鄰苯二甲酸丁基芐酯小鼠神經(jīng)毒性的體內(nèi)和體外研究.pdf

1、目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了有關(guān)于鄰苯二甲酸丁基芐酯(Butyl benzyl phthalate，BBP)的生殖、發(fā)育、氧化損傷及內(nèi)分泌具有一定的毒性干擾作用，然而BBP對動物和人類的神經(jīng)毒性以及BBP在體內(nèi)具體的作用機制究竟是怎么樣的呢？目前還尚待進一步深入的進行研究與探索。
　　本研究采用體外細胞活力測定、神經(jīng)細胞毒性實驗、凋亡作用和體內(nèi)整體動物小鼠行為學實驗、酶活測定、顯微熒光技術(shù)相結(jié)合的實驗方法，來進行BBP神經(jīng)毒性的綜合評價。本

2、研究還平行比較了BBP、DBP以及它們共同的代謝產(chǎn)物MBP對細胞的毒性效應(yīng);通過對腦組織切片進行分析、神經(jīng)遞質(zhì)的變化情況來初步探討B(tài)BP對小鼠學習與記憶能力的影響情況以及可能存在的分子機制。
　　本研究在體外研究中主要是通過MTT法和Hoechst33258染色來進行鄰苯二甲酸丁基芐酯的細胞毒性評價;通過對染毒細胞ROS、MDA、GSH含量的檢測來探究BBP對小鼠神經(jīng)瘤細胞的氧化損傷效應(yīng)。分別采用濃度為的BBP、DBP、MBP來染

3、毒細胞，通過對染毒細胞ROS、MDA、GSH含量的檢測來比較這三種物質(zhì)對小鼠神經(jīng)瘤細胞的毒性強弱。
　　在進行體內(nèi)試驗時，利用一系列的濃度梯度分別為0（對照組），50，250及1，250mg/kg的BBP連續(xù)兩個周對實驗小鼠進行灌胃染毒，同時通過一系列的行為學經(jīng)典實驗:Morris水迷宮，懸尾試驗以及強迫游泳試驗，反映BBP對小鼠學習記憶能力的影響。分別測定了腦、肝、腎組織的氧化損傷水平。為了進一步探究BBP毒性的可能存在的分子機

4、制，測得了左腦組織中5-HT((5-hydroxytryptamine)和p-CREB含量的變化情況。
　　根據(jù)實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)BBP對細胞和組織均有損傷作用。大腦海馬切片圖顯示，隨著BBP的暴露，小鼠海馬區(qū)細胞不完整性逐漸在增加，當BBP的暴露濃度達到了最高濃度組即1，250mg/kg時，海馬區(qū)細胞開始凋亡，而且約有1/3的背側(cè)海馬細胞（控制小鼠空間學習記憶能力）受到損傷，BBP高濃度的暴露造成了海馬CA1區(qū)與DG區(qū)的神經(jīng)元表現(xiàn)出遲