野菊花中抗炎免疫和抗腫瘤有效部位及其化學(xué)成分的研究.pdf

1、野菊花系菊科野生草本植物野菊(ChrysanthemumindicumL.)的干燥頭狀花序。自古以來野菊花即為常用清熱解毒之中藥。本課題分別對野菊花抗炎免疫和抗腫瘤有效部位進行篩選，并對有效部位的化學(xué)成分作了進一步分離。主要研究內(nèi)容包括以下五方面： 1、首次通過抗炎活性篩選得到野菊花抗炎有效部位，并研究該部位對環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫功能低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn)，野菊花抗炎有效部位YP-3(150，300mg*kg-1，ig)能

2、顯著提高環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生溶血素水平以及DNFB誘導(dǎo)的DTH反應(yīng)，提示其不僅能提高淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體水平，還能使T細(xì)胞活化。同時，YP-3(150，300mg*kg-1，ig)能顯著提高小鼠血清抗體IgM、IgG產(chǎn)生水平，提示其可能通過促進B細(xì)胞增殖和分化為分泌抗體的漿細(xì)胞，而增強體液免疫功能；另外，YP-3(150，300mg*kg-1，ig)能顯著增強單核-巨噬細(xì)胞的吞噬功能，促進單核-巨噬細(xì)胞將抗原呈遞給B細(xì)胞。以上研究結(jié)果

3、表明YP-3具有抗炎作用和免疫調(diào)節(jié)作用。 2、采用柱色譜，薄層色譜和低壓液相色譜從YP-3中分離得到了3個黃酮成分，分別為蒙花苷、木犀草素和木犀草素-7-O-葡萄糖苷，提示抗炎免疫作用可能與黃酮類化合物有關(guān)。 3、以總黃酮含量為指標(biāo)，探討有效部位野菊花總黃酮的提取純化工藝。提取工藝的優(yōu)化條件是95％乙醇15倍量回流提取2次，每次2h。純化野菊花總黃酮的優(yōu)化工藝參數(shù)為：AB-8大孔吸附樹脂，原液上樣濃度1.2～1.5mg/

4、mL，最大吸附量為16.8mg/g干樹脂，吸附速度為1BV/h，上樣2次，吸附時間為0.5h，洗脫劑為50％乙醇，用量為4BV，洗脫速度為4BV/h，樹脂可重復(fù)使用3次。結(jié)果表明，樹脂對野菊花總黃酮具有良好的吸附性能，總黃酮純度能達到33.9％，比粗提物純度(5.7％)提高了近5倍，應(yīng)用AB-8大孔吸附樹脂純化野菊花總黃酮得到了滿意的效果。 4、采用了二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹、角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠足腫脹、棉球誘導(dǎo)的大鼠肉芽腫作為一般

5、性炎癥模型，經(jīng)典的佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)大鼠模型作為免疫性炎癥模型研究了野菊花總黃酮的抗炎作用，并對其抗炎免疫作用機制作進一步探討。野菊花總黃酮(100，200mg*kg-1)可明顯抑制AA大鼠原發(fā)性和繼發(fā)性炎癥反應(yīng)，能使AA大鼠低下的脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和IL-2水平產(chǎn)生恢復(fù)接近正常水平，而且能降低AA大鼠腹腔巨噬細(xì)胞過高的IL-1、PGE2、TNF-α的產(chǎn)生，在降低AA大鼠腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清中MDA和NO水平的同時，提高AA大鼠腹腔巨

6、噬細(xì)胞培養(yǎng)上清中過低的SOD含量。提示，野菊花總黃酮對AA大鼠的治療作用與其改善AA大鼠異常的細(xì)胞免疫功能，平衡細(xì)胞因子水平，降低脂質(zhì)過氧化，恢復(fù)抗氧化酶活性等有關(guān)。 5、首次對野菊花的抗腫瘤活性部位進行篩選，并對活性部位作進一步分離，得到4個化合物，篩選出2個活性成分化合物Ⅰ和Ⅱ，采用光譜方單晶x-線衍射法鑒定了化合物Ⅰ的結(jié)構(gòu)為(1R，9S，10S)-10-羥基-8(2'，4'二炔己叉)-9-異戊酰-2，7-雙氧代[5，4]癸