暖地大葉蘚組織培養(yǎng)的研究.pdf

1、暖地大葉蘚(Rhodobryum giganteum(Hook.) Par.)是一種重要的藥用苔蘚植物，對治療心血管疾病具有很好的療效。本論文以暖地大葉蘚幼嫩莖尖為外植體，應用組織培養(yǎng)方法，成功地獲得了無菌的暖地大葉蘚原絲體和植株，在此基礎上，研究了培養(yǎng)基類型、機械切割、激素、溫度、配子體自身的提取液、培養(yǎng)基組成等對原絲體誘導和生成量的影響，同時比較了組織培養(yǎng)誘導形成的配子體形態(tài)、光合和紅外光譜特點。主要成果如下： 1、通過培養(yǎng)

2、基的篩選發(fā)現(xiàn)改良Knops培養(yǎng)基適合原絲體的擴展生長而且能保持兩個月不分化出配子體植株，MS培養(yǎng)基更適合原絲體的分支生長，改良的White培養(yǎng)基中原絲體生長慢同時伴隨植株的分化。 2、運用機械切割法和激素誘導法對原絲體的繁殖進行實驗，發(fā)現(xiàn)機械切割后原絲體繁殖量在一個月內比未切割直接轉接的繁殖量增加一倍；低濃度的2.4-D能促進莖段上原絲體的發(fā)生。 3、培養(yǎng)基的類型和組成對暖地大葉蘚原絲體擴繁有顯著的影響。改良Knops培

3、養(yǎng)基的濃度對原絲體生長影響不大，1/10濃度的改良Knops培養(yǎng)基上生長的原絲體跟全量改良Knops培養(yǎng)基上的原絲體生長無顯著差異。改良Knops培養(yǎng)基組成成分中硼元素對原絲體生長至關重要，甚至比所有微量元素還重要，從原絲體生長看，不含硼元素的改良Knops培養(yǎng)基上的原絲體比不含微量元素改良Knops培養(yǎng)基上的原絲體更差；改良Knops培養(yǎng)基加適量蔗糖和少量(4g．L-1)瓊脂、pH為6.0-7.0的培養(yǎng)基更適合于暖地大葉蘚原絲體的生長

4、。 4、原絲體初始轉接量對暖地大葉蘚原絲體擴繁也有顯著影響，本試驗中以直徑0.8cm左右的原絲體團對原絲體的擴繁生長最為有利。 5、實驗表明，暖地大葉蘚原絲體生長對溫度和水分較為敏感，最適溫度是20-22□。植物激素對原絲體生長有較為明顯的作用，6-BA能誘導出愈傷組織團，NAA使原絲體變黑，分支生長少但原絲體縱向生長長，含KT的培養(yǎng)基中原絲體一個月后有較多幼芽分化。 6、組織培養(yǎng)條件下形成的暖地大葉蘚植株在形態(tài)

5、上有一定程度的分化，論文描述了組培苗的三種類型：大葉項生型、葉片漸小型和小葉長枝型。不同形態(tài)的植株可以從原絲體分化出植株時就有所不同。跟原絲體生長一樣，植株分支繁殖形態(tài)發(fā)生對溫度也比較敏感，最適溫度也是20□—22□。 7、實驗室條件下測定了暖地大葉蘚生長的光合作用指標，發(fā)現(xiàn)組培植株比野生植株有更高的光飽和點，尤其是形態(tài)上變異明顯的枝長葉小型植株，但光合同化速率不如野生采集的植株高；暖地大葉蘚原絲體的光合同化速率較高，與野生植株

6、相近。暖地大葉蘚的植株在光強大于飽和點后(≥400μ mol m—2s-1)出現(xiàn)光抑制現(xiàn)象。水分對植株的光合作用起著很大影響，水分喪失較多(VPD>10)時光合作用被明顯抑制。植株形態(tài)的變異有利于植株適應光照較強(≥350μ mol m—2s-1)下生長，而且變異植株對水分的保持有更好的優(yōu)勢。光合熒光參數(shù)反映出野生采集的植株葉片具有更高的PS□的最大光化學量子產量和PS□的潛在活性，但實際光量子效率和光合電子傳遞速率在兩種生長條件下的植