一個擬南芥晚花突變體的定位與分析.pdf

1、開花是植物由營養(yǎng)生長向生殖生長轉換的一個重要轉折點。在模式植物擬南芥中，開花啟動至少受光周期途徑、春化途徑、自主途徑和赤霉素途徑等四條途徑的調(diào)控。這個調(diào)控網(wǎng)絡的復雜性有必要分離更多的開花時間突變體以更好的理解開花調(diào)控的遺傳和分子基礎。本實驗室以Columbia型擬南芥為材料，通過EMS誘變篩選到一個晚花突變體，命名為flowering locus r（flr）。本研究對此突變體的遺傳背景進行了純化，構建了作圖定位群體，對突變基因進行了定

2、位。
　　為了純化突變體的遺傳背景，我們以野生型(Columbia ecotype)為母本，突變體(Columbia ecotype)為父本進行雜交，這樣發(fā)生在葉綠體和線粒體基因組中的突變就會去除。種植雜交一代(F1)，F(xiàn)1自交產(chǎn)生子二代(F2)，從F2中選擇晚花表型的突變體，純化突變體的遺傳背景，以減少額外突變對后續(xù)工作的影響。
　　為了構建作圖群體，將突變體flr與不同遺傳背景的Ler生態(tài)型雜交，收獲子一代(F1)種子，

3、F1自交產(chǎn)生子二代(F2)，從F2中選擇具有晚花表型的突變體作為定位群體。提取群體中每一晚花突變體的基因組DNA，進行基因型分析。利用已知的和自己創(chuàng)制的SSLP分子標記對群體進行了基因型分析。通過連鎖關系分析，該基因位于分子標記NGA106和T20D1-6801之間。
　　本實驗室前期的研究表明，此突變體的FLC表達量增加。在擬南芥開花調(diào)控網(wǎng)絡中，除了自主途徑基因突變解除對FLC表達的抑制以外，有功能的FRI也能促進FLC的表達。