五味子及含五味子復(fù)方中藥的抗抑郁作用與機(jī)制研究.pdf

1、目的:五味子為常用的寧心安神中藥，同時具有斂陰柔肝之功，研究發(fā)現(xiàn)五味子具有潛在抗抑郁作用，但對其抗抑郁作用的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理缺乏系統(tǒng)研究。本研究采用行為藥理學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)手段，研究寧心安神中藥五味子及其木脂素類成分、含五味子復(fù)方中藥JWYQS抗抑郁作用及可能的作用機(jī)制，并重點圍繞復(fù)方JWYQS開展抗抑郁神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制研究。
　　方法:
　　(1)采用小鼠急性行為絕望模型（懸尾實驗和強(qiáng)迫游泳實驗）及自發(fā)活動實驗，對五味子

2、及其木脂素類成分(SCE、StA、Sch B、Sch A、SCH)進(jìn)行抗抑郁活性評價;采用5-羥色氨酸(5-HTP)甩頭實驗和育亨賓毒性實驗兩種藥物相互作用模型，研究SCE、StA、Sch B、SchA、SCH對單胺系統(tǒng)的影響。
　　(2)采用小鼠急性行為絕望模型、小鼠獲得性無助模型，對含五味子復(fù)方中藥JWYQS抗抑郁活性進(jìn)行多模型綜合評價;圍繞單胺假說，采用5-HTP甩頭實驗、育亨賓毒性實驗、PCPA拮抗實驗和利血平耗竭實驗4個

3、藥物相互作用模型，評價JWYQS對單胺能神經(jīng)系統(tǒng)的影響，并采用高效液相色譜-電化學(xué)檢測（HLPC-ECD）方法，檢測JWYQS對利血平耗竭小鼠不同腦區(qū)內(nèi)單胺遞質(zhì)含量的影響;圍繞神經(jīng)營養(yǎng)和神經(jīng)可塑性假說，采用蛋白免疫印跡(WB)技術(shù)，評價JWYQS對獲得性無助小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子及其相關(guān)MEK-ERK-CREB信號通路的影響;圍繞炎癥假說，采用LPS誘導(dǎo)模型，評價復(fù)方藥JWYQS對炎癥因子及AKT-NF-κB信號通路的影響;并采用酶聯(lián)免疫法檢

4、測JWYQS對獲得性無助模型小鼠細(xì)胞因子的影響。
　　結(jié)果:
　　(1)在行為絕望模型中，與空白組相比，五味子木脂素類成分SCE、StA、Sch B、SCH均可顯著性降低小鼠懸尾的不動時間，StA、Sch B、SchA、SCH可顯著性降低小鼠強(qiáng)迫游泳的不動時間;自發(fā)活動實驗結(jié)果顯示，實驗劑量范圍內(nèi)SCE、StA、Sch B、SchA、SCH對中樞神經(jīng)系統(tǒng)無明顯興奮或抑制作用。在5-HTP甩頭實驗中，SCH(10 mg·kg-

5、1)可顯著地增加小鼠的甩頭行為;在育亨賓毒性實驗中，SCE、StA、Sch B、SchA、SCH對小鼠死亡數(shù)無增強(qiáng)作用。
　　(2)在行為絕望模型中，與空白組相比，JWYQS（100～200 mg·kg-1）可顯著縮短小鼠懸尾和強(qiáng)迫游泳的不動時間;自發(fā)活動實驗結(jié)果顯示，在受試劑量范圍內(nèi)，JWYQS對中樞神經(jīng)系統(tǒng)無興奮或抑制作用;在小鼠習(xí)得性無助模型中，JWYQS(50～200 mg·kg-1)可顯著逆轉(zhuǎn)電擊引起的小鼠逃避潛伏的延長

6、及逃避失敗次數(shù)的增加。在5-HTP甩頭測驗中，JWYQS(100、200 mg·kg-1)可顯著地增加小鼠的甩頭行為;在育亨賓毒性實驗中，JWYQS(50～200 mg· kg-1)對小鼠死亡數(shù)無增強(qiáng)作用;在PCPA拮抗實驗中，小鼠強(qiáng)迫游泳結(jié)果顯示PCPA可取消JWYQS(100、200 mg·kg-1)的抗抑郁作用;在利血平耗竭實驗中，JWYQS(100、200 mg·kg-1)可逆轉(zhuǎn)利血平耗竭單胺遞質(zhì)導(dǎo)致的眼瞼下垂、但對肛溫降低和運(yùn)

7、動不能無影響，同時降低利血平耗竭小鼠海馬區(qū)5-HIAA含量及5-HIAA/5-HT的代謝轉(zhuǎn)換率;WB結(jié)果表明，JWYQS(50～200 mg·kg-1)可顯著逆轉(zhuǎn)獲得性無助小鼠海馬區(qū)BDNF、TrkB、p-ERK、p-CREB和p-GSK3β蛋白表達(dá)的減少;在LPS誘導(dǎo)抑郁模型中，JWYQS(50～200 mg·kg-1)可顯著的縮短LPS引起的小鼠懸尾和強(qiáng)迫游泳不動時間的延長，逆轉(zhuǎn)蔗糖偏嗜度的降低，逆轉(zhuǎn)LPS誘導(dǎo)小鼠海馬區(qū)促炎細(xì)胞因子

8、IL-1β和TNF-α的增加，并可顯著性逆轉(zhuǎn)LPS誘導(dǎo)小鼠海馬區(qū)p-AKT蛋白表達(dá)的減少和NF-κB蛋白的增加;此外，JWYQS(50～200 mg·kg-1)可顯著逆轉(zhuǎn)獲得性無助小鼠海馬區(qū)促炎細(xì)胞因子IL-1β、IL-1O的增加和抗炎細(xì)胞因子IL-4的降低，
　　結(jié)論:
　　(1) SCE、StA、Sch B、Sch A、SCH在小鼠的行為絕望模型上具有顯著的抗抑郁作用，其中SCH的作用機(jī)制可能與增加腦內(nèi)5-HT含量有關(guān)。