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文檔簡介
1、目的:探討犬尿氨酸酶(Kynureninase,KYNU)對Hela/DDP細胞生物學特性的影響。
方法:1、培養(yǎng)Hela及Hela/DDP細胞,通過qPCR和Western Blot方法檢測KYNU在Hela和Hela/DDP細胞株中分別在mRNA和蛋白水平的表達。2、構建KYNU過表達質粒,增強KYNU在低表達細胞中的表達量。3、應用Transwell方法、流式細胞術分別檢測KYNU過表達后對耐藥細胞遷移、侵襲能力及細胞凋
2、亡率的影響。
結果:1、通過qPCR及Western Blot方法檢測發(fā)現(xiàn)KYNU在Hela細胞中mRNA及蛋白水平的表達均高于 Hela/DDP細胞。2、應用 Transwell方法檢測HeLa/DDP細胞、Hela/DDP-空載細胞、Hela/DDP-KYNU細胞的遷移能力,24小時穿過的胞數(shù)分別為125±6、123±5和68±5,Hela/DDP-KYNU組細胞遷移數(shù)較Hela/DDP-空載組少(P﹤0.05)。3、Tr
3、answell方法檢測3種細胞侵襲能力,HeLa/DDP組、HeLa/DDP-空載組、HeLa/DDP-KYNU組24小時穿過的細胞數(shù)分別為69±9、67±5、65±4,KYNU蛋白不影響HeLa/DDP細胞侵襲能力(P>0.05)。4、Hela/DDP組、Hela/DDP-空載組、HeLa/DDP-KYNU細胞凋亡率分別是3.2%±0.09%、4.0%±1.9%、32.4%±3.3%。Hela/DDP-KYNU組細胞凋亡率較Hela/
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