27a-3p、-181a-5p、20a-3p、-290、-335、-93-5p、Bcl-2、Hif-1α的表達(dá)以及血清rno-miR-9-5p、-27a-3p、-153-5p的表達(dá)均無明顯影響。
　?。?）

8、高劑量組燈盞花素注射劑可下調(diào)大鼠腦組織CYP4A8（P<0.05）的表達(dá)；中劑量組和低劑量組可明顯下調(diào)大鼠腦組織 CYP4A3（P<0.01）,4A8（P<0.01）的表達(dá)；但高、中、低劑量組對大鼠腦組織CYP4A1、4F4的表達(dá)均無影響。
　?。?）高劑量和中劑量燈盞花素注射劑可有效改善大鼠8h（P<0.01）、24h（P<0.01）、48h（P<0.01）、72h（P<0.01）、96h（P<0.01）、120h（P<0.01

9、）、144h（P<0.01）、168h（P<0.01）行為學(xué)評分、168h腦梗死體積（P<0.01）以及168h死亡率，高劑量組可降低腦組織NOS（P<0.01）的含量，以及血清和腦組織TNOS（P<0.05）（P<0.01）、iNOS（P<0.01）（P<0.05）、MDA（P<0.01）、XOD（P<0.01）（P<0.05），增加腦組織GR（P<0.05）、GSH-PX（P<0.05）、CAT（P<0.05）活力，以及血清和腦組織

10、GSH（P<0.05）（P<0.01）的含量，并提高SOD（P<0.01）（P<0.05）活力；中劑量燈盞花素注射劑可降低血清iNOS（P<0.01）、腦組織TNOS（P<0.05）的含量，提高SOD（P<0.01）的活力，以及降低血清和腦組織MDA（P<0.01）（P<0.05）、XOD（P<0.01）、GSH（P<0.05）（P<0.01）的含量。低劑量燈盞花素注射劑可改善大鼠120h（P<0.05）和168h（P<0.05）行為學(xué)

11、評分，可明顯降低腦組織MDA（P<0.01）、XOD（P<0.01）的含量，但對大鼠血清及腦組織NOS、TNOS、iNOS、MDA、GSH的含量，SOD、CAT、GR、GSH-PX的活力均無影響。
　　結(jié)論：
　　（1）燈盞花素注射劑對大鼠腦缺血再灌注損傷具有明顯的保護(hù)作用。
　?。?）燈盞花素注射劑可能通過調(diào)控大鼠microRNA通路來改善炎癥因子和氧化酶從而降低大鼠腦缺血再灌注損傷。
　?。?）燈盞花素注射劑