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文檔簡(jiǎn)介
1、植物激素ABA在植物生命活動(dòng)中起著多種重要作用,它能通過調(diào)控細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜的代謝過程參與植物對(duì)干旱、鹽堿和冷害等多種脅迫環(huán)境的應(yīng)答。同時(shí),ABA在植物發(fā)育過程中也起著非常重要的作用,包括種子貯存蛋白和脂類的合成,提高種子抗旱性,調(diào)控休眠和萌發(fā)過程以及植株再生等。
本試驗(yàn)研究主要材料的最初來源是雌二醇誘導(dǎo)時(shí)獲得的功能獲得性甘露醇不敏感突變體。遺傳學(xué)分析結(jié)果顯示該突變體的表型能夠穩(wěn)定遺傳。我們將之命名為gar16,并用TAIL-P
2、CR的方法進(jìn)行了基因克隆。BLAST比對(duì)及分析結(jié)果顯示T-DNA插入到GAR16基因的啟動(dòng)子區(qū)。GAR16基因?qū)儆贑YP450超家族,編碼一個(gè)鐵依賴型單加氧酶。半定量RT-PCR分析顯示:與野生型相比,突變體中GAR16基因幾乎沒有表達(dá),而在經(jīng)雌二醇誘導(dǎo)后,該基因的表達(dá)量得到明顯提高,甚至是野生型的幾倍。在進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn),以子葉發(fā)生率為標(biāo)準(zhǔn),經(jīng)誘導(dǎo)后該突變體對(duì)各種濃度的NaCl、ABA脅迫都表現(xiàn)出了一定程度的抗性,即基因超表達(dá)植
3、株的子葉發(fā)生率遠(yuǎn)大于野生型的子葉發(fā)生率。而在甘露醇、NaCl、ABA、赤霉素抑制劑、水楊酸等脅迫下,無論雌二醇誘導(dǎo)與否,突變體和野生型的萌發(fā)率并沒有明顯差別,說明該基因?qū)χ参锏恼{(diào)控是在萌發(fā)后期起作用的。通過根伸長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn),ABA和過氧化氫對(duì)GAR16基因超表達(dá)植株的主根抑制程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于野生型,暗示GAR16基因可能參與了過氧化氫應(yīng)答ABA調(diào)控?cái)M南芥根形態(tài)發(fā)育的過程。我們對(duì)ABA處理后相關(guān)基因表達(dá)量的RT-PCR分析結(jié)果表明:GAR1
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