黃酮類化合物與胰蛋白酶和透明質(zhì)酸酶相互作用及其抗炎機(jī)理研究.pdf

1、透明質(zhì)酸酶和胰蛋白酶是炎癥發(fā)生與發(fā)展過程中的重要酶類物質(zhì)，降低或抑制這兩種酶的活性是防止炎癥發(fā)生的有效途徑。研究表明，黃酮類化合物具有良好的抗炎活性，并且已有大量實(shí)驗(yàn)證明黃酮類化合物具有較強(qiáng)的抑制透明質(zhì)酸酶的活性。然而，對(duì)于黃酮類化合物抑制透明質(zhì)酸酶的分子機(jī)理及黃酮類化合物對(duì)胰蛋白酶的抑制活性及其抑制機(jī)理卻未見報(bào)道。因此，本研究采用光譜法結(jié)合分子對(duì)接技術(shù)系統(tǒng)研究了20種黃酮類化合物與透明質(zhì)酸酶及胰蛋白酶的相互作用，從而為黃酮類化合物的抗

2、炎機(jī)理提供科學(xué)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黃酮類化合物對(duì)透明質(zhì)酸酶和胰蛋白酶的內(nèi)源熒光均有明顯的猝滅作用，且是由于非共價(jià)結(jié)合形成了復(fù)合物而引起的靜態(tài)猝滅。根據(jù)加入黃酮類化合物前后透明質(zhì)酸酶和胰蛋白酶熒光強(qiáng)度的變化值，計(jì)算獲得復(fù)合物的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)、結(jié)合距離及作用力類型等參數(shù)，從而揭示黃酮類化合物與透明質(zhì)酸酶及胰蛋白酶的作用模式。并且通過同步熒光、三維熒光和分子對(duì)接技術(shù)對(duì)黃酮類化合物與透明質(zhì)酸酶和胰蛋白酶所形成的復(fù)合物作進(jìn)一步研究，結(jié)果表明