太歲的抑菌作用及對(duì)小鼠免疫功能影響的研究.pdf

1、目的:對(duì)太歲進(jìn)行菌種分離和分子鑒定，探索太歲的組成成分;觀察太歲及其分離菌株發(fā)酵液的抑菌效果;探討太歲對(duì)免疫低下小鼠的免疫功能，以及對(duì)體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞RAW264.7的影響。
　　方法:對(duì)太歲中的菌株進(jìn)行分離純化，提取所純化的太歲分離菌株的基因組DNA，以之為模板，用16S rRNA、18S rRNA和TIS序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過(guò)序列對(duì)比對(duì)太歲菌種進(jìn)行分子鑒定;觀察太歲及其分離菌株發(fā)酵液的抑菌作用。
　　用環(huán)磷酰胺制備免

2、疫低下小鼠模型，太歲溶液灌胃后，通過(guò)體征觀察，臟器指數(shù)測(cè)定;用ELISA檢測(cè)血清IL-2;用CCK-8檢測(cè)淋巴細(xì)胞增值;用SRBC溶血實(shí)驗(yàn)測(cè)定抗體形成細(xì)胞數(shù)量;用中性紅檢測(cè)巨噬細(xì)胞吞噬能力，觀察太歲對(duì)免疫低下小鼠的免疫功能影響。
　　用不同終濃度太歲處理靜息和被LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞RAW264.7，CCK-8測(cè)定細(xì)胞的活性，用中性紅測(cè)定細(xì)胞吞噬能力;用ELISA試劑盒測(cè)定細(xì)胞分泌的NO、IL-1、IL-12，觀察太歲對(duì)巨噬細(xì)胞RA

3、W264.7的影響。
　　結(jié)果:從太歲中分離純化出了三個(gè)菌株，通過(guò)鑒定，一種是真菌Pseudeurotium ovale(假散囊菌屬)，另外兩個(gè)是細(xì)菌分別是Beta proteobacterium MBIC3293（β變形菌屬），bacterium YC-ZS S-LK J183（微小桿菌屬）。太歲及這三個(gè)菌株的發(fā)酵液對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制作用不明顯。
　　在免疫低下小鼠實(shí)驗(yàn)中，模型組脾臟指數(shù)、T淋巴細(xì)

4、胞增值、抗體形成細(xì)胞數(shù)量及巨噬細(xì)胞吞噬能力降低;與模型組比較，太歲組脾臟指數(shù)、T淋巴細(xì)胞增值、抗體形成細(xì)胞數(shù)量及巨噬細(xì)胞吞噬能力升高。
　　用不同終濃度太歲作用于靜息的巨噬細(xì)胞RAW264.7，能夠促進(jìn)其分泌NO、IL-1、IL-12，促進(jìn)其吞噬能力;LPS誘導(dǎo)后，太歲能抑制細(xì)胞分泌NO、IL-1、IL-12，抑制其吞噬能力。
　　結(jié)論:太歲是一種復(fù)雜的生命體，其中包含有真菌Pseudeurotium ovale(假散囊菌屬