啞鈴型探針滾環(huán)擴增檢測miRNA及新型卟啉化合物的合成與性質(zhì).pdf

1、本論文的工作分為啞鈴型探針滾環(huán)擴增檢測miRNA和新型卟啉化合物的合成與性質(zhì)兩部分。
　　I.基于啞鈴型DNA探針的指數(shù)滾環(huán)擴增高靈敏度等溫檢測miRNA
　　miRNA在細胞中的異常表達與癌癥的產(chǎn)生、發(fā)展有著密切關(guān)系，miRNA現(xiàn)已成為一種新的癌癥治療靶點。由于其穩(wěn)定性差、家族序列同源性高等特點，探索高靈敏度、高特異性的miRNA檢測方法一直是科學(xué)家們的目標。滾環(huán)擴增技術(shù)（RCA）是近年來發(fā)展起來的一項等溫體外核酸擴增技術(shù)

2、，選擇性好、靈敏度高且方便快捷，逐漸被應(yīng)用于多種miRNA定量分析。
　　本文我們設(shè)計了一種啞鈴型DNA探針，該探針集特異性結(jié)合靶標、擴增和發(fā)出熒光信號三種功能于一體。利用該探針通過指數(shù)型滾環(huán)擴增可以實現(xiàn)對miRNA樣品的高靈敏度定量檢測，檢出限可達0.001zmol，并且具有跨越7個數(shù)量級的較大的動態(tài)檢測范圍。此外，該檢測方法采用等溫擴增方式，不需要昂貴的控溫設(shè)備，檢測成本較低。
　　II.新型卟啉化合物的合成及水溶性陽離

3、子卟啉化合物i-TMPipEOPP的DNA光切割作用研究
　　由于結(jié)構(gòu)的特殊性，卟啉化合物具有獨特的光電性質(zhì)，在催化、分析化學(xué)、化學(xué)傳感以及癌癥的診斷治療等領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用。芘是一種平面的稠環(huán)芳烴，熒光量子率高、熒光壽命長，在溶劑中可發(fā)射出長波長的熒光，在化學(xué)傳感器方面有著重要應(yīng)用。雖然卟啉化合物和芘類化合物在各個領(lǐng)域中都有廣泛的應(yīng)用，但是鮮少有將二者結(jié)合在一起綜合研究的報道。本文合成了四種芘卟啉化合物，并利用紅外光譜、質(zhì)譜、核磁

4、氫譜等手段表征了它們的結(jié)構(gòu)。
　　其次，利用瓊脂糖凝膠電泳法研究了一種水溶性陽離子卟啉i-TMPipEOPP對超螺旋pBR322質(zhì)粒DNA的光切割作用。結(jié)果表明：i-TMPipEOPP對DNA具有較好的光切割作用。在黑暗條件下，i-TMPipEOPP的存在不會對DNA造成損傷；但在光照下較低濃度（0.6μM）即表現(xiàn)出顯著的切割活性，將超螺旋型pBR322 DNA完全轉(zhuǎn)化為缺口型DNA，且反應(yīng)符合假一級動力學(xué)模型。機理研究表明，i-