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1、目的:評(píng)價(jià)成骨細(xì)胞MC3T3-E1在經(jīng)微弧氧化-堿處理-殼聚糖-海藻酸鈉層層自組裝涂層處理的鈦合金表面的生物相容性。研究不同的消毒方式影響材料表面的活性,針對(duì)純鈦表面微弧氧化堿處理--殼聚糖-海藻酸鈉復(fù)合涂層,分別采用高溫高壓紫外線照射消毒方式,檢測(cè)對(duì)成骨細(xì)胞MC3T3-E1生長(zhǎng)情況的影響。
方法:
1.將鈦片進(jìn)行微弧氧化堿處理,再分別進(jìn)行殼聚糖、殼聚糖-海藻酸鈉涂層處理。純鈦微弧氧化組為對(duì)照 A組、純鈦微弧氧化-堿
2、處理-殼聚糖復(fù)合處理為實(shí)驗(yàn) B組、純鈦微弧氧化-堿處理-殼聚糖-海藻酸鈉復(fù)合處理為 C組。通過 CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同時(shí)間細(xì)胞黏附情況以及增殖情況,激光共聚焦檢測(cè)早期細(xì)胞骨架形態(tài),掃描電鏡觀察試件表面形貌,ALP檢測(cè)其不同時(shí)間堿性磷酸酶活性。
2.由實(shí)驗(yàn)1得出實(shí)驗(yàn)組 C:純鈦微弧氧化-堿處理-殼聚糖-海藻酸鈉復(fù)合處理的復(fù)合涂層對(duì)于成骨細(xì)胞粘附增殖以及礦化有較好的促進(jìn)作用的基礎(chǔ)上,將實(shí)驗(yàn)組 C復(fù)合涂層試件分別高溫高壓消毒(hig
3、h temperature and high pressure)簡(jiǎn)稱HTP組和紫外線消毒(ultraviolet)簡(jiǎn)稱U組,觀測(cè)不同的消毒方式對(duì)于復(fù)合涂層表面成骨細(xì)胞粘附增殖以及礦化的影響。
結(jié)果:
實(shí)驗(yàn)1中粘附實(shí)驗(yàn)表明在黏附實(shí)驗(yàn)中 B、C兩組在吸光度數(shù)值上差別不甚顯著,都優(yōu)于A組;增殖實(shí)驗(yàn)中C組的試件表面增殖率顯著高于A、B兩組;通過細(xì)胞骨架觀察,在相同時(shí)間點(diǎn),C組比B組細(xì)胞表現(xiàn)出了更好的生存能力,偽足數(shù)目,偽足長(zhǎng)
4、度,細(xì)胞鋪展面積均優(yōu)于 B組,顯示了更好的細(xì)胞交互通聯(lián)趨勢(shì);C組堿性磷酸酶活性顯著高于A、B兩組。
實(shí)驗(yàn)2中在黏附實(shí)驗(yàn)中U組粘附數(shù)值優(yōu)于HTP組,相同時(shí)間增殖率上U組的增殖程度也明顯好于 HTP組。細(xì)胞骨架形態(tài)學(xué)觀察中,相同時(shí)間的二組試件,U組的細(xì)胞鋪展面積,偽足數(shù)目,偽足數(shù)量也優(yōu)于HTP組,掃描電鏡下觀察HTP組試件表面有明顯的裂紋與缺損,而U組試件表面完整,與不經(jīng)過消毒的原始試件表面無明顯差別。
結(jié)論:
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