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文檔簡介
1、為了研究揚(yáng)子鱷(Alligator sinensis)種群MHC基因的多態(tài)性,我們選取了安徽宣城野生揚(yáng)子鱷種群、安徽省揚(yáng)子鱷繁殖研究中心飼養(yǎng)種群和浙江長興飼養(yǎng)種群三個(gè)亞種群的14條揚(yáng)子鱷,利用一對(duì)特異性引物擴(kuò)增出揚(yáng)子鱷MHC II類B基因第三外顯子的部分片段,并對(duì)其進(jìn)行了克隆、測(cè)序,結(jié)果從這些揚(yáng)子鱷樣本中共獲得34種不同序列,每個(gè)亞種群內(nèi)分別檢測(cè)到15,9和10個(gè)不同序列。另外,第三外顯子核苷酸的非同義替換率顯著小于同義替換率,可能暗示
2、了揚(yáng)子鱷種群MHC II類B基因第三外顯子的多態(tài)性不是由平衡選擇保持的。并且在這三個(gè)亞種群中都發(fā)現(xiàn)有相同的等位基因,例如等位基因Alsi-29和Alsi-34,這可能表明這三個(gè)亞種群之間曾經(jīng)發(fā)生過基因交換。
另外,我們分別使用不同方法對(duì)梅花鹿和亳州市藥品監(jiān)督管理局送檢的三件猴骨樣品(BZ01、BZ02和BZ03)進(jìn)行了分子鑒定。對(duì)于梅花鹿的鑒定,我們運(yùn)用了序列特異性擴(kuò)增區(qū)域( SequenceCharacterised Amp
3、lified Region,SCAR)標(biāo)記方法,使用100條隨機(jī)引物分析了皖南地區(qū)黑麂(Muntiacus crinifrons)、黃麂(Muntiacusreevesi)、梅花鹿(Cervus nippon kopschi)和毛冠鹿(Elaphoduscephalophus)等12個(gè)動(dòng)物個(gè)體的隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA( randomlyamplified polymorphic DNA,RAPD),得到一條梅花鹿物種特異性擴(kuò)增片段。對(duì)該片段
4、克隆、測(cè)序后,我們根據(jù)其序列設(shè)計(jì)出一對(duì)梅花鹿特異性鑒定引物。通過這對(duì)引物的使用使得梅花鹿樣品的鑒定更加容易、快捷、可靠。而對(duì)于猴骨樣品,我們則利用線粒體12S rRNA基因和Cyt b基因部分序列,通過DNA序列比對(duì)的方法對(duì)其進(jìn)行了鑒定。結(jié)果表明,BZ01號(hào)樣品為藏酋猴(Macaca thibetana),BZ02和BZ03號(hào)樣品為獼猴(Macaca mulatta)。另外,我們還發(fā)現(xiàn),在利用DNA序列比對(duì)法進(jìn)行近緣物種的鑒定時(shí),不同種
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