小腦-上丘投射神經(jīng)元分布及其投射模式研究.pdf

1、目的：本實驗研究可以進一步證明上丘-小腦-上丘的控制眼球運動神經(jīng)回路的存在。并再次從形態(tài)學(xué)上證明小腦內(nèi)側(cè)核-上丘投射神經(jīng)元末梢在上丘內(nèi)的分布。本研究可進一步搞清小腦的眼球運動控制形態(tài)結(jié)構(gòu)，為深入研究小腦運動學(xué)習(xí)、認知等高級技能，提供形態(tài)學(xué)的證據(jù)，進而推動小腦科學(xué)研究的發(fā)展。 方法：將示蹤標(biāo)記物辣根過氧化酶(HRP)注入貓的上丘內(nèi)，.對其進行逆行行染色；將示蹤標(biāo)記物生物素葡聚糖胺(BDA)注入大鼠小腦內(nèi)側(cè)核尾側(cè)部，對其進行順行染

2、色。手術(shù)后放入籠中飼養(yǎng)4到10天，進行心臟灌流固定、取腦，將腦做成直徑為80μm的連續(xù)切片，將切片用卵白素一生物素HRP-復(fù)合物(ABC)處理，然后用葡萄糖氧化酶進行二氨基聯(lián)苯胺反應(yīng)，這樣就會使神經(jīng)元和它的軸突及其突觸染色，然后用顯微鏡和Adobe Illustrator 9.0繪圖系統(tǒng)，再構(gòu)筑神經(jīng)細胞，使其可視化。 結(jié)果：辣根過氧化酶(HRP)逆行標(biāo)記上丘，神經(jīng)元廣泛的分布在小腦的四個核團中，尤其是小腦內(nèi)側(cè)核的尾側(cè)部。

3、 生物素葡聚糖胺(BDA)順行標(biāo)記小腦內(nèi)側(cè)核的尾側(cè)部，末端投射到上丘各層。從小腦內(nèi)側(cè)核神經(jīng)元發(fā)出的神經(jīng)纖維在小腦內(nèi)走行，經(jīng)對側(cè)小腦上腳出小腦，在中腦附近發(fā)出它的并行分支，一條并行分支不斷的進行再分支，大約經(jīng)過1到10次最終到達末端區(qū)域。主要的核分支(0.2～0.3μm)要比軸突(0.4～0.8μm)干細，而末端分支的直徑(0.1～0.2μm)與主要的核分支的直徑(0.2～0.3μm)相差不大，或者一樣的粗細。 小腦內(nèi)側(cè)核神

4、經(jīng)元的末端突觸分布形式多樣，有的末端分支僅有一個突觸，有的末端分支看起來像是很小的念珠穿成串，有的突觸成簇分布。也有的突觸在主要的分支上。末端突觸圍繞或是膨脹成為圓形或是錠子狀，膨脹的短徑為0.3～0.5μm，長徑為是0.5～0.7μm。每個單一神經(jīng)元的末端突觸大約是75±26個. 從小腦內(nèi)側(cè)核神經(jīng)元發(fā)出的軸突有兩種投射方式。一種是小腦內(nèi)側(cè)核神經(jīng)元發(fā)出神經(jīng)纖維，經(jīng)小腦上腳出小腦，在中腦附近發(fā)出并行分支，其中一部分分支繼續(xù)向嘴側(cè)

5、部走行，到達丘腦，其它分支向背側(cè)走行，到達上丘和后聯(lián)合。另一種是MCN神經(jīng)元出小腦后沒有分支到丘腦，直接在中腦中央附近向背側(cè)走行，且不經(jīng)后聯(lián)合直接投射到上丘各層結(jié)論：神經(jīng)元軸突由尾側(cè)部傳出，在小腦內(nèi)側(cè)核外，又經(jīng)背側(cè)部轉(zhuǎn)向小腦內(nèi)側(cè)核的嘴側(cè)部，穿過中線，經(jīng)對側(cè)小腦上腳，形成鉤束傳出小腦，在下丘水平上，于小腦上腳背側(cè)部離開鉤束，向上走行，一般來說，軸突很少在小腦內(nèi)分支，當(dāng)走行到中腦附近時，開始分支，再分支，一部分到達后聯(lián)合，在后聯(lián)合處繼續(xù)上行