微電極芯片融合系統(tǒng)選育表面活性劑菌株的研究.pdf

1、生物表面活性劑產(chǎn)生菌的選育是生產(chǎn)生物表面活性劑的前提和基礎(chǔ)。原生質(zhì)體電融合法以其獨(dú)特優(yōu)越性，在動(dòng)植物菌株選育中應(yīng)用廣泛。但是現(xiàn)今的電融合技術(shù)在微生物細(xì)胞電融合研究中還存在許多不足，如微生物細(xì)胞體積較小融合電極相對(duì)較大、電脈沖的作用位點(diǎn)不易控制等。針對(duì)以上問(wèn)題，自主研制出基于梳狀交叉微電極陣列的細(xì)胞電融合芯片系統(tǒng)，開(kāi)展了產(chǎn)表面活性劑菌株在該電融合芯片中的選育研究。
　　從油泥漿中篩選出一株高產(chǎn)生物表面活性劑菌株 BS-34。用油平板

2、培養(yǎng)基初篩，排油圈法復(fù)篩，獲得24株產(chǎn)生物表面活性劑的菌株；通過(guò)測(cè)定24株發(fā)酵液的表面張力，獲得一株性能優(yōu)良的表面活性劑高產(chǎn)菌BS-34，其發(fā)酵液的表面張力值為51.47mN/m，乳化力為62％。
　　研究 BS-34原生質(zhì)體化的影響因素，制備出原生質(zhì)體。制備原生質(zhì)體的最優(yōu)條件為蝸牛酶濃度1.5%、酶解溫度33℃、酶解時(shí)間3h、酶解pH值6.0及0.8mol/L山梨醇滲透壓穩(wěn)定劑，生成率和再生率分別為95.2%和8.9%。

3、　　研究原生質(zhì)體融合的影響因素，獲得性能提高的新菌株。在排隊(duì)電壓值2V、頻率1MHz，及離子濃度不大于0.1mmol/l Ca2+及0.1mmol/l Mg2+的混合液條件下，細(xì)胞在電場(chǎng)中有大于90%的成串率。在脈沖峰值電壓50V、持續(xù)時(shí)間80μs、8個(gè)脈沖、間隔1s，溶液為0.1mmol/l Ca2+及0.1mmol/l Mg2+的混合液及0.8mol/L山梨醇的條件下，有最高的融合率8%。通過(guò)電融合獲得一株菌株，其發(fā)酵液的表面張力為