基于色譜-質(zhì)譜技術(shù)研究青錢(qián)柳葉化學(xué)成分.pdf

1、青錢(qián)柳為胡桃科青錢(qián)柳屬植物，民間主要用于清熱消腫、止痛，屬于我國(guó)特有的珍稀樹(shù)種。近年來(lái)，青錢(qián)柳的研究由大部分集中于小分子物質(zhì)分離鑒定及生物活性方面，開(kāi)始逐漸轉(zhuǎn)向分子量較大或成分較復(fù)雜的組分如多糖、皂苷、生物堿等方面。
　　本文分別采用SPME-GC-MS和UPLC-QTOF-MS/MS對(duì)青錢(qián)柳葉中揮發(fā)性成分及酚酸提取物中組分進(jìn)行定性分析，并采用LC-QqQ-MS測(cè)定其中主要的酚酸含量。此外，采用不同極性溶劑對(duì)青錢(qián)柳葉進(jìn)行提取，并測(cè)

2、定其總酚、總黃酮、總糖含量及抗氧化活性，最后采用UPLC-QTOF-MS/MS對(duì)抗氧化活性成分進(jìn)行分析鑒定。主要研究結(jié)果如下：
　　第1章：介紹了近年來(lái)國(guó)內(nèi)外有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道青錢(qián)柳化學(xué)成分、分離分析方法及生物活性方面的研究進(jìn)展。簡(jiǎn)要概述了青錢(qián)柳的化學(xué)成分提取技術(shù)及分析方法現(xiàn)狀，并闡述了液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在植物化學(xué)成分分析中的優(yōu)勢(shì)。
　　第2章：采用固相微萃取（SPME）和氣相色譜-三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-QQQ-MS

3、）相結(jié)合的方法對(duì)兩個(gè)產(chǎn)地（江西修水野生和浙江文成人工栽培）的青錢(qián)柳葉揮發(fā)性成分進(jìn)行研究，并比較了它們?cè)趽]發(fā)性化學(xué)成分種類及含量上的差異。結(jié)果表明：在兩個(gè)產(chǎn)地的青錢(qián)柳葉中共鑒定出91種揮發(fā)性組分，共有44種揮發(fā)性組分，且主要是碳?xì)浠衔镱?、醇類、醛類、酯類、酮類、萘類和醚類化合物，但兩個(gè)樣品在揮發(fā)性成分的具體組成和含量上存在一定的差異。野生青錢(qián)柳葉的揮發(fā)性成分主要是β-瑟林烯（18.52％）、石竹烯（8.11%）、β-甜沒(méi)藥烯（6.01%

4、）、β-欖香烯（5.36%）、順-香葉基丙酮（4.02%）等，人工栽培青錢(qián)柳葉的揮發(fā)性成分主要是β-波旁烯（11.05%）、β-瑟林烯（10.91%）、石竹烯（7.03%）、苯甲醇（7.01%）、2,6,11-三甲基十二烷（5.16%）、2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯基)-雙環(huán)[3.1.1]庚-2-烯（5.36%）等。
　　第3章：采用UPLC-QTOF-MS/MS定性分析青錢(qián)柳葉酚酸提取物中化學(xué)成分，并采用LC-QqQ

5、-MS測(cè)定其中六種酚酸的含量，即沒(méi)食子酸、原兒茶酸、對(duì)羥基苯甲酸、咖啡酸、對(duì)香豆酸和阿魏酸。結(jié)果顯示：可溶性酚酸提取物中共初步鑒定出了22種化學(xué)成分，包括3種有機(jī)酸、9種酚酸、4種黃酮、3種酯類和3種其他類化合物，束縛性酚酸提取物中總共鑒定出26種化合物，包括8種有機(jī)酸、8種酚酸、4種黃酮和6種其他化合物；青錢(qián)柳葉中主要以羥基肉桂酸型酚酸含量較高，羥基苯甲酸型酚酸含量較少，且可溶性酚酸含量要大于束縛酚酸的含量，其中咖啡酸的含量最高，分別

6、為583.61μg/mg和195.52μg/mg。
　　第4章：利用比色法測(cè)定青錢(qián)柳葉不同溶劑（水、70%乙醇、乙酸乙酯和正己烷）提取物中總酚、總黃酮、總糖含量及抗氧化活性（DPPH自由基清除能力、還原能力、總抗氧化能力、Fe2+鰲合能力），考察酚類物質(zhì)含量與抗氧化活性的相關(guān)性，并采用UPLC-QTOF-MS/MS分析提取物中主要活性成分。結(jié)果表明：不同提取物中總酚、總黃酮、總糖含量及抗氧化活性之間存在顯著性差異且70%乙醇提取物

7、表現(xiàn)出最高的總酚（219.01 mg GAE/g）、總黃酮含量（7.23 mg CE/g）及最強(qiáng)的DPPH自由基清除能力（35.46 mg TE/g）和還原能力（1.89 mmol FeSO4/g）；總酚、總黃酮含量與DPPH自由基清除能力、還原能力之間呈顯著正相關(guān)，與總抗氧化能力呈顯著負(fù)相關(guān)，表明多酚類物質(zhì)是青錢(qián)柳中主要的抗氧化劑。UPLC-QTOF-MS/MS分析70%乙醇提取物并初步鑒定出22種化合物，包括8種三萜皂苷類、5種黃酮