Inhibition of chemically induced mouse colitis with polysaccharide extracted from Agaricus blazei Murill(ABM).pdf

1、炎癥性腸病(IBD)是一個世界性的問題，是由于免疫功能障礙及不明病因的膜屏障損傷而引起的疾病。IBD發(fā)病率隨著年齡的增長而增長，同時也會隨著社會環(huán)境因素的改變而變化。目前對于IBD的治療方法十分有限，通常采用抗生素、氨基水楊酸、糖皮質激素或免疫調節(jié)劑進行治療，可是對于患者其藥物的副作用和可能引起的其他作用并不良好。因此，在這種治療背景下，對于這個世界性的疾病問題，更有療效的治療方法、更安全的治療方案的探索也更為迫切。在早期文明中，蘑菇被

2、認為是一種特殊的美昧食材，同時被視為具有營養(yǎng)藥用價值的植物，它包含大量的膳食纖維、礦物質和維生素。除此之外，蘑菇中含有大量的多糖，這些多糖作為非消化發(fā)酵的碳水化合物對人體的健康具有非常好的作用，它能夠刺激機體腸道有益菌的生長同時抑制病原菌在胃腸道增殖。
　　目的：
　　本實驗就姬松茸菇多糖(ABM)的提取、特點及其對小腸結腸炎的影響進行研究。
　　方法：
　　本實驗利用熱水和乙醇萃取法，對ABM多糖進行提取，提取

3、物中蛋白經(jīng)Sevag法去除，最終使用高效液相色譜法(HPLC)對提取獲得的單糖進行分析處理。通過使用葡聚糖硫酸鈉藥物(DSS)建立小腸結腸炎動物模型，同時將動物模型分為四組:正常對照組、DSS結腸炎組、DSS與姬松茸多糖共同作用組、姬松茸多糖作用組，進一步評價姬松茸多糖對小腸結腸炎的影響。姬松茸多糖組為在DSS藥物處理誘導結腸炎發(fā)生后兩周再進行給予，從而進行治療。本研究DSS結腸炎組為通過使用4％葡聚糖硫酸鈉溶液作為小鼠飲水從而誘導小鼠

4、結腸炎的發(fā)生。在實驗結束后，通過組織學病理切片等技術手段對結腸損傷程度進行觀察檢測，通過髓過氧化物酶(MPO)對酶活性進行檢測，通過阿爾新藍和核固紅染色法對杯狀細胞的產(chǎn)生進行檢測。同時，通過免疫組織化學和Western blot分析等手段，對結腸組織中的粘蛋白2(MUC2)、三葉因子3(TFF3)、肝細胞生長因子(HGF)、COX-2和NF-κB細胞因子的表達進行檢測。
　　結果：
　　從ABM提取純化得到多糖產(chǎn)量的比例為2

5、％。通過HPLC對姬松茸的多糖提取物的分析表明，鼠李糖、巖藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸為其中主要單糖。與結腸炎對照組相比，使用多糖組的小鼠表現(xiàn)為抑制結腸炎的發(fā)生，促進杯狀細胞的產(chǎn)生，增加MUC2，TFF3和HGF的表達，同時參與了腸道屏障功能。同時，姬松茸多糖組中表明，姬松茸多糖(ABM)具有降低炎癥相關蛋白COX-2，NFkB和MPO活性，DSS對照組確實無此現(xiàn)象。綜上可知，姬松茸多糖(ABM)