野菊花農(nóng)藥殘留及主要成分的動態(tài)研究.pdf

1、目的:
　　建立一種野菊花中38種農(nóng)藥多殘留的前處理及氣相質(zhì)譜-質(zhì)譜檢測方法;并應(yīng)用該方法檢測湖北地區(qū)兩個基地的野菊花藥材生長期間的農(nóng)藥殘留情況以及檢測收集于廣東地區(qū)不同藥店和醫(yī)院藥房的野菊花藥材，初步了解野菊花的農(nóng)藥殘留污染現(xiàn)狀，為野菊花的農(nóng)藥殘留的限量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。同時，檢測野菊花生長期間的總黃酮含量以及蒙花苷、木犀草素、綠原酸的含量，初步探尋其主要成分的動態(tài)變化，為更好地開發(fā)利用野菊花資源提供參考。
　　方法與結(jié)果:<

2、br>　　通過優(yōu)化氣相色譜質(zhì)譜參數(shù)（進(jìn)樣口溫度、升溫梯度）、樣品前處理（提取溶劑）、純化方法(SPE固相萃取柱及洗脫溶劑、洗脫溶劑量)，確定了以乙腈為提取溶劑，勻漿法提取，選用TPH固相萃取柱凈化處理。氣相色譜質(zhì)譜條件:選用色譜柱AgilentDB-1701石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm（內(nèi)徑），0.25μm)，柱升溫程序:初始溫度40℃，保持1min，以30℃/min升溫至160℃，再以3℃/min升溫至250℃，再以10℃/

3、min升溫至300℃，保持10min。載氣:高純氦（純度:99.999％）;柱流速:1.2mL/min;進(jìn)洋口溫度:290℃，不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣量1μL;離子源溫度:230℃;接口溫度:280℃;電離模式為電子轟擊電擊(EI)，電子能量:70eV;數(shù)據(jù)采集為選擇離子檢測模式(SIM)。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，具有操作簡便、檢測成本低、快速測定等優(yōu)點(diǎn)。三個時期（萌芽期、生長期，花期）38種農(nóng)藥檢出率在21.05％～23.68％，所有樣品農(nóng)藥檢出殘留量

4、低于0.090mg/kg，三氯殺螨砜在萌芽期、生長期、花期中殘留:根＞葉＞莖;亞胺硫磷在三時期中殘留:葉＞根，在花期中殘留:葉＞根＞花;倍硫磷在花期、萌芽期中殘留:葉＞根（莖），但在生長期中根＞葉（莖）。倍硫磷在不同時期中相同部位分布趨勢:營養(yǎng)生長期＞花期＞生殖生長期;亞胺硫磷在不同時期中相同部位分布趨勢:花期＞營養(yǎng)生長期＞生殖生長期。對于野菊花商品學(xué)藥材，檢出總六六六、敵敵畏、乙酰甲胺磷、亞胺硫磷、倍硫磷、伏殺磷等農(nóng)藥，但是超過限量的

5、農(nóng)藥殘留極少，僅有總六六六有一例超標(biāo)。
　　野菊花黃酮類物質(zhì)的提取純化工藝確定為，甲醇回流3h，大孔樹脂AB-8純化，吸附90min，水洗至無色，80％乙醇以2mL/min的流速洗脫4倍柱體積。并且進(jìn)行方法學(xué)考察，方法穩(wěn)定可靠。用建立的方法檢測生長期間野菊花不同部位總黃酮含量，結(jié)果顯示基地藥材生殖生長期的葉的總黃酮含量與花期花的總黃酮含量相近，可為野菊花總黃酮的研究及應(yīng)用提供原材料。同時建立一種HPLC法同時檢測綠原酸、木犀草素和

6、蒙花苷的含量，方法簡便可行，用建立的方法檢測不同時期根、莖、葉、花的三種成分含量，結(jié)果顯示綠原酸在營養(yǎng)生長期中葉中含量最高，在生殖生長期和花期中根的含量最高。木犀草素在營養(yǎng)生長期時，不同部位含量變化為葉＞莖＞根，在花期中，葉＞莖（根），且在葉中的含量均較高。蒙花苷在三個時期含量變化差異較大，在營養(yǎng)生長期、生殖生長期中根、莖、葉中蒙花苷含量均較高，在葉中含量甚至高于花期中花的蒙花苷含量。
　　結(jié)論:
　　初步了解野菊花三個時期

7、中根、莖、葉、花中主要成分的變化，綠原酸的營養(yǎng)生長期中的葉及生殖生長期、花期中根的含量試驗(yàn)中證實(shí)比花期中花的含量高，可見野菊花可為綠原酸應(yīng)用于藥物研究提供原材料。木犀草素和蒙花苷含量變化與總黃酮含量的變化趨勢一致。黃酮類物質(zhì)是自然界廣泛存在的天然藥物有效成分，具有抗菌、抗氧化、抗炎鎮(zhèn)痛等生物活性。野菊花營養(yǎng)生長期和生殖生長期總黃酮含量與花期中花的總黃酮含量相近，野菊花的開發(fā)利用可不僅僅局限于花期中的花，其營養(yǎng)生長期和生殖生長期的葉、根等

8、部位可提供研究價值。
　　建立的農(nóng)藥殘留檢測方法結(jié)合勻漿提取、固相萃取、氣相色譜質(zhì)譜法等成熟的技術(shù)，采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液匹配的方法同時測定野菊花這一復(fù)雜基質(zhì)中38種農(nóng)藥殘留，建立的方法具有檢測指標(biāo)多、凈化效果好、節(jié)省溶劑等特點(diǎn)。對湖北基地藥材中不同部位（根、莖、葉、花）中農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測，三個時期38種農(nóng)藥檢出率在21.05％～23.68％，但無農(nóng)藥殘留超標(biāo)現(xiàn)象。對于野菊花商品學(xué)藥材，含氯農(nóng)藥總體檢出率高，但僅有總六六六有一例超標(biāo)，總